Nature.comን ስለጎበኙ እናመሰግናለን። የሚጠቀሙበት የአሳሽ ስሪት የተወሰነ የCSS ድጋፍ አለው። ለተሻለ ውጤት፣ የአሳሽዎን አዲስ ስሪት (ወይም በኢንተርኔት ኤክስፕሎረር ውስጥ የተኳሃኝነት ሁነታን ማጥፋት) እንዲጠቀሙ እንመክራለን። ይህ በእንዲህ እንዳለ፣ ቀጣይነት ያለው ድጋፍ ለማረጋገጥ፣ ጣቢያውን ያለ ቅጥ ወይም ጃቫስክሪፕት እያሳየን ነው።
የካድሚየም (Cd) ብክለት በዩናን ውስጥ በሚገኘው የመድኃኒት ተክል ፓናክስ ኖቶጊንሴንግ እርሻ ደህንነት ላይ አደጋ ሊያስከትል ይችላል። ከውጭ በሚመጣው የሲዲ ውጥረት ስር፣ የሎሚ አተገባበር (0፣ 750፣ 2250 እና 3750 ኪ.ግ/ሰ/ሜ2) እና በኦክሳሊክ አሲድ (0፣ 0.1 እና 0.2 ሞል/ሊ) ላይ ያለውን ተጽእኖ ለመረዳት የመስክ ሙከራዎች ተካሂደዋል። የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ስልታዊ እና የመድኃኒት ክፍሎች። ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት በሲዲ ውጥረት ስር፣ የሎሚ እና የፎሊያር ስፕሬይ ከኦክሳሊክ አሲድ ጋር የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የCa2+ ይዘትን ሊጨምሩ እና የCd2+ መርዛማነትን ሊቀንስ ይችላል። የኖራ እና የኦክሳሊክ አሲድ መጨመር የፀረ-ኦክሲዳንት ኢንዛይሞችን እንቅስቃሴ ጨምሯል እና የኦስሞቲክ ተቆጣጣሪዎችን ሜታቦሊዝም ቀይሯል። በጣም ጉልህ የሆነው የCAT እንቅስቃሴ በ2.77 እጥፍ መጨመር ነው። በኦክሳሊክ አሲድ ተጽዕኖ ስር የSOD እንቅስቃሴ ወደ 1.78 እጥፍ ጨምሯል። የMDA ይዘት በ58.38% ቀንሷል። ከሚሟሟ ስኳር፣ ነፃ አሚኖ አሲዶች፣ ፕሮሊን እና የሚሟሟ ፕሮቲን ጋር በጣም ጉልህ የሆነ ትስስር አለ። ሎሚ እና ኦክሳሊክ አሲድ የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የካልሲየም አዮን (Ca2+) ይዘትን ሊጨምሩ፣ የሲዲ ይዘትን ሊቀንሱ፣ የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የጭንቀት መቋቋምን ሊያሻሽሉ እና አጠቃላይ ሳፖኒን እና ፍላቮኖይድ ምርትን ሊጨምሩ ይችላሉ። የሲዲ ይዘቱ ዝቅተኛው፣ ከቁጥጥሩ በ68.57% ያነሰ ሲሆን ከመደበኛው እሴት ጋር ይዛመዳል (Cd≤0.5 mg kg-1፣ GB/T 19086-2008)። የSPN መጠን 7.73% ነበር፣ ከሁሉም ህክምናዎች መካከል ከፍተኛውን ደረጃ ላይ ደርሷል፣ እና የፍላቮኖይድ ይዘት በ21.74% በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል፣ ይህም መደበኛ የሕክምና እሴቶችን እና ጥሩ ምርትን ደርሷል።
ካድሚየም (ሲዲ) በተመረቱ አፈርዎች ውስጥ የተለመደ ብክለት ሲሆን በቀላሉ የሚፈልስ ሲሆን ከፍተኛ የሆነ ባዮሎጂያዊ መርዛማነት አለው። ኤል-ሻፌይ እና ሌሎችም 2 የካድሚየም መርዛማነት ጥቅም ላይ የዋሉትን ተክሎች ጥራት እና ምርታማነት እንደሚጎዳ ዘግበዋል። በደቡብ ምዕራብ ቻይና በሚለማ አፈር ውስጥ ከመጠን በላይ የሆነ የካድሚየም መጠን በቅርብ ዓመታት ውስጥ ከባድ ሆኗል። የዩናን ግዛት የቻይና የብዝሃ ሕይወት መንግሥት ሲሆን የመድኃኒት ተክል ዝርያዎች በአገሪቱ ውስጥ ቀዳሚ ደረጃ ላይ ይገኛሉ። ሆኖም የዩናን ግዛት በማዕድን ሀብቶች የበለፀገ ነው፣ እና የማዕድን ቁፋሮ ሂደቱ በአፈር ውስጥ ከባድ የብረት ብክለትን ያስከትላል፣ ይህም የአካባቢውን የመድኃኒት ተክሎች ምርት ይነካል።
ፓናክስ ኖቶጊንሴንግ (ቡርኪል) ቼን3) በአራሊሴያ ቤተሰብ ውስጥ ከሚገኘው የፓናክስ ዝርያ የሆነ በጣም ጠቃሚ የሆነ ዘላቂ የእፅዋት መድኃኒት ተክል ነው። ፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የደም ዝውውርን ያሻሽላል፣ የደም መቆምን ያስወግዳል እና ህመምን ያስታግሳል። ዋናው የምርት ቦታ የዌንሻን ግዛት፣ ዩናን ግዛት ነው። ከ75% በላይ የሚሆነው የአፈር ክፍል በካድሚየም የተበከለ ሲሆን መጠኑ በተለያዩ አካባቢዎች ከ81% እስከ 100% ይለያያል። የሲዲ መርዛማ ውጤት የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የመድኃኒት ክፍሎች ምርትን በእጅጉ ይቀንሳል፣ በተለይም ሳፖኒን እና ፍላቮኖይድ። ሳፖኒንስ አግላይኮኖች ትሪተርፔኖይድ ወይም ስፒሮስታኖች የሆኑ የግሉኮሲዲክ ውህድ አይነት ናቸው። እነሱ የብዙ ባህላዊ የቻይና መድኃኒቶች ዋና ዋና ንጥረ ነገሮች ሲሆኑ ሳፖኒን ይይዛሉ። አንዳንድ ሳፖኒንስ ፀረ-ባክቴሪያ እንቅስቃሴ ወይም እንደ ፀረ-ባክቴሪያ፣ ማስታገሻ እና ፀረ-ካንሰር ውጤቶች ያሉ ጠቃሚ ባዮሎጂያዊ ተግባራት አሏቸው። ፍላቮኖይድስ በአጠቃላይ ሁለት የቤንዚን ቀለበቶች በሦስት ማዕከላዊ የካርቦን አቶሞች በኩል የተገናኙባቸውን ተከታታይ ውህዶች ያመለክታሉ። ዋናው እምብርት 2-ፌኒልክሮማኖን 8 ነው። በእፅዋት ውስጥ የኦክስጅን ነፃ የሆኑ ራዲካሎችን ውጤታማ በሆነ መንገድ ሊያስወግድ የሚችል ጠንካራ አንቲኦክሲደንት ነው። እንዲሁም የእብጠት ባዮሎጂካል ኢንዛይሞችን ዘልቆ መግባትን ሊገታ፣ የቁስል ፈውስን እና የህመም ማስታገሻን ሊያበረታታ እና የኮሌስትሮል መጠንን ሊቀንስ ይችላል። የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ዋና ዋና ንቁ ንጥረ ነገሮች አንዱ ነው። በፓናክስ ጊንሰንግ ምርት አካባቢዎች ውስጥ በአፈር ውስጥ የካድሚየም ብክለትን ችግር መፍታት እና አስፈላጊ የመድኃኒት ንጥረ ነገሮቹን ማምረት ማረጋገጥ አስቸኳይ ፍላጎት አለ።
ሎሚ ከካድሚየም ብክለት የተነሳ የማይንቀሳቀስ አፈርን ለማጽዳት በስፋት ጥቅም ላይ ከሚውሉት ፓሲቫተሮች አንዱ ነው። የፒኤች እሴትን በመጨመር እና የአፈር ኬሽን ልውውጥ አቅም (CEC)፣ የአፈር ጨው ሙሌት (BS) እና የአፈር ሬዶክስ እምቅ አቅም (Eh)3፣ 11ን በመቀየር በአፈር ውስጥ የሲዲ ባዮአቫሊቲ በመቀነስ በአፈር ውስጥ የመምጠጥ እና የማስቀመጥ ችሎታን ይጎዳል። በተጨማሪም፣ ኖራ ከፍተኛ መጠን ያለው Ca2+ ይሰጣል፣ ከCd2+ ጋር አዮኒክ ተቃዋሚ ይፈጥራል፣ በስሮች ውስጥ ለመምጠጥ ቦታዎች ይወዳደራል፣ የሲዲ ወደ አፈር እንዳይጓጓዝ ይከላከላል፣ እና ዝቅተኛ ባዮሎጂካል መርዛማነት አለው። 50 ሚሜል ኤል-1 ካ በሲዲ ውጥረት ስር ሲጨመር፣ በሰሊጥ ቅጠሎች ውስጥ የሲዲ ትራንስፖርት ታግዷል እና የሲዲ ክምችት በ80% ቀንሷል። በሩዝ (ኦሪዛ ሳቲቫ ኤል.) እና በሌሎች ሰብሎች ላይ በርካታ ተመሳሳይ ጥናቶች ሪፖርት ተደርገዋል።12,13።
በቅርብ ዓመታት ውስጥ የከባድ ብረቶች ክምችትን ለመቆጣጠር የሰብል ቅጠላ ቅጠሎችን መርጨት የከባድ ብረቶች ክምችትን ለመቆጣጠር አዲስ ዘዴ ነው። መርሆው በዋናነት በእፅዋት ሴሎች ውስጥ ከሚፈጠረው የቼሌሽን ምላሽ ጋር የተያያዘ ሲሆን ይህም ከባድ ብረቶች በሴል ግድግዳ ላይ እንዲቀመጡ እና በእፅዋት የከባድ ብረቶች መወሰድን ይከለክላል። እንደ የተረጋጋ ዳይኦክሳይድ ኬላቲንግ ወኪል፣ ኦክሳሊክ አሲድ በእፅዋት ውስጥ ከባድ የብረት አየኖችን በቀጥታ ሊያጣ ይችላል፣ በዚህም መርዛማነትን ይቀንሳል። ጥናቶች እንደሚያሳዩት በአኩሪ አተር ውስጥ ያለው ኦክሳሊክ አሲድ Cd2+ን ሊያጣ እና Cd የያዙ ክሪስታሎችን በላይኛው ትሪኮም ሴሎች በኩል ሊለቅ ይችላል፣ ይህም በሰውነት ውስጥ የCd2+ መጠንን ይቀንሳል16። ኦክሳሊክ አሲድ የአፈር pHን መቆጣጠር፣ የሱፐርኦክሳይድ ዲሙታዝ (SOD)፣ የፔሮክሳዝ (POD) እና ካታላዝ (CAT) እንቅስቃሴን ሊያሻሽል ይችላል፣ እና የሚሟሟ ስኳር፣ የሚሟሟ ፕሮቲን፣ ነፃ አሚኖ አሲዶች እና ፕሮሊን ዘልቆ መግባትን ይቆጣጠራል። የሜታቦሊክ ተቆጣጣሪዎች17,18። በእፅዋት ውስጥ ያለው አሲድ እና ከመጠን በላይ Ca2+ በኒውክሊየቲንግ ፕሮቲኖች ተግባር ስር የካልሲየም ኦክሳሌት ፕሪንቲስ ይፈጥራሉ። በእፅዋት ውስጥ ያለውን የCa2+ ክምችት መቆጣጠር በእፅዋት ውስጥ የሟሟ ኦክሳሊክ አሲድ እና Ca2+ን በብቃት መቆጣጠር እና ከመጠን በላይ የኦክሳሊክ አሲድ እና Ca2+19,20 ክምችትን ማስወገድ ይችላል።
የተተገበረው የኖራ መጠን የጥገና ውጤቱን ከሚነኩ ቁልፍ ነገሮች አንዱ ነው። የኖራ መጠን ከ750 እስከ 6000 ኪ.ግ/ሜ2 እንደሚደርስ ተረጋግጧል። ከ5.0~5.5 ፒኤች ባለው አሲዳማ አፈር ላይ፣ በ3000~6000 ኪ.ግ/ሜ2 መጠን ላይ የሎሚ ቀለም መቀባት የሚያስከትለው ውጤት ከ750 ኪ.ግ/ሜ221 መጠን በእጅጉ ከፍ ያለ ነው። ሆኖም፣ የኖራ መጠን ከመጠን በላይ መጠቀም በአፈር ላይ አሉታዊ ተጽዕኖዎችን ያስከትላል፣ ለምሳሌ በአፈር pH ላይ ከፍተኛ ለውጦች እና በአፈር መጭመቅ22። ስለዚህ፣ የCaO ሕክምና ደረጃዎችን 0፣ 750፣ 2250 እና 3750 ኪ.ግ hm-2 ብለን ገልጸናል። ኦክሳሊክ አሲድ በአረብቢዶፕሲስ ታሊያና ላይ ሲተገበር፣ Ca2+ በ10 mmol L-1 ክምችት በከፍተኛ ሁኔታ እንደቀነሰ ተረጋግጧል፣ እና የCa2+ ምልክትን የሚነካው የCRT ጂን ቤተሰብ አጥብቆ ምላሽ ሰጥቷል20። ቀደም ሲል የተደረጉ አንዳንድ ጥናቶች መከማቸት የዚህን ምርመራ ክምችት ለመወሰን እና የውጪ ተጨማሪ ምግቦች በCa2+ እና Cd2+23,24,25 ላይ ያለውን መስተጋብር የበለጠ ለማጥናት አስችሎናል። ስለዚህ፣ ይህ ጥናት በCd በተበከለ አፈር ውስጥ የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የሲዲ ይዘት እና የጭንቀት መቻቻል ላይ የውጭ ሎሚ እና የኦክሳሊክ አሲድ ቅጠል ርጭት የቁጥጥር ዘዴን ለመዳሰስ እና የመድኃኒት ጥራት እና ውጤታማነትን በተሻለ ሁኔታ ለማረጋገጥ መንገዶችን የበለጠ ለማሰስ ያለመ ነው። የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ምርት። በካድሚየም በተበከለ አፈር ውስጥ የእፅዋት እፅዋትን መጠን ለማሳደግ እና በመድኃኒት ገበያ የሚያስፈልገውን ከፍተኛ ጥራት ያለው እና ዘላቂ ምርት ለማግኘት ጠቃሚ መመሪያ ይሰጣል።
የአካባቢውን የጂንሰንግ ዝርያ ዌንሻን ፓናክስ ኖቶጊንሴንግን እንደ ቁሳቁስ በመጠቀም፣ በላኒዛይ፣ ኪዩቤይ ካውንቲ፣ ዌንሻን ግዛት፣ ዩናን ግዛት (24°11′N፣ 104°3′E፣ ከፍታ 1446 ሜትር) የመስክ ሙከራ ተካሂዷል። አማካይ አመታዊ የሙቀት መጠን 17°ሴ ሲሆን አማካይ አመታዊ ዝናብ ደግሞ 1250 ሚሜ ነው። የተጠናው አፈር ዳራ እሴቶች TN 0.57 ግ ኪ.ግ-1፣ TP 1.64 ግ ኪ.ግ-1፣ TC 16.31 ግ ኪ.ግ-1፣ OM 31.86 ግ ኪ.ግ-1፣ አልካላይን ሃይድሮላይዝድ N 88.82 mg ኪ.ግ-1፣ ፎስፈረስ የሌለው። 18.55 mg ኪ.ግ-1፣ ነፃ ፖታሲየም 100.37 mg ኪ.ግ-1፣ ጠቅላላ ካድሚየም 0.3 mg ኪ.ግ-1፣ pH 5.4 ነበሩ።
ታህሳስ 10፣ 2017፣ 6 ሚ.ግ/ኪ.ግ Cd2+ (CdCl2·2.5H2O) እና የሎሚ ህክምና (0፣ 750፣ 2250 እና 3750 ኪ.ግ/ሰ/ሜ2) ተቀላቅለው በእያንዳንዱ መሬት 0-10 ሴ.ሜ ንብርብር ላይ በአፈር ወለል ላይ ተተግብረዋል። እያንዳንዱ ህክምና 3 ጊዜ ተደግሟል። የሙከራ ቦታዎች በዘፈቀደ የሚገኙ ሲሆን እያንዳንዱ ቦታ 3 ሜ2 ስፋት ይሸፍናል። የአንድ አመት እድሜ ያላቸው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ችግኞች ከ15 ቀናት እርሻ በኋላ ተተክለዋል። የፀሐይ ጥላ መረብ ሲጠቀሙ፣ በፀሐይ ጥላ መረብ ውስጥ ያለው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የብርሃን ጥንካሬ ከመደበኛ የተፈጥሮ ብርሃን ጥንካሬ 18% ያህል ነው። እርሻ የሚከናወነው በአካባቢው ባህላዊ የእርሻ ዘዴዎች መሠረት ነው። በ2019 የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የማብሰያ ደረጃ ከመድረሱ በፊት ኦክሳሊክ አሲድ በሶዲየም ኦክሳሌት መልክ ይረጩ። የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት በቅደም ተከተል 0፣ 0.1 እና 0.2 ሞል L-1 ነበር፣ እና የቆሻሻ ፈሳሽ መፍትሄ አማካይ ፒኤች ለማስመሰል ፒኤችን ወደ 5.16 ለማስተካከል NaOH ጥቅም ላይ ውሏል። የቅጠሎቹን የላይኛው እና የታችኛውን ገጽ በሳምንት አንድ ጊዜ ከጠዋቱ 8፡00 ላይ ይረጩ። በአምስተኛው ሳምንት 4 ጊዜ ከተረጨ በኋላ የ3 ዓመት ዕድሜ ያላቸው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ተክሎች ተሰብስበዋል።
በህዳር 2019፣ የሦስት ዓመት ዕድሜ ያላቸው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ተክሎች ከእርሻ ተሰብስበው በኦክሳሊክ አሲድ ተረጩ። ለፊዚዮሎጂካል ሜታቦሊዝም እና ለኢንዛይም እንቅስቃሴ መለካት ያለባቸው የሦስት ዓመት ዕድሜ ያላቸው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ተክሎች ናሙናዎች ለማቀዝቀዝ ቱቦዎች ውስጥ ተቀምጠዋል፣ በፍጥነት በፈሳሽ ናይትሮጅን ቀዝቅዘው ከዚያም በ-80°ሴ ወደ ማቀዝቀዣ ተላልፈዋል። በብስለት ደረጃ ላይ ለሲዲ እና ለንቁ ንጥረ ነገሮች ይዘት የሚለኩ አንዳንድ የስር ናሙናዎች በቧንቧ ውሃ ታጥበው ለ30 ደቂቃዎች በ105°ሴ ደርቀዋል፣ በ75°ሴ ቋሚ ክብደት እና በሞርታር ውስጥ ለማከማቸት ተፍጠዋል።
0.2 ግራም ደረቅ የእፅዋት ናሙና ይመዝኑ፣ በኤርለንሜየር ጠርሙስ ውስጥ ያስቀምጡት፣ 8 ሚሊ ሊትር HNO3 እና 2 ሚሊ ሊትር HClO4 ይጨምሩ እና በአንድ ሌሊት ይሸፍኑት። በሚቀጥለው ቀን ነጭ ጭስ እስኪታይ እና የምግብ መፈጨት ጭማቂው እስኪጸዳ ድረስ በኤርለንሜየር ጠርሙስ ውስጥ የተቀመጠ የተጠማዘዘ ፈንጋይ ይጠቀሙ። ወደ ክፍል የሙቀት መጠን ከቀዘቀዘ በኋላ ድብልቁ ወደ 10 ሚሊ ሊትር ቮልሜትሪክ ብልቃጥ ተላልፏል። የሲዲ ይዘት የሚወሰነው በአቶሚክ መምጠጥ ስፔክትሮሜትር (Thermo ICE™ 3300 AAS፣ USA) በመጠቀም ነው። (GB/T 23739-2009)።
0.2 ግራም ደረቅ የእፅዋት ናሙና ይመዝኑ፣ በ50 ሚሊ ሊትር የፕላስቲክ ጠርሙስ ውስጥ ያስቀምጡት፣ 1 ሞል L-1 HCL በ10 ሚሊ ሊትር ውስጥ ይጨምሩ፣ ይሸፍኑትና ለ15 ሰዓታት በደንብ ያናውጡትና ያጣሩ። ፒፔት በመጠቀም፣ የሚፈለገውን የማጣሪያ መጠን በፓይፕ ያድርጉት፣ በዚሁ መሰረት ይቀልጡት እና የSr2+ ክምችትን ወደ 1 ግራም L-1 ለማምጣት የSrCl2 መፍትሄ ይጨምሩ። የCa ይዘት የተለካው በአቶሚክ መምጠጥ ስፔክትሮሜትር (Thermo ICE™ 3300 AAS፣ USA) በመጠቀም ነው።
ማሎንዲያልዴይድ (MDA)፣ ሱፐርኦክሳይድ ዲስሙታዝ (SOD)፣ ፔሮክሲዳዝ (POD) እና ካታላዝ (CAT) የማጣቀሻ ኪት ዘዴ (DNM-9602፣ ቤጂንግ ፕሮንግ ኒው ቴክኖሎጂ ኩባንያ ሊሚትድ፣ የምርት ምዝገባ)፣ ተጓዳኝ የመለኪያ ኪት ይጠቀሙ። ቁጥር፡ ቤጂንግ ፋርማኮፖኢያ (ትክክለኛ) 2013 ቁጥር 2400147)።
0.05 ግራም የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ናሙና ይመዝኑ እና በቱቦው ጎኖች ላይ የአንትሮን-ሰልፈሪክ አሲድ ሪአጀንት ይጨምሩ። ፈሳሹን በደንብ ለማዋሃድ ቱቦውን ለ2-3 ሰከንዶች ያናውጡት። ቱቦውን ለ15 ደቂቃዎች ቀለም እንዲኖረው በቱቦ መደርደሪያ ላይ ያስቀምጡት። የሚሟሟ የስኳር ይዘት የሚወሰነው በ620 nm የሞገድ ርዝመት በአልትራቫዮሌት-ቪዚል ስፔክትሮፎቶሜትሪ (UV-5800፣ Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., China) ነው።
0.5 ግራም አዲስ የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ናሙና ይመዝኑ፣ በ5 ሚሊ ሊትር የተቀዳ ውሃ ወደ ሆሞጋኔት ይፍጩት፣ ከዚያም በ10,000 ግራም ለ10 ደቂቃዎች ሴንትሪፉጅ ያድርጉ። የላይኛው ክፍል ወደ ቋሚ መጠን ተበረዘ። የኩማሲ ብሪሊያንት ብሉ ዘዴ ጥቅም ላይ ውሏል። የሚሟሟ የፕሮቲን ይዘት በ595 nm የሞገድ ርዝመት በአልትራቫዮሌት-ቪዚል ስፔክትሮፎቶሜትሪ (UV-5800፣ Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., China) በመጠቀም ተለክቷል እና በቦቪን ሴረም አልቡሚን መደበኛ ኩርባ ላይ ተመስርቶ ይሰላል።
0.5 ግራም ትኩስ ናሙና ይመዝኑ፣ 5 ሚሊ ሊትር 10% አሴቲክ አሲድ ይጨምሩ፣ ወደ ሆሞጋኔት ይፍጩ፣ ያጣሩ እና ወደ ቋሚ መጠን ይቀንሱ። የቀለም ልማት ዘዴው ከኒንሃይድሪን መፍትሄ ጋር ጥቅም ላይ ውሏል። ነፃ የአሚኖ አሲድ ይዘት በ570 nm በ UV-visual spectrophotometry (UV-5800፣ Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., China) ተወስኖ በሉኪን መደበኛ ኩርባ28 ላይ ተመስርቶ ይሰላል።
0.5 ግራም ትኩስ ናሙና ይመዝኑ፣ 5 ሚሊ ሊትር የ3% የሰልፎሳሊሲሊክ አሲድ መፍትሄ ይጨምሩ፣ በውሃ መታጠቢያ ውስጥ ያሞቁ እና ለ10 ደቂቃዎች ያናውጡት። ከቀዘቀዘ በኋላ መፍትሄው ተጣርቶ ወደ ቋሚ መጠን ተወስዷል። የአሲድ ኒንሃይድሪን ቀለም ዘዴ ጥቅም ላይ ውሏል። የፕሮሊን ይዘት በ520 nm የሞገድ ርዝመት በአልትራቫዮሌት-ቪዚል ስፔክትሮፎሜትሪ (UV-5800፣ የሻንጋይ ዩዋንክሲ ኢንስትሩመንት ኩባንያ፣ ሊሚትድ፣ ቻይና) ተወስኖ በፕሮሊን መደበኛ ኩርባ29 ላይ ተመስርቶ ይሰላል።
የሳፖኒን ይዘት የሚወሰነው ከፍተኛ አፈጻጸም ባለው ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ ሲሆን ይህም የቻይና ሕዝባዊ ሪፐብሊክ ፋርማኮፒያ (2015 እትም) ጋር በማጣቀስ ነው። የከፍተኛ አፈጻጸም ያለው ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ መሰረታዊ መርህ ከፍተኛ ግፊት ያለው ፈሳሽ እንደ ተንቀሳቃሽ ምዕራፍ መጠቀም እና ከፍተኛ አፈጻጸም ያለው አምድ ክሮማቶግራፊ እጅግ በጣም ጥሩ ቅንጣት መለያየት ቴክኖሎጂን ወደ ቋሚ ደረጃ መተግበር ነው። የአሠራር ቴክኒኩ እንደሚከተለው ነው፡
የHPLC ሁኔታዎች እና የስርዓት ተስማሚነት ሙከራ (ሠንጠረዥ 1): ኦክታዴሲልሲላን የተሳሰረ ሲሊካ ጄል እንደ መሙያ፣ አሴቶኒትሪል እንደ ተንቀሳቃሽ ደረጃ A እና ውሃ እንደ ተንቀሳቃሽ ደረጃ B ይጠቀሙ። ከታች ባለው ሠንጠረዥ ላይ እንደሚታየው የግራዲየንት ኢሉሽን ያከናውኑ። የመለየት የሞገድ ርዝመት 203 nm ነው። በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ አጠቃላይ ሳፖኒኖች R1 ጫፍ መሠረት፣ የቲዎሬቲካል ሳህኖች ብዛት ቢያንስ 4000 መሆን አለበት።
መደበኛውን መፍትሄ ማዘጋጀት፡- ጂንሴኖሳይድ Rg1፣ ጂንሴኖሳይድ Rb1 እና ኖቶጊንሴኖሳይድ R1 በትክክል ይመዝኑ እና በ1 ሚሊ ሊትር መፍትሄ 0.4 ሚ.ግ. ጂንሴኖሳይድ Rg1፣ 0.4 ሚ.ግ. ጂንሴኖሳይድ Rb1 እና 0.1 ሚ.ግ. ኖቶጊንሴኖሳይድ R1 የያዘውን ድብልቅ ለማዘጋጀት ሜታኖል ይጨምሩ።
የሙከራ መፍትሄ ዝግጅት፡- 0.6 ግራም የፓናክስ ጊንሰንግ ዱቄት ይመዝኑ እና 50 ሚሊ ሊትር ሜታኖል ይጨምሩ። የተቀላቀለው መፍትሄ (W1) ተመዝኖ ለአንድ ሌሊት ተትቷል። የተቀላቀለው መፍትሄ በ80°ሴ ባለው የውሃ መታጠቢያ ውስጥ ለ2 ሰዓታት በቀስታ ይቀቀላል። ከቀዘቀዘ በኋላ የተቀላቀለውን መፍትሄ ይመዝኑ እና የተዘጋጀውን ሜታኖል ወደ መጀመሪያው ክብደት W1 ይጨምሩ። ከዚያም በደንብ ያናውጡት እና ያጣሩ። ማጣሪያው ለትንተና ይቀራል።
የሳፖኒን 24 ይዘትን ለማወቅ 10 μL መደበኛውን መፍትሄ እና 10 μL የማጣሪያውን መጠን በትክክል ሰብስቡ እና ከፍተኛ አፈጻጸም ባለው ፈሳሽ ክሮማቶግራፍ (Thermo HPLC-ultimate 3000፣ Seymour Fisher Technology Co., Ltd.) ውስጥ ይወጉ።
መደበኛ ኩርባ፡ የተደባለቀ የRg1፣ Rb1 እና R1 መደበኛ መፍትሄ መለካት። የክሮማቶግራፊ ሁኔታዎች ከላይ ከተዘረዘሩት ጋር ተመሳሳይ ናቸው። በy-ዘንግ ላይ የተለካውን የጫፍ ስፋት እና በx-ዘንግ ላይ ባለው መደበኛ መፍትሄ ውስጥ ያለውን የሳፖኒን ክምችት በመቅረጽ መደበኛ ኩርባውን ያሰሉ። የሳፖኒን ክምችት የናሙናውን የተለካውን የጫፍ ስፋት ወደ መደበኛ ኩርባ በመተካት ሊሰላ ይችላል።
0.1 ግራም የ P. ኖቶጀንስግስ ናሙና ይመዝኑ እና 50 ሚሊ ሊትር 70% CH3OH መፍትሄ ይጨምሩ። የአልትራሳውንድ ማውጣት ለ2 ሰዓታት ተካሂዷል፣ ከዚያም በ4000 rpm ለ10 ደቂቃዎች ሴንትሪፉጌሽን ተደርጓል። 1 ሚሊ ሊትር ሱፐርናታንት ወስደው 12 ጊዜ ቀቅለው። የፍላቮኖይድ ይዘት የሚወሰነው በ249 nm የሞገድ ርዝመት በአልትራቫዮሌት-ቪዚንግ ስፔክትሮፎቶሜትሪ (UV-5800፣ Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., China) በመጠቀም ነው። ኩዌርሴቲን ከመደበኛው ንጥረ ነገሮች አንዱ ነው።
መረጃው የተደራጀው በ Excel 2010 ሶፍትዌር ነው። የSPSS 20 ስታቲስቲክስ ሶፍትዌር በውሂቡ ላይ ያለውን ልዩነት ለመተንተን ጥቅም ላይ ውሏል። ስዕሎች የተሳሉት በ Origin Pro 9.1 ነው። የተሰላ የስታቲስቲክስ እሴቶች አማካይ ± SD ያካትታሉ። የስታቲስቲክስ ጠቀሜታ መግለጫዎች በP < 0.05 ላይ የተመሰረቱ ናቸው።
በቅጠሎቹ ላይ በሚረጨው የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት፣ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ያለው የCa ይዘት የተቀባው የኖራ መጠን እየጨመረ ሲሄድ በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል (ሠንጠረዥ 2)። ከኖራ አለመኖር ጋር ሲነጻጸር፣ ኦክሳሊክ አሲድ ሳይረጭ 3750 ኪ.ግ/ሰ/ሜ2 የሎሚ ጭማቂ ሲጨመር የCa ይዘት በ212% ጨምሯል። ለተቀባው ተመሳሳይ የኖራ መጠን፣ የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ክምችት ሲጨምር የCa ይዘት በትንሹ ጨምሯል።
በስሮች ውስጥ ያለው የሲዲ ይዘት ከ0.22 እስከ 0.70 ሚ.ግ ኪ.ግ-1 ይደርሳል። በተመሳሳይ የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት፣ የተጨመረው የሎሚ መጠን ሲጨምር፣ የ2250 ኪ.ግ/ሰዓት የሲዲ ይዘት በከፍተኛ ሁኔታ ይቀንሳል። ከቁጥጥሩ ጋር ሲነጻጸር፣ በስሮች ውስጥ ያለው የሲዲ ይዘት በ2250 ኪ.ግ hm-2 ሎሚ እና 0.1 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ከተረጨ በኋላ በ68.57% ቀንሷል። ሎሚ አልባ እና 750 ኪ.ግ/ሰዓት የሎሚ ጭማቂ ሲተገብሩ፣ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ያለው የሲዲ ይዘት የኦክሳሊክ አሲድ ስፕሬይ ክምችት እየጨመረ በመምጣቱ በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። 2250 ኪ.ግ/ሜ2 ሎሚ እና 3750 ኪ.ግ/ሜ2 ሎሚ ሲተገብሩ፣ የስር ሲዲ ይዘት መጀመሪያ ቀንሷል እና ከዚያም የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት እየጨመረ በመምጣቱ ይጨምራል። በተጨማሪም፣ ባለ ሁለትዮሽ ትንተና እንደሚያሳየው ሎሚ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች የCa ይዘት ላይ ከፍተኛ ተጽዕኖ አሳድሯል (F = 82.84**)፣ ሎሚ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ባለው የሲዲ ይዘት ላይ ከፍተኛ ተጽዕኖ አሳድሯል (F = 74.99**)፣ እና ኦክሳሊክ አሲድ። አሲድ (F = 7.72*)።
የኖራ መጠን ሲጨመር እና የተረጨው የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት ሲጨምር፣ የMDA ይዘት በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። ኖራ ሳይጨመር እና 3750 ኪ.ግ/ሜ2 የኖራ መጠን ሲጨመር በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ በMDA ይዘት ላይ ምንም አይነት ጉልህ ልዩነት አልነበረም። በ750 ኪ.ግ/ሜ2 እና 2250 ኪ.ግ/ሜ2 የአተገባበር መጠን፣ የ0.2 ሞል/ሊ ኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ህክምና የኖራ ይዘት በቅደም ተከተል በ58.38% እና 40.21% ቀንሷል፣ ከኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ህክምና ጋር ሲነጻጸር። ዝቅተኛው የMDA ይዘት (7.57 nmol g-1) 750 ኪ.ግ hm-2 ሎሚ እና 0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ ታይቷል (ምስል 1)።
በካድሚየም ውጥረት ስር በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ባለው የማሎንዲያልዴይድ ይዘት ላይ የኦክሳሊክ አሲድ ቅጠላ ቅጠል መርጨት ውጤት። ማሳሰቢያ፡ በሥዕሉ ላይ ያለው አፈ ታሪክ በሚረጨው (ሞል L-1) ውስጥ የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት ያሳያል፣ የተለያዩ ንዑስ ፊደላት በተመሳሳይ የሎሚ አተገባበር ሕክምናዎች መካከል ጉልህ ልዩነቶችን ያመለክታሉ። ቁጥር (P < 0.05)። ከዚህ በታችም ተመሳሳይ ነው።
3750 ኪ.ግ/ሰ. ሎሚን ከመጠቀም በስተቀር፣ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ የSOD እንቅስቃሴ ላይ ምንም ዓይነት ጉልህ ልዩነት አልታየም። 0፣ 750 እና 2250 ኪ.ግ/ሰ/ሜ2 ሎሚ ሲጨመር፣ በ0.2 ሞል/ሊ ክምችት በኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ የSOD እንቅስቃሴ ኦክሳሊክ አሲድ ካልተጠቀመበት በእጅጉ ከፍ ያለ ሲሆን በቅደም ተከተል በ177.89%፣ 61.62% እና 45.08% ጨምሯል። በስሮቹ ውስጥ የSOD እንቅስቃሴ (598.18 U g-1) የሎሚ አጠቃቀም በሌለበት እና በ0.2 ሞል/ሊ ክምችት በኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ ከፍተኛው ነበር። ኦክሳሊክ አሲድ በተመሳሳይ ክምችት ወይም በ0.1 ሞል L-1 ሲረጭ፣ የSOD እንቅስቃሴ እየጨመረ በመጣው የሎሚ መጠን ጨምሯል። በ0.2 ሞል/ሊ ኦክሳሊክ አሲድ ከተረጨ በኋላ የSOD እንቅስቃሴ በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል (ምስል 2)።
ቅጠሎችን በኦክሳሊክ አሲድ መርጨት በካድሚየም ውጥረት ስር በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ባለው የሱፐርኦክሳይድ ዲስሙታዝ፣ ፔሮክሲዳዝ እና ካታላሴ እንቅስቃሴ ላይ የሚያሳድረው ተጽዕኖ
ልክ እንደ ስሮች ውስጥ የSOD እንቅስቃሴ፣ ያለ ሎሚ የታከሙ እና በ0.2 mol L-1 oxalic አሲድ የተረጨው የPOD እንቅስቃሴ ከፍተኛው (63.33 µmol g-1) ነበር፣ ይህም ከቁጥጥር 148.35% ከፍ ያለ ነው (25.50 µmol g-1)። የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት እና 3750 ኪ.ግ/ሜ2 የኖራ ህክምና እየጨመረ ሲሄድ፣ የPOD እንቅስቃሴ መጀመሪያ ጨምሯል እና ከዚያም ቀንሷል። ከ0.1 mol L-1 oxalic አሲድ ጋር ሲነጻጸር፣ በ0.2 mol L-1 oxalic አሲድ ሲታከም የPOD እንቅስቃሴ በ36.31% ቀንሷል (ምስል 2)።
0.2 mol/l oxalic acid በመርጨት እና 2250 kg/h/m2 ወይም 3750 kg/h/m2 ሎሚ በመጨመር የCAT እንቅስቃሴ ከቁጥጥር በእጅጉ ከፍ ያለ ነበር። 0.1 mol/l oxalic acid በመርጨት እና 0.2250 kg/h/m2 ወይም 3750 kg/h/m2 ሎሚ በመርጨት፣ የCAT እንቅስቃሴ በ276.08%፣ 276.69% እና 33.05% ጨምሯል፣ ይህም ኦካሊክ አሲድ ሳይረጭ ከተደረገው ሕክምና ጋር ሲነጻጸር። በስሮች ውስጥ ያለው የCAT እንቅስቃሴ በሎሚ-አልባ ህክምና እና በ0.2 mol/L oxalic አሲድ ሕክምና ከፍተኛ (803.52 μmol/g) ነበር። የCAT እንቅስቃሴ በ3750 ኪ.ግ/h/m2 ሎሚ እና 0.2 mol/L oxalic አሲድ በመርጨት ዝቅተኛው (172.88 μmol/g) ነበር (ምስል 2)።
የሁለትዮሽ ትንተና እንደሚያሳየው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች የCAT እንቅስቃሴ እና የMDA እንቅስቃሴ ከኦካሊክ አሲድ ወይም ከኖራ ከተረጨው መጠን እና ከሁለቱ ሕክምናዎች ጋር በእጅጉ የተቆራኘ ነው (ሠንጠረዥ 3)። በስሮች ውስጥ ያለው የSOD እንቅስቃሴ ከኖራ እና ከኦካሊክ አሲድ ሕክምና ወይም ከኦካሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት ጋር በእጅጉ የተቆራኘ ነበር። የሮድ POD እንቅስቃሴ በከፍተኛ ሁኔታ የተመካው በኖራ በተቀባው መጠን ወይም በኖራ እና በኦካሊክ አሲድ ሕክምና ላይ ነው።
በስሩ ውስጥ የሚሟሟ ስኳር ይዘት እየጨመረ በመጣው የሎሚ አጠቃቀም እና የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ክምችት ቀንሷል። በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ የሎሚ አጠቃቀም ሳይደረግ እና 750 ኪ.ግ/ሰ/ሜ ኖራ ሲተገበር በሚሟሟ ስኳር ይዘት ላይ ምንም አይነት ጉልህ ልዩነት አልነበረም። 2250 ኪ.ግ/ሜ ኖራ ሲተገበር፣ በ0.2 ሞል/ሊ ኦክሳሊክ አሲድ ሲታከም የሚሟሟ ስኳር ይዘት ኦክሳሊክ አሲድ ሳይረጭ ሲታከም ከሚታከመው በእጅጉ ከፍ ያለ ሲሆን በ22.81% ጨምሯል። 3750 ኪ.ግ በሰዓት/ሜ 2 ሎሚ ሲተገበር የሚሟሟ ስኳር ይዘት በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። የሚረጨው ኦክሳሊክ አሲድ ክምችት ሲጨምር በ0.2 ሞል L-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲታከም የሚሟሟ ስኳር ይዘት ከኦክሳሊክ አሲድ ሳይረጭ ከታከመው ጋር ሲነጻጸር በ38.77% ቀንሷል። በተጨማሪም፣ የ0.2 mol·L-1 ኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ሕክምና ዝቅተኛው የሚሟሟ የስኳር ይዘት ነበረው፣ ይህም 205.80 mg·g-1 ነበር (ምስል 3)።
በካድሚየም ውጥረት ስር በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ በኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ቅጠላ ቅጠል የሚሟሟ ሙሉ ስኳር እና የሚሟሟ ፕሮቲን ይዘት ላይ የሚያሳድረው ተጽዕኖ
በስሮች ውስጥ የሚሟሟ የፕሮቲን ይዘት እየጨመረ በሚሄድ የሎሚ አተገባበር እና በኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ህክምና ቀንሷል። ሎሚ ሳይጨመር፣ በ0.2 mol L-1 ክምችት በኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ሲታከም የሚሟሟ የፕሮቲን ይዘት ከቁጥጥር ጋር ሲነጻጸር በ16.20% በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። 750 ኪ.ግ/ሰ. የኖራ ሲተገበር በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች የሚሟሟ የፕሮቲን ይዘት ላይ ምንም ጉልህ ልዩነቶች አልነበሩም። በ2250 ኪ.ግ/ሰ.ሜ የኖራ አተገባበር ሁኔታዎች ስር፣ የ0.2 mol/L ኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ህክምና የሚሟሟ የፕሮቲን ይዘት ከኦክሳሊክ አሲድ ያልሆነው የሚረጭ ህክምና (35.11%) በእጅጉ ከፍ ያለ ነበር። 3750 ኪ.ግ/ሰ.ሜ. የኖራ አተገባበር ሲተገበር፣ የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት ሲጨምር የሚሟሟ የፕሮቲን ይዘት በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል፣ የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭበት መጠን ዝቅተኛው የሚሟሟ የፕሮቲን ይዘት (269.84 μg·g-1) ሲሆን የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭበት መጠን 0.2 mol·L-1 ነበር። ህክምና (ምስል 3)።
የኖራ አጠቃቀም በሌለበት የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥር ውስጥ ባሉ ነፃ አሚኖ አሲዶች ይዘት ላይ ምንም ጉልህ ልዩነቶች አልነበሩም። የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት እየጨመረ ሲሄድ እና 750 ኪ.ግ/ሰ/ሜ2 የኖራ መጨመር ሲጨምር፣ የነጻ አሚኖ አሲዶች ይዘት መጀመሪያ ቀንሷል እና ከዚያም ጨምሯል። ኦክሳሊክ አሲድ ሳይረጭ ከተደረገው ሕክምና ጋር ሲነጻጸር፣ 2250 ኪ.ግ hm-2 ሎሚ እና 0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ የነጻ አሚኖ አሲዶች ይዘት በ33.58% በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል። የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት እየጨመረ በመምጣቱ እና 3750 ኪ.ግ/ሜ2 የኖራ መጨመር ሲጨምር የነጻ አሚኖ አሲዶች ይዘት በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። የ0.2 ሞል L-1 ኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ህክምና ነፃ የአሚኖ አሲድ ይዘት ከኦክሳሊክ አሲድ ያልሆነ የሚረጭ ህክምና ጋር ሲነጻጸር በ49.76% ቀንሷል። የነጻ አሚኖ አሲድ ይዘት ያለኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ከፍተኛ ነበር እና 2.09 ሚ.ግ g-1 ነበር። የ0.2 mol/L ኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ሕክምና ዝቅተኛው ነፃ የአሚኖ አሲድ ይዘት (1.05 mg/g) ነበረው (ምስል 4)።
ቅጠሎችን በኦክሳሊክ አሲድ መርጨት በካድሚየም የጭንቀት ሁኔታዎች ስር በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ባሉ ነፃ አሚኖ አሲዶች እና ፕሮሊን ይዘት ላይ የሚያሳድረው ተጽዕኖ
በስሮቹ ውስጥ ያለው የፕሮሊን ይዘት በኖራ የተረጨው መጠን እና በኦክሳሊክ አሲድ የሚረጨው መጠን በመጨመር ቀንሷል። ሎሚ ሳይተገበር ሲቀር በፓናክስ ጊንሰንግ ሥር የፕሮሊን ይዘት ላይ ምንም አይነት ጉልህ ልዩነት አልታየም። የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጨው ክምችት እየጨመረ ሲሄድ እና 750 ወይም 2250 ኪ.ግ/ሜ2 የኖራ አተገባበር ሲጨምር፣ የፕሮሊን ይዘት መጀመሪያ ቀንሷል እና ከዚያም ይጨምራል። የ0.2 ሞል L-1 ኦክሳሊክ አሲድ የሚረጨው ህክምና የፕሮሊን ይዘት ከ0.1 ሞል L-1 ኦክሳሊክ አሲድ የሚረጨው ህክምና በእጅጉ ከፍ ያለ ሲሆን በቅደም ተከተል በ19.52% እና 44.33% ጨምሯል። 3750 ኪ.ግ/ሜ2 ሎሚ ሲጨመር፣ የተረጨው ኦክሳሊክ አሲድ ክምችት ሲጨምር የፕሮሊን ይዘት በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። 0.2 ሞል L-1 ኦክሳሊክ አሲድ ከተረጨ በኋላ፣ የፕሮሊን ይዘት ከኦክሳሊክ አሲድ ጋር ሲነጻጸር በ54.68% ቀንሷል። ዝቅተኛው የፕሮሊን ይዘት በ0.2 ሞል/ሊ ኦክሳሊክ አሲድ ሲታከም የነበረ ሲሆን 11.37 μg/g ደርሷል (ምስል 4)።
በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ውስጥ ያለው አጠቃላይ የሳፖኒን ይዘት Rg1>Rb1>R1 ነው። በሶስቱ ሳፖኒኖች ይዘት ላይ ምንም አይነት ጉልህ ልዩነት አልታየም ምክንያቱም የኖራ ቅባት ሳይቀባ የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት እና ክምችት እየጨመረ በመምጣቱ (ሠንጠረዥ 4)።
0.2 mol L-1 oxalic አሲድ ከተረጨ በኋላ የR1 ይዘት ኦካሊክ አሲድ ሳይረጭ እና 750 ወይም 3750 ኪ.ግ/ሜ2 የሎሚ መጠን ከተተገበረ በእጅጉ ያነሰ ነበር። 0 ወይም 0.1 mol/ሊ በሆነ የተረጨ የኦካሊክ አሲድ ክምችት፣ በR1 ይዘት ላይ ምንም አይነት ጉልህ የሆነ የኖራ መጠን ሲጨመርበት ምንም አይነት ጉልህ የሆነ ልዩነት አልታየም። በ0.2 mol/ሊ ኦክሳልሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት፣ በ3750 ኪ.ግ/ሜ2 የሎሚ ጭማቂ ውስጥ ያለው የR1 ይዘት ሎሚ ሳይጨመር ከ43.84% በእጅጉ ያነሰ ነበር (ሠንጠረዥ 4)።
የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት ሲጨምር እና 750 ኪ.ግ/ሜ2 ሎሚ ሲጨመር፣ የRg1 ይዘት መጀመሪያ ጨምሯል እና ከዚያም ቀንሷል። በ2250 እና 3750 ኪ.ግ/ሰ. የኖራ አተገባበር መጠን ሲጨምር፣ የRg1 ይዘት እየጨመረ በሚሄድ የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት ቀንሷል። በተመሳሳይ የተረጨው የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት፣ የኖራ መጠን ሲጨምር፣ የRg1 ይዘት መጀመሪያ ይጨምራል ከዚያም ይቀንሳል። ከቁጥጥሩ ጋር ሲነጻጸር፣ በሦስት የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት እና 750 ኪ.ግ/ሜ2 የሎሚ ህክምናዎች ውስጥ ካለው የRg1 ይዘት በስተቀር፣ ከቁጥጥሩ በላይ የነበረው፣ በሌሎች ህክምናዎች ውስጥ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ያለው የRg1 ይዘት ከቁጥጥር ቁጥጥር ያነሰ ነበር። የRg1 ከፍተኛው ይዘት 750 ኪ.ግ/ሜ2 የሎሚ እና 0.1 ሞል/ሊ ኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ ነበር፣ ይህም ከቁጥጥር 11.54% ከፍ ያለ ነበር (ሠንጠረዥ 4)።
የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት እና የተተገበረው የሎሚ መጠን በ2250 ኪ.ግ/ሰአት የፍሰት መጠን ሲጨምር፣ የRb1 ይዘት መጀመሪያ ጨምሯል ከዚያም ቀንሷል። 0.1 ሞል L-1 ኦክሳሊክ አሲድ ከተረጨ በኋላ፣ የRb1 ይዘት ከፍተኛው እሴት 3.46% ደርሷል፣ ይህም ኦክሳሊክ አሲድ ካልረጨው በ74.75% ከፍ ያለ ነበር። ለሌሎች የሎሚ ሕክምናዎች፣ በተለያዩ የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት መካከል ምንም ጉልህ ልዩነቶች አልነበሩም። በ0.1 እና 0.2 ሞል L-1 ኦክሳሊክ አሲድ ከተረጨ በኋላ፣ የኖራ መጠን እየጨመረ ሲሄድ፣ የRb1 ይዘት መጀመሪያ ቀንሷል ከዚያም ቀንሷል (ሠንጠረዥ 4)።
በተመሳሳይ የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት፣ የኖራ መጠን እየጨመረ ሲሄድ፣ የፍላቮኖይድ ይዘት መጀመሪያ ጨምሯል ከዚያም ቀንሷል። የተለያዩ የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት ያለሎሚ እና 3750 ኪ.ግ/ሜ2 ሎሚ ሲረጭ በፍላቮኖይድ ይዘት ላይ ምንም ጉልህ ልዩነት አልተገኘም። 750 እና 2250 ኪ.ግ/ሜ2 ሎሚ ሲጨመር፣ የተረጨው የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት እየጨመረ ሲሄድ፣ የፍላቮኖይድ ይዘት መጀመሪያ ጨምሯል ከዚያም ቀንሷል። 750 ኪ.ግ/ሜ2 ሲተገብር እና ኦክሳሊክ አሲድ በ0.1 ሞል/ሊትር ክምችት ሲረጭ፣ የፍላቮኖይድ ይዘት ከፍተኛ ነበር - 4.38 ሚ.ግ/ግ፣ ይህም ተመሳሳይ መጠን ያለው የሎሚ መጠን ሲጨመር ከነበረው 18.38% ከፍ ያለ ነው፣ እና የፍሎቮኖይድ አሲድ የሚረጭ አያስፈልግም ነበር። በ0.1 ሞል L-1 ኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ሲታከም የፍላቮኖይድ ይዘት ከኦክሳሊክ አሲድ እና ከሎሚ ጋር በ2250 ኪ.ግ/ሜ2 መጠን ጋር ሲነጻጸር በ21.74% ጨምሯል (ምስል 5)።
ቅጠሎችን በኦክሳሌት መርጨት በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥር ውስጥ ባለው የፍላቮኖይድ ይዘት ላይ በካድሚየም ውጥረት ስር ያለው ተጽእኖ
የሁለትዮሽ ትንተና እንደሚያሳየው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች የሚሟሟ የስኳር ይዘት በተተገበረው የሎሚ መጠን እና በተረጨው የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት ላይ በእጅጉ የተመካ ነው። በስሮቹ ውስጥ የሚሟሟ ፕሮቲን ይዘት ከኖራ እና ኦክሳሊክ አሲድ መጠን ጋር በእጅጉ የተቆራኘ ነው። በስሮቹ ውስጥ ያሉት ነፃ አሚኖ አሲዶች እና ፕሮሊን ይዘት ከተተገበረው የሎሚ መጠን፣ ከኦክሳሊክ አሲድ፣ ከኖራ እና ከኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት ጋር በእጅጉ የተቆራኘ ነው (ሠንጠረዥ 5)።
በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ያለው የR1 ይዘት በእጅጉ የተመካው በተረጨው የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት፣ በተቀባው የሎሚ፣ የሎሚ እና የኦክሳሊክ አሲድ መጠን ላይ ነው። የፍላቮኖይድ ይዘት በእጅጉ የተመካው በኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ክምችት እና በተጨመረው የሎሚ መጠን ላይ ነው።
እንደ ሎሚ እና ኦክሳሊክ አሲድ ያሉ በአፈር ውስጥ ያለውን ካድሚየም በመጠገን በእፅዋት ውስጥ ያለውን የካድሚየም መጠን ለመቀነስ ብዙ ማሻሻያዎች ጥቅም ላይ ውለዋል። ሎሚ በሰብል ውስጥ ያለውን የካድሚየም መጠን ለመቀነስ እንደ የአፈር ማሻሻያ በስፋት ጥቅም ላይ ይውላል31። ሊያንግ እና ሌሎች 32 እንደዘገቡት ኦክሳሊክ አሲድ በከባድ ብረቶች የተበከለ አፈርን ለማስተካከልም ሊያገለግል ይችላል። የተለያዩ የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት በተበከለ አፈር ውስጥ ከተጨመረ በኋላ የአፈር ኦርጋኒክ ቁስ ይዘት ጨምሯል፣ የካሽን ልውውጥ አቅም ቀንሷል እና የፒኤች መጠን ጨምሯል33። ኦክሳሊክ አሲድ በአፈር ውስጥ ካሉ የብረት አየኖች ጋርም ምላሽ ሊሰጥ ይችላል። በሲዲ ውጥረት ሁኔታዎች ስር፣ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ውስጥ ያለው የሲዲ ይዘት ከቁጥጥር ጋር ሲነጻጸር በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል። ሆኖም፣ ሎሚ ጥቅም ላይ ከዋለ በከፍተኛ ሁኔታ ይቀንሳል። በዚህ ጥናት ውስጥ 750 ኪ.ግ/ሰ/ሜ ሎሚ ሲተገበር፣ የስሮች የሲዲ ይዘት ብሔራዊ ደረጃ ላይ ደርሷል (የሲዲ ገደብ Cd≤0.5 mg/kg ነው፣ AQSIQ፣ GB/T 19086-200834 ነው)፣ እና ውጤቱ ጥሩ ነበር። . በጣም ጥሩው ውጤት የሚገኘው 2250 ኪ.ግ/ሜ2 ሎሚ በመጨመር ነው። የኖራ መጨመር በአፈር ውስጥ ለ Ca2+ እና Cd2+ በርካታ የውድድር ቦታዎችን ይፈጥራል፣ እና የኦክሳሊክ አሲድ መጨመር በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ያለውን የCd ይዘት ይቀንሳል። ሎሚ እና ኦክሳሊክ አሲድ ከተቀላቀሉ በኋላ የፓናክስ ጊንሰንግ ሥር የሲዲ ይዘት በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል እና ወደ ብሔራዊ ደረጃ ደርሷል። በአፈር ውስጥ ያለው Ca2+ በጅምላ ፍሰት ሂደት በኩል ከሥሩ ወለል ጋር ይዋሃዳል እና በካልሲየም ቻናሎች (Ca2+ ቻናሎች)፣ በካልሲየም ፓምፖች (Ca2+-AT-Pase) እና በCa2+/H+ ፀረ-ፖርተሮች በኩል ወደ ሥር ሴሎች ሊገባ ይችላል፣ ከዚያም በአግድም ወደ ሥሮች ሊጓጓዝ ይችላል። Xylem23። በስሮች ውስጥ በCa እና Cd ይዘት መካከል ጉልህ የሆነ አሉታዊ ትስስር ነበር (P < 0.05)። የCd ይዘት እየጨመረ ሲሄድ ቀንሷል፣ ይህም በCa እና Cd መካከል ካለው ተቃራኒነት ሀሳብ ጋር የሚስማማ ነው። ANOVA የኖራ መጠን በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥር ውስጥ ባለው የCa ይዘት ላይ ከፍተኛ ተጽዕኖ እንዳሳደረ አሳይቷል። ፖንግራክ እና ሌሎች 35 እንደዘገቡት ሲዲ በካልሲየም ኦክሳሌት ክሪስታሎች ውስጥ ከኦክሳሌት ጋር ይጣመራል እና ከካ ጋር ይወዳደራል። ሆኖም ግን፣ የኦክሳሊክ አሲድ በካ ላይ ያለው የቁጥጥር ተጽእኖ እዚህ ግባ የሚባል አልነበረም። ይህ የሚያሳየው ከኦክሳሊክ አሲድ እና ከካ2+ የሚገኘው የካልሲየም ኦክሳሌት ዝናብ ቀላል ዝናብ እንዳልሆነ እና የኮፕሬሲፒቴሽን ሂደቱ በበርካታ የሜታቦሊክ መንገዶች ሊቆጣጠር ይችላል።
በካድሚየም ውጥረት ስር፣ በእፅዋት ውስጥ ከፍተኛ መጠን ያለው ምላሽ ሰጪ የኦክስጅን ዝርያዎች (ROS) ይፈጠራሉ፣ ይህም የሴል ሽፋኖችን አወቃቀር ይጎዳል36። የማሎንዲያልዴይድ (MDA) ይዘት የROS ደረጃን እና በእፅዋት የፕላዝማ ሽፋን ላይ የሚደርሰውን ጉዳት መጠን ለመገምገም እንደ አመላካች ሊያገለግል ይችላል።37. የፀረ-ኦክሲዳንት ስርዓቱ ምላሽ ሰጪ የኦክስጅን ዝርያዎችን ለማስወገድ አስፈላጊ የመከላከያ ዘዴ ነው38. የፀረ-ኦክሲዳንት ኢንዛይሞች (POD፣ SOD እና CATን ጨምሮ) እንቅስቃሴዎች በተለምዶ በካድሚየም ውጥረት ይለወጣሉ። ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት የMDA ይዘት ከCd ክምችት ጋር በአዎንታዊ መልኩ የተቆራኘ ሲሆን ይህም የእፅዋት ሽፋን የሊፒድ ፐርኦክሳይድ መጠን እየጨመረ ሲሄድ የሲዲ ክምችት እየጨመረ እንደመጣ ያሳያል37። ይህ በኦያንግ እና ሌሎች 39 በተደረገው ጥናት ውጤቶች ጋር የሚጣጣም ነው። ይህ ጥናት የMDA ይዘት በኖራ፣ በኦክሳሊክ አሲድ፣ በኖራ እና በኦክሳሊክ አሲድ በእጅጉ ተጽዕኖ እንደሚያሳድር ያሳያል። 0.1 mol L-1 oxalic acid ኔቡላይዜሽን ከተደረገ በኋላ የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የMDA ይዘት ቀንሷል፣ ይህም ኦካሊክ አሲድ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ውስጥ የሲዲ እና የROS መጠን ባዮአቫሊቲ ሊቀንስ እንደሚችል ያሳያል። የኦክሲዳንት ኢንዛይም ስርዓት የእፅዋቱ የመርዛማነት ተግባር የሚከናወንበት ነው። SOD በእፅዋት ሴሎች ውስጥ ያለውን O2- ያስወግዳል እና መርዛማ ያልሆነ O2 እና ዝቅተኛ መርዛማ H2O2 ያመነጫል። POD እና CAT H2O2ን ከእፅዋት ሕብረ ሕዋሳት ያስወግዳሉ እና የH2O2 መበስበስን ወደ H2O ያነቃቃሉ። በ iTRAQ ፕሮቲኦም ትንተና ላይ በመመስረት፣ የ SOD እና PAL የፕሮቲን አገላለጽ መጠን እንደቀነሰ እና የ POD አገላለጽ መጠን በCd40 ውጥረት ስር ሎሚ ከተተገበረ በኋላ እንደጨመረ ተገኝቷል። በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥር ውስጥ የCAT፣ SOD እና POD እንቅስቃሴዎች በኦክሳሊክ አሲድ እና በኖራ መጠን በእጅጉ ተጎድተዋል። በ0.1 mol L-1 oxalic acid የሚረጭ ህክምና የ SOD እና CAT እንቅስቃሴን በእጅጉ ጨምሯል፣ ነገር ግን በPOD እንቅስቃሴ ላይ ያለው የቁጥጥር ተጽእኖ ግልጽ አልነበረም። ይህ የሚያሳየው ኦካሊክ አሲድ በሲዲ ውጥረት ስር የ ROS መበስበስን እንደሚያፋጥን እና በዋናነት የ CAT እንቅስቃሴን በመቆጣጠር የ H2O2 መወገድን እንደሚያጠናቅቅ ያሳያል፣ ይህም ከጉዎ እና ሌሎች 41 በፕሴውዶስፐርሙም ሲቢሪኩም። ኮስ. ላይ በተደረገው የምርምር ውጤት ጋር ተመሳሳይ ነው። 750 ኪ.ግ/ሰ/ሜ2 ሎሚን በፀረ-ኦክሲዳንት ስርዓት ኢንዛይሞች እንቅስቃሴ እና በማሎንዲያልዴይድ ይዘት ላይ መጨመር የሚያስከትለው ውጤት ከኦክሳልሊክ አሲድ ጋር በመርጨት ከሚኖረው ውጤት ጋር ተመሳሳይ ነው። ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት የኦክሳልሊክ አሲድ የመርጨት ህክምና በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ውስጥ የ SOD እና CAT እንቅስቃሴዎችን የበለጠ ውጤታማ በሆነ መንገድ ሊያሻሽል እና የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የጭንቀት መቋቋምን ሊያሻሽል ይችላል። የSOD እና POD እንቅስቃሴ በ0.2 mol L-1 oxalic acid እና 3750 ኪ.ግ hm-2 ኖራ በመታከም ቀንሷል፣ ይህም ከፍተኛ መጠን ያለው ኦክሳሊክ አሲድ እና Ca2+ ከመጠን በላይ መርጨት የእፅዋትን ጭንቀት ሊያስከትል እንደሚችል ያሳያል፣ ይህም ከሉኦ እና ወዘተ ጥናት ጋር የሚስማማ ነው። 42.