Nature.comን ስለጎበኙ እናመሰግናለን። ውስን የCSS ድጋፍ ያለው የአሳሽ ስሪት እየተጠቀሙ ነው። ለተሻለ ተሞክሮ፣ የዘመነ አሳሽ እንዲጠቀሙ እንመክራለን (ወይም በኢንተርኔት ኤክስፕሎረር ውስጥ የተኳኋኝነት ሁነታን እንዲያሰናክሉ)። በተጨማሪም፣ ቀጣይነት ያለው ድጋፍ ለማረጋገጥ፣ ጣቢያውን ያለ ቅጦች እና ጃቫስክሪፕት እናሳያለን።
በእያንዳንዱ ስላይድ ሶስት እቃዎችን የሚያሳዩ ተንሸራታቾች። በእያንዳንዱ ስላይድ ውስጥ ለማንቀሳቀስ የኋላ እና የሚቀጥሉትን አዝራሮች ወይም በእያንዳንዱ ስላይድ ውስጥ ለማንቀሳቀስ በመጨረሻው ላይ ያሉትን የስላይድ መቆጣጠሪያ አዝራሮችን ይጠቀሙ።
የካድሚየም (Cd) ብክለት በዩናን ግዛት በሚገኘው የመድኃኒት ተክል ፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ላይ ስጋት ይፈጥራል። በውጫዊ የሲዲ ውጥረት ሁኔታዎች ውስጥ፣ የሎሚ አተገባበር (0.750፣ 2250 እና 3750 ኪ.ግ bm-2) እና የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት (0፣ 0.1 እና 0.2 mol l-1) በሲዲ ክምችት ላይ ያለውን ተጽእኖ ለመረዳት የመስክ ሙከራ ተካሂዷል። እና የፀረ-ኦክሲዳንት እርምጃ። የፓናክስ ኖቶጊንሴንግን የሚነኩ ስልታዊ እና የመድኃኒት ክፍሎች። ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት ፈጣን ሎሚ እና የኦክሳሊክ አሲድ መርጨት በሲዲ ውጥረት ስር በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ውስጥ የCa2+ መጠንን ሊጨምር እና የCd2+ መርዛማነትን ሊቀንስ ይችላል። የኖራ እና የኦክሳሊክ አሲድ መጨመር የፀረ-ኦክሲዳንት ኢንዛይሞችን እንቅስቃሴ ጨምሯል እና የኦስሞሬጉለተሮችን ሜታቦሊዝም ቀይሯል። የCAT እንቅስቃሴ በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል፣ በ2.77 ጊዜ ጨምሯል። ከፍተኛው የSOD እንቅስቃሴ በኦክሳሊክ አሲድ ሲታከም በ1.78 ጊዜ ጨምሯል። የMDA ይዘት በ58.38% ቀንሷል። ከሚሟሟ ስኳር፣ ነፃ አሚኖ አሲድ፣ ፕሮሊን እና የሚሟሟ ፕሮቲን ጋር በጣም ጉልህ የሆነ ትስስር አለ። ሎሚ እና ኦክሳሊክ አሲድ የካልሲየም አየኖችን (Ca2+) ሊጨምሩ፣ ሲዲውን ሊቀንሱ፣ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ውስጥ የጭንቀት መቻቻልን ሊያሻሽሉ እና አጠቃላይ ሳፖኒኖችን እና ፍላቮኖይድ ምርትን ሊያሳድጉ ይችላሉ። የሲዲ ይዘት ከቁጥጥር ውስጥ ካለው ዝቅተኛው ነበር፣ 68.57% ያነሰ ሲሆን ይህም ከመደበኛው እሴት ጋር የሚመጣጠን ነው (Cd≤0.5 mg/kg፣ GB/T 19086-2008)። የSPN መጠን 7.73% ነበር፣ ይህም የእያንዳንዱ ሕክምና ከፍተኛ ደረጃ ላይ ደርሷል፣ እና የፍላቮኖይድ ይዘት በ21.74% በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል፣ ይህም የመድኃኒት ደረጃውን የጠበቀ ዋጋ እና ምርጡን ምርት ደርሷል።
ካድሚየም (ሲዲ)፣ በእርሻ መሬት ውስጥ የተለመደ ብክለት እንደመሆኑ መጠን በቀላሉ ይንቀሳቀሳል እና ከፍተኛ የሆነ ባዮሎጂያዊ መርዛማነት አለው። ኤል ሻፌይ እና ሌሎች 2 የሲዲ መርዛማነት ጥቅም ላይ የዋሉትን ተክሎች ጥራት እና ምርታማነት እንደሚጎዳ ሪፖርት አድርገዋል። በቅርብ ዓመታት ውስጥ፣ በደቡብ ምዕራብ ቻይና በሚታረስ መሬት አፈር ውስጥ ከመጠን በላይ ካድሚየም የሚያስከትለው ክስተት በጣም ከባድ ሆኗል። የዩናን ግዛት የቻይና የባዮዳይቨርሲቲ መንግሥት ሲሆን ከእነዚህም ውስጥ የመድኃኒት ተክሎች ዝርያዎች በአገሪቱ ውስጥ ቀዳሚ ደረጃ ላይ ይገኛሉ። ሆኖም፣ የዩናን ግዛት የበለፀጉ የማዕድን ሀብቶች በማዕድን ማውጫ ሂደት ወቅት የአፈርን ከባድ የብረት ብክለት ያስከትላሉ፣ ይህም የአካባቢውን የመድኃኒት ተክሎች ምርት ይነካል።
ፓናክስ ኖቶጊንሴንግ (ቡርኪል) ቼን3 የአራሊሴያ ፓናክስ ጊንሰንግ ዝርያ የሆነ በጣም ጠቃሚ የሆነ ዘላቂ የእፅዋት መድኃኒት ተክል ነው። የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥር የደም ዝውውርን ያበረታታል፣ የደም መቆምን ያስወግዳል እና ህመምን ያስታግሳል። ዋናው የምርት ቦታ ዌንሻን ፕሪፌክቸር፣ ዩናን ግዛት 5 ነው። የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ በተከላ አካባቢ ከ75% በላይ በሆነው የአፈር ክፍል ላይ የሲዲ ብክለት ተገኝቷል እና በተለያዩ ቦታዎች ከ81-100% አልፏል። የሲዲ መርዛማ ተጽእኖ የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የመድኃኒት ክፍሎች በተለይም ሳፖኒን እና ፍላቮኖይድ ምርትን በእጅጉ ይቀንሳል። ሳፖኒንስ የአግሊኮኖች ክፍል ሲሆን ከእነዚህም ውስጥ አግሊኮኖች ትራይተርፔኖይድስ ወይም ስፒሮስቴራኔስ ሲሆኑ እነዚህም የብዙ የቻይና የእፅዋት መድኃኒቶች ዋና ዋና ንጥረ ነገሮች ሲሆኑ ሳፖኒንስን ይይዛሉ። አንዳንድ ሳፖኒንስ እንደ ፀረ-ባክቴሪያ እንቅስቃሴ፣ ፀረ-ባክቴሪያ፣ ማስታገሻ እና ፀረ-ካንሰር እንቅስቃሴ ያሉ ጠቃሚ ባዮሎጂያዊ ተግባራት አሏቸው7። ፍላቮኖይድስ በአጠቃላይ የሚያመለክተው ሁለት የቤንዚን ቀለበቶች ከፊኖሊክ ሃይድሮክሲል ቡድኖች ጋር በሦስት ማዕከላዊ የካርቦን አቶሞች የተገናኙባቸውን ተከታታይ ውህዶች ሲሆን ዋናው እምብርት 2-ፌኒልክሮማኖን 8 ነው። ጠንካራ አንቲኦክሲደንት ሲሆን በእፅዋት ውስጥ ኦክስጅንን የላቁ ራዲካሎችን ውጤታማ በሆነ መንገድ ማስወገድ፣ የእብጠት ባዮሎጂያዊ ኢንዛይሞችን ማውጣትን የሚከላከል፣ የቁስል ፈውስ እና የህመም ማስታገሻን የሚያበረታታ እና የኮሌስትሮል መጠንን ዝቅ የሚያደርግ ነው። የፓናክስ ጂንሴንግ ዋና ዋና ንቁ ንጥረ ነገሮች አንዱ ነው። በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የምርት አካባቢዎች ውስጥ በካድሚየም የአፈር ብክለትን ችግር መፍታት ዋና ዋና የመድኃኒት ክፍሎቹን ማምረት ለማረጋገጥ አስፈላጊ ሁኔታ ነው።
ሎሚ በቦታው ውስጥ የካድሚየም የአፈር ብክለትን ለማስተካከል ከሚታወቁት ፓሲቫተሮች አንዱ ነው። በአፈር ውስጥ የሲዲ መምጠጥ እና ማስቀመጥ ላይ ተጽዕኖ ያሳድራል እንዲሁም የፒኤች መጠንን በመጨመር እና የአፈር ኬሽን ልውውጥ አቅም (CEC)፣ የአፈር ጨው ሙሌት (BS)፣ የአፈር ሬዶክስ አቅም (Eh)3,11 ቅልጥፍናን በመቀየር የሲዲ ባዮሎጂያዊ እንቅስቃሴን ይቀንሳል። በተጨማሪም ሎሚ ከፍተኛ መጠን ያለው Ca2+ ይሰጣል፣ ይህም ከCd2+ ጋር አዮኒክ ተቃራኒነትን ይፈጥራል፣ ለስር መምጠጥ ቦታዎች ይወዳደራል፣ የሲዲ ወደ ቀረጻው እንዳይገባ ይከላከላል፣ እና ዝቅተኛ ባዮሎጂካል መርዛማነት አለው። በCd ውጥረት ስር 50 mmol l-1 Ca ሲጨመር በሰሊጥ ቅጠሎች ውስጥ የሲዲ ትራንስፖርት ታግዷል እና የሲዲ ክምችት በ80% ቀንሷል። በሩዝ (ኦሪዛ ሳቲቫ ኤል.) እና በሌሎች ሰብሎች ላይ በርካታ ተዛማጅ ጥናቶች ሪፖርት ተደርገዋል።12,13።
የከባድ ብረቶች ክምችትን ለመቆጣጠር የሰብል ቅጠሎችን መርጨት በቅርብ ዓመታት ውስጥ ከባድ ብረቶች እንዳይከማቹ ለመቆጣጠር አዲስ ዘዴ ነው። ይህ መርህ በዋናነት በእፅዋት ሴሎች ውስጥ ከሚፈጠረው የቼሌሽን ምላሽ ጋር የተያያዘ ሲሆን ይህም ከባድ ብረቶች በሴል ግድግዳ ላይ እንዲቀመጡ እና በእፅዋት የከባድ ብረቶች መምጠጥን ይከለክላል። እንደ የተረጋጋ ዲካርቦክሲሊክ አሲድ ኬላቲንግ ወኪል፣ ኦክሳሊክ አሲድ በእፅዋት ውስጥ ከባድ የብረት አየኖችን በቀጥታ ሊያጣ ይችላል፣ በዚህም መርዛማነትን ይቀንሳል። ጥናቶች እንደሚያሳዩት በአኩሪ አተር ውስጥ ያለው ኦክሳሊክ አሲድ Cd2+ን ሊያጣ እና Cd የያዙ ክሪስታሎችን በትሪኮም አፒካል ሴሎች በኩል ሊለቅ ይችላል፣ ይህም የሰውነት Cd2+ መጠንን ይቀንሳል16። ኦክሳሊክ አሲድ የአፈር pHን መቆጣጠር፣ የሱፐርኦክሳይድ ዲሙታዝ (SOD)፣ የፔሮክሳዝ (POD) እና የካታላዝ (CAT) እንቅስቃሴዎችን ሊጨምር ይችላል፣ እና የሚሟሟ ስኳር፣ የሚሟሟ ፕሮቲን፣ ነፃ አሚኖ አሲዶች እና ፕሮሊን ውስጥ ሰርጎ መግባትን ይቆጣጠራል። ሜታቦሊክ ሞዱላተሮች 17,18። በኦክሳሌት ተክሎች ውስጥ አሲዳማ ንጥረ ነገሮች እና ከመጠን በላይ Ca2+ የካልሲየም ኦክሳሌት ፍንጣቂዎችን በጀርም ፕሮቲኖች ተግባር ስር ይፈጥራሉ። በእፅዋት ውስጥ የCa2+ ክምችትን መቆጣጠር በእፅዋት ውስጥ የሟሟ ኦክሳሊክ አሲድ እና Ca2+ን ውጤታማ በሆነ መንገድ መቆጣጠር እና ከመጠን በላይ የኦክሳሊክ አሲድ እና Ca2+19,20 ክምችትን ማስወገድ ይችላል።
የተተገበረው የኖራ መጠን የመልሶ ማቋቋም ውጤትን ከሚነኩ ቁልፍ ነገሮች አንዱ ነው። የኖራ ፍጆታ ከ750 እስከ 6000 ኪ.ግ.ሰ.ሜ.2 እንደሚደርስ ተረጋግጧል። ፒኤች 5.0-5.5 ላላቸው አሲዳማ አፈርዎች፣ በ3000-6000 ኪ.ግ.ሰ.ሜ.2 መጠን ላይ የኖራ አተገባበር ከ750 ኪ.ግ.ሰ.ሜ.2 መጠን በእጅጉ ከፍ ያለ ነበር። ሆኖም፣ ከመጠን በላይ የኖራ አተገባበር በአፈር ላይ አሉታዊ ተጽዕኖዎችን ያስከትላል፣ ለምሳሌ በአፈር pH ላይ ትልቅ ለውጥ እና የአፈር መጭመቂያ22። ስለዚህ፣ የCaO ህክምና ደረጃዎችን እንደ 0፣ 750፣ 2250 እና 3750 ኪ.ግ.ሰ.ሜ.2 አድርገን አስቀምጠናል። ኦክሳሊክ አሲድ በአረብቢዶፕሲስ ላይ ሲተገበር፣ Ca2+ በ10 mM L-1 በከፍተኛ ሁኔታ እንደቀነሰ ተረጋግጧል፣ እና የCRT ጂን ቤተሰብ በCa2+ ምልክት ላይ ተጽዕኖ አሳድሯል20። ቀደም ሲል የተደረጉ አንዳንድ ጥናቶች መከማቸት የዚህን ሙከራ ትኩረት እንድንወስን እና በCa2+ እና Cd2+23,24,25 ላይ የውጭ ተጨማሪዎች መስተጋብርን ማጥናት እንድንቀጥል አስችሎናል። ስለዚህ፣ ይህ ጥናት በCd በተበከለ አፈር ውስጥ የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የሲዲ ይዘት እና የጭንቀት መቻቻል ላይ የሎሚ አተገባበር እና የኦክሳሊክ አሲድ ቅጠላ ቅጠሎችን መርጨት የቁጥጥር ዘዴን ለመመርመር እና ለመድኃኒት ጥራት ምርጥ መንገዶችን እና መንገዶችን የበለጠ ለማሰስ ያለመ ነው። ዋስትና። ከPanax ኖቶጊንሴንግ ይውጡ። በካድሚየም በተበከለ አፈር ውስጥ የእፅዋት እርሻ መስፋፋትን እና ለመድኃኒቶች የገበያ ፍላጎትን ለማሟላት ከፍተኛ ጥራት ያለው እና ዘላቂ ምርት ለማቅረብ ጠቃሚ መረጃዎችን ይሰጣል።
የአካባቢውን የዌንሻን ኖቶጊንሴንግ ዝርያ እንደ ቁሳቁስ በመጠቀም፣ በላኒዛይ (24°11′N፣ 104°3′E፣ ከፍታ 1446 ሜትር)፣ ኪዩቤይ ካውንቲ፣ ዌንሻን ግዛት፣ ዩናን ግዛት የመስክ ሙከራ ተካሂዷል። አማካይ አመታዊ የሙቀት መጠን 17°ሴ ሲሆን አማካይ አመታዊ የዝናብ መጠን 1250 ሚሜ ነው። የተጠናው አፈር ዳራ እሴቶች፡ TN 0.57 ግ ኪ.ግ-1፣ TP 1.64 ግ ኪ.ግ-1፣ TC 16.31 ግ ኪ.ግ-1፣ RH 31.86 ግ ኪ.ግ-1፣ አልካላይን ሃይድሮላይዝድ N 88.82 mg ኪ.ግ-1፣ ውጤታማ P 18.55 mg ኪ.ግ-1፣ የሚገኝ K 100.37 mg ኪ.ግ-1፣ ጠቅላላ Cd 0.3 mg ኪ.ግ-1 እና pH 5.4።
ታህሳስ 10 ቀን፣ 6 ሚ.ግ/ኪ.ግ Cd2+ (CdCl2 2.5H2O) እና ሎሚ (0.750፣ 2250 እና 3750 ኪ.ግ በሰዓት m-2) ተተግብረው ከ2017 በእያንዳንዱ መሬት ከ0-10 ሴ.ሜ በላይኛው የአፈር ክፍል ጋር ተቀላቅለዋል። እያንዳንዱ ህክምና 3 ጊዜ ተደግሟል። የሙከራው ቦታ በዘፈቀደ ተገኝቷል፣ የእያንዳንዱ ቦታ ስፋት 3 ሜ.2 ነበር። አንድ አመት እድሜ ያላቸው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ችግኞች በአፈር ውስጥ ለ15 ቀናት ከተተከሉ በኋላ ተተክለዋል። የጥላ መረቦችን ሲጠቀሙ፣ በጥላ ጥላ ውስጥ ያለው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የብርሃን ጥንካሬ ከመደበኛው የተፈጥሮ ብርሃን ጥንካሬ 18% ያህል ነው። በአካባቢው ባህላዊ የእድገት ዘዴዎች መሠረት ያድጉ። በ2019 የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የብስለት ደረጃ ላይ፣ ኦክሳሊክ አሲድ እንደ ሶዲየም ኦክሳሌት ይረጫል። የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት በቅደም ተከተል 0፣ 0.1 እና 0.2 ሞል l-1 ነበር፣ እና የፒኤች መጠን በናኦኤች ወደ 5.16 ተስተካክሏል፣ ይህም የፍርስራሹን አማካይ ፒኤች ለመምሰል ነው። የቅጠሎቹን የላይኛው እና የታችኛውን ገጽ በሳምንት አንድ ጊዜ ከጠዋቱ 8 ሰዓት ላይ ይረጩ። 4 ጊዜ ከተረጨ በኋላ፣ የ3 ዓመት ዕድሜ ያላቸው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ተክሎች በሳምንት 5 ላይ ተሰብስበዋል።
በህዳር 2019፣ በኦክሳሊክ አሲድ የታከሙ የሶስት አመት እድሜ ያላቸው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ተክሎች በሜዳ ላይ ተሰብስበዋል። የፊዚዮሎጂ ሜታቦሊዝም እና የኢንዛይም እንቅስቃሴን ለመፈተሽ የ3 አመት እድሜ ያላቸው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ተክሎች ናሙናዎች በማቀዝቀዣ ቱቦዎች ውስጥ ተቀምጠዋል፣ በፍጥነት በፈሳሽ ናይትሮጅን ውስጥ ቀዝቅዘው፣ ከዚያም በ-80°ሴ ወደ ማቀዝቀዣ ተላልፈዋል። የጎለመሰ ደረጃው ክፍል በሲዲ ስር ናሙናዎች እና በንቁ ንጥረ ነገር ይዘት ውስጥ መወሰን አለበት። በቧንቧ ውሃ ከታጠቡ በኋላ በ105°ሴ ለ30 ደቂቃዎች ያድርቁ፣ ክብደቱን በ75°ሴ ይያዙ እና ናሙናዎቹን በሞርታር ውስጥ ይፈጩ። ያስቀምጡ።
0.2 ግራም የደረቁ የእፅዋት ናሙናዎችን በኤርለንሜየር ጠርሙስ ውስጥ ይመዝኑ፣ 8 ሚሊ ሊትር HNO3 እና 2 ሚሊ ሊትር HClO4 ይጨምሩ እና በአንድ ሌሊት መቆለፊያ ይጨምሩ። በማግስቱ፣ የተጠማዘዘ አንገት ያለው ፈንጣጣ ነጭ ጭስ እስኪታይ እና የመበስበስ መፍትሄው ግልጽ እስኪሆን ድረስ በሦስት ማዕዘን ቅርጽ ባለው ጠርሙስ ውስጥ ለኤሌክትሮተርማል መበስበስ ይቀመጣል። ወደ ክፍሉ የሙቀት መጠን ከቀዘቀዘ በኋላ ድብልቁ ወደ 10 ሚሊ ሊትር የድምጽ መጠን ባለው ፍላሽ ተላልፏል። የሲዲው ይዘት በአቶሚክ መምጠጥ ስፔክትሮሜትር (Thermo ICE™ 3300 AAS፣ USA) ላይ ተወስኗል። (GB/T 23739-2009)።
0.2 ግራም የደረቁ የእፅዋት ናሙናዎችን በ50 ሚሊ ሊትር የፕላስቲክ ጠርሙስ ውስጥ ይመዝኑ፣ 10 ሚሊ ሊትር 1 mol l-1 HCL ይጨምሩ፣ ይዝጉትና ለ15 ሰዓታት ያናውጡትና ያጣሩ። ፒፔት በመጠቀም፣ ተገቢውን የማጣራት መጠን ለሚያስፈልገው የማጣሪያ መጠን ይሳሉና የSr2+ ክምችትን ወደ 1 ግራም L–1 ለማምጣት የSrCl2 መፍትሄውን ይጨምሩ። የCa ይዘት የሚወሰነው በአቶሚክ መምጠጥ ስፔክትሮሜትር (Thermo ICE™ 3300 AAS፣ USA) በመጠቀም ነው።
ማሎንዲያልዴይድ (MDA)፣ ሱፐርኦክሳይድ ዲስሙታዝ (SOD)፣ ፔሮክሲዳሴ (POD) እና ካታላዝ (CAT) የማጣቀሻ ኪት ዘዴ (DNM-9602፣ ቤጂንግ ፑላንግ ኒው ቴክኖሎጂ ኩባንያ፣ ሊሚትድ፣ የምርት ምዝገባ ቁጥር)፣ ተጓዳኝ የመለኪያ ኪት ቁጥርን ይጠቀሙ፡ Jingyaodianji (ኳሲ) ቃል 2013 ቁጥር 2400147።
የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ናሙና 0.05 ግራም ይመዝኑ እና በቱቦው ጎን በኩል የአንትሮን-ሰልፈሪክ አሲድ ሪአጀንት ይጨምሩ። ፈሳሹን በደንብ ለማዋሃድ ቱቦውን ለ2-3 ሰከንዶች ያናውጡት። ቱቦውን በሙከራ ቱቦው መደርደሪያ ላይ ለ15 ደቂቃዎች ያስቀምጡት። የሚሟሟ ስኳር ይዘት በ620 nm የሞገድ ርዝመት በUV-visual spectrophotometry (UV-5800፣ Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., China) በመጠቀም ተወስኗል።
0.5 ግራም አዲስ የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ናሙና ይመዝኑ፣ በ5 ሚሊ ሊትር የተቀዳ ውሃ እና በ10,000 ግራም ሴንትሪፉጅ ለ10 ደቂቃዎች ያህል ሆሞጋኔት እስኪሆን ድረስ ይፈጩት። የላይኛውን ፕሮቲን ወደ ቋሚ መጠን ያዋህዱት። የኩማሲ ብሪሊያንት ብሉ ዘዴ ጥቅም ላይ ውሏል። የሚሟሟ ፕሮቲን ይዘት በአልትራቫዮሌት እና በሚታዩ የስፔክትረም ክልሎች (UV-5800፣ Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., China) በ595 nm የሞገድ ርዝመት ስፔክትሮፎቶሜትሪ በመጠቀም እና ከከብት ሴረም አልቡሚን መደበኛ ኩርባ የተሰላ ነው።
0.5 ግራም ትኩስ ናሙና ይመዝኑ፣ 5 ሚሊ ሊትር 10% አሴቲክ አሲድ ይጨምሩበት እና ለመፍጨት፣ ለማጣራት እና ወደ ቋሚ መጠን ለማቅለጥ። የኒንሃይድሪን መፍትሄን በመጠቀም የክሮሞጂኒክ ዘዴ። የነጻ አሚኖ አሲዶች ይዘት በ570 nm የሞገድ ርዝመት በአልትራቫዮሌት-የሚታይ ስፔክትሮፎሜትሪ (UV-5800፣ የሻንጋይ ዩዋንክሲ ኢንስትሩመንት ኩባንያ፣ ሊሚትድ፣ ቻይና) ተወስኖ ከመደበኛው የሉኪን ኩርባ ተሰልቷል።
0.5 ግራም ትኩስ ናሙና ይመዝኑ፣ 5 ሚሊ ሊትር የ3% የሰልፎሳሊሲሊክ አሲድ መፍትሄ ይጨምሩ፣ በውሃ መታጠቢያ ውስጥ ያሞቁ እና ለ10 ደቂቃዎች ያናውጡት። ከቀዘቀዘ በኋላ መፍትሄው ተጣርቶ ወደ ቋሚ መጠን ተበረዘ። የአሲድ ኒንሃይድሪን ክሮሞጂኒክ ዘዴ ጥቅም ላይ ውሏል። የፕሮሊን ይዘት በ520 nm የሞገድ ርዝመት በ UV-visual spectrophotometry (UV-5800፣ Shanghai Yuanxi Instrument Co., Ltd., China) ተወስኖ ከፕሮሊን መደበኛ ኩርባ ተሰልቷል።
የሳፖኒኖች ይዘት የሚወሰነው በቻይና ህዝብ ሪፐብሊክ ፋርማኮፖያ (እትም 2015) መሠረት በከፍተኛ አፈጻጸም ፈሳሽ ክሮማቶግራፊ (HPLC) ነው። የHPLC መሰረታዊ መርህ ከፍተኛ ግፊት ያለው ፈሳሽ እንደ ተንቀሳቃሽ ምዕራፍ መጠቀም እና ለአልትራፋይን ቅንጣቶች በቋሚ የደረጃ አምድ ላይ ከፍተኛ ብቃት ያለው የመለያየት ቴክኖሎጂን መተግበር ነው። የአሠራር ክህሎቶች እንደሚከተለው ናቸው፡
የHPLC ሁኔታዎች እና የስርዓት ተስማሚነት ፈተና (ሠንጠረዥ 1)፡ የግራዲየንት ኢሉሽን የተከናወነው በሚከተለው ሰንጠረዥ መሠረት ሲሆን፣ እንደ መሙያ ከኦክታዴሲልሲላን ጋር የተሳሰረ ሲሊካ ጄል፣ እንደ ተንቀሳቃሽ ደረጃ A አሴቶኒትሪል፣ እንደ ተንቀሳቃሽ ደረጃ B ውሃ፣ እና የመለየት የሞገድ ርዝመት 203 nm ነበር። ከፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሳፖኒኖች R1 ጫፍ የተሰላው የቲዎሬቲካል ኩባያዎች ብዛት ቢያንስ 4000 መሆን አለበት።
የማጣቀሻ መፍትሄ ዝግጅት፡- ጂንሴኖሳይድስ Rg1፣ ጂንሴኖሳይድስ Rb1 እና ኖቶጊንሴኖሳይድስ R1 በትክክል ይመዝኑ፣ በml 0.4 ሚ.ግ. ጂንሴኖሳይድ Rg1፣ 0.4 ሚ.ግ. ጂንሴኖሳይድ Rb1 እና 0.1 ሚ.ግ. ኖቶጊንሴኖሳይድ R1 የተቀላቀለ መፍትሄ ለማግኘት ሜታኖልን ይጨምሩ።
የሙከራ መፍትሄ ዝግጅት፡ 0.6 ግራም የሳንክሲን ዱቄት ይመዝኑ እና 50 ሚሊ ሊትር ሜታኖል ይጨምሩ። ድብልቁ (W1) ተመዝኖ ለአንድ ሌሊት ተትቷል። የተቀላቀለው መፍትሄ ከዚያም በ80°ሴ ባለው የውሃ መታጠቢያ ውስጥ ለ2 ሰዓታት በትንሹ ይቀቀላል። ከቀዘቀዘ በኋላ የተቀላቀለውን መፍትሄ ይመዝኑ እና የተገኘውን ሜታኖል በመጀመሪያው የW1 ክብደት ላይ ይጨምሩ። ከዚያም በደንብ ያናውጡት እና ያጣሩ። ማጣሪያው ለመወሰን ቀርቷል።
የሳፖኒን ይዘት በ10 µl መደበኛ መፍትሄ እና በ10 µl ማጣሪያ በትክክል ተወስዶ ወደ HPLC (Thermo HPLC-ultimate 3000፣ Seymour Fisher Technology Co., Ltd.) ተወስዷል24።
መደበኛ ኩርባ፡ የRg1፣ Rb1፣ R1 የተቀላቀለ መደበኛ መፍትሄ መወሰን፣ የክሮማቶግራፊ ሁኔታዎች ከላይ ከተዘረዘሩት ጋር ተመሳሳይ ናቸው። በy-ዘንግ ላይ በተለካው የጫፍ ስፋት እና በ abscissa ላይ ባለው መደበኛ መፍትሄ ውስጥ ያለውን የሳፖኒን ክምችት ያለው መደበኛ ኩርባን ያሰሉ። የሳፖኒን ክምችትን ለማስላት የናሙናውን የተለካውን የጫፍ ስፋት ወደ መደበኛ ኩርባ ይሰኩ።
የ0.1 ግራም የ P. ኖቶጀንሲንግስ ናሙና ይመዝኑ እና 50 ሚሊ ሊትር 70% CH3OH መፍትሄ ይጨምሩ። ለ2 ሰዓታት ሶኒት ያድርጉ፣ ከዚያም በ4000 rpm ለ10 ደቂቃዎች ሴንትሪፉጅ ያድርጉ። 1 ሚሊ ሊትር የሱፐርናታንት ወስደው 12 ጊዜ ይቀልጡት። የፍላቮኖይድ ይዘት የሚወሰነው በአልትራቫዮሌት-ቪዥን ስፔክትሮፎሜትሪ (UV-5800፣ የሻንጋይ ዩዋንክሲ ኢንስትሩመንት ኩባንያ፣ ሊሚትድ፣ ቻይና) በ249 nm የሞገድ ርዝመት ነው። ኩዌርሴቲን መደበኛ የበዛ ንጥረ ነገር8 ነው።
መረጃው የተደራጀው በኤክሴል 2010 ሶፍትዌር ነው። የውሂብ ልዩነት ትንተና የተገመገመው በSPSS Statistics 20 ሶፍትዌር ነው። በመነሻ Pro 9.1 የተሳለው ምስል። የተሰሉት ስታቲስቲክስ አማካይ ± መደበኛ መዛባትን ያካትታሉ። የስታቲስቲክስ ጠቀሜታ መግለጫዎች በP<0.05 ላይ የተመሰረቱ ናቸው።
በተመሳሳይ የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት ቅጠላ ቅጠሎችን በሚረጭበት ጊዜ፣ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ያለው የCa ይዘት የኖራ አጠቃቀም እየጨመረ ሲሄድ በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል (ሠንጠረዥ 2)። ከኖራ አጠቃቀም ጋር ሲነጻጸር፣ የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ሳይደረግበት በ3750 ኪ.ግ ppm ሎሚ የCa ይዘት በ212% ጨምሯል። በተመሳሳይ የኖራ አጠቃቀም መጠን፣ የተረጨ የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት እየጨመረ ሲሄድ የካልሲየም ይዘት በትንሹ ጨምሯል።
በስሮቹ ውስጥ ያለው የሲዲ ይዘት ከ0.22 እስከ 0.70 ሚ.ግ/ኪ.ግ ይለያያል። በተመሳሳይ የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት፣ የ2250 ኪ.ግ hm-2 Cd ይዘት የኖራ አጠቃቀም መጠን እየጨመረ በመምጣቱ በእጅጉ ቀንሷል። ከቁጥጥር ጋር ሲነጻጸር፣ ሥሮቹን በ2250 ኪ.ግ gm-2 ሎሚ እና 0.1 mol l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲረጩ፣ የሲዲ ይዘቱ በ68.57% ቀንሷል። ያለ ሎሚ እና 750 ኪ.ግ hm-2 ሎሚ ሲተገበር፣ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ያለው የሲዲ ይዘት የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት በመጨመር በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። 2250 ኪ.ግ የኖራ ግራም-2 እና 3750 ኪ.ግ የኖራ ግራም-2 ሲገባ፣ በስሩ ውስጥ ያለው የሲዲ ይዘት መጀመሪያ ቀንሷል እና ከዚያም የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት በመጨመር ይጨምራል። በተጨማሪም፣ የ2D ትንተና እንደሚያሳየው በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥር ውስጥ ያለው የCa ይዘት በኖራ (F = 82.84**) በእጅጉ ተጎድቷል፣ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥር ውስጥ ያለው የሲዲ ይዘት በኖራ (F = 74.99**) እና በኦክሳሊክ አሲድ በእጅጉ ተጎድቷል። (F = 74.99**)። F = 7.72*)።
የኖራ አጠቃቀም መጠን እና በኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት መጨመር ጋር፣ የMDA ይዘት በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። በኖራ የታከሙ የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች እና 3750 ኪ.ግ ግ/ሜ2 ሎሚ መካከል ባለው የMDA ይዘት ላይ ምንም ጉልህ ልዩነት አልተገኘም። በ750 ኪ.ግ hm-2 እና 2250 ኪ.ግ hm-2 ሎሚ የአጠቃቀም መጠን፣ በተረጨበት ጊዜ በ0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ውስጥ ያለው የMDA ይዘት በቅደም ተከተል ካልተረጨው ኦክሳሊክ አሲድ 58.38% እና 40.21% ያነሰ ነበር። የMDA (7.57 nmol g-1) ይዘት 750 ኪ.ግ hm-2 ሎሚ እና 0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲጨመሩ ዝቅተኛው ነበር (ምስል 1)።
በካድሚየም ውጥረት ስር በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ በማሎንዲያልዴይድ ይዘት ላይ በኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ቅጠል ተጽእኖ [J]። P<0.05)። ከዚህ በታችም ተመሳሳይ ነው።
ከ3750 ኪ.ግ በሰዓት m2 የሎሚ ጭማቂ አጠቃቀም በስተቀር፣ የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የስር ስርዓት የSOD እንቅስቃሴ ላይ ምንም አይነት ጉልህ ልዩነት አልታየም። ሎሚ 0፣ 750 እና 2250 ኪ.ግ hm-2 ሲጠቀሙ፣ 0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ የSOD እንቅስቃሴ በኦክሳሊክ አሲድ ሕክምና ከሌለ በእጅጉ ከፍ ያለ ነበር፣ ይህም በቅደም ተከተል በ177.89%፣ 61.62% እና 45 .08% ጨምሯል። በስሮቹ ውስጥ የSOD እንቅስቃሴ (598.18 ዩኒት g-1) ያለ ሎሚ ሲታከም እና በ0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ ከፍተኛ ነበር። ኦክሳሊክ አሲድ ሳይኖር ወይም በ0.1 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ በተመሳሳይ ክምችት፣ የSOD እንቅስቃሴ እየጨመረ በሎሚ አጠቃቀም ጨምሯል። የSOD እንቅስቃሴ በ0.2 ሞል L-1 ኦክሳሊክ አሲድ ከተረጨ በኋላ በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል (ምስል 2)።
በካድሚየም ውጥረት ስር በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ በኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ቅጠል በሱፐርኦክሳይድ ዲስሙታዝ፣ ፐሮኦክሳይድ እና ካታላሴ እንቅስቃሴ ላይ የሚያሳድረው ተጽዕኖ [J]።
ልክ እንደ ስሮች ውስጥ ካለው የSOD እንቅስቃሴ ጋር ተመሳሳይ፣ በስሮች ውስጥ ያለው የPOD እንቅስቃሴ (63.33 µmol g-1) ያለ ሎሚ እና 0.2 mol L-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ ከፍተኛ ነበር፣ ይህም ከቁጥጥር 148.35% ከፍ ያለ ነበር (25.50 µmol g-1)። የPOD እንቅስቃሴ መጀመሪያ ጨምሯል እና ከዚያም የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ክምችት እና 3750 ኪ.ግ hm −2 የሎሚ ህክምና በመጨመር ቀንሷል። ከ0.1 mol l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ጋር ሲነጻጸር፣ የPOD እንቅስቃሴ በ0.2 mol l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲታከም በ36.31% ቀንሷል (ምስል 2)።
0.2 mol l-1 oxalic acid በመርጨት እና 2250 ኪ.ግ hm-2 ወይም 3750 ኪ.ግ hm-2 ሎሚ በመተግበር ካልሆነ በስተቀር የCAT እንቅስቃሴ ከቁጥጥር በእጅጉ ከፍ ያለ ነበር። በ0.1 mol l-1 oxalic acid በ0.2250 ኪ.ግ በሰዓት m-2 ወይም 3750 ኪ.ግ በሰዓት m-2 በኖራ የሚደረግ የCAT ሕክምና እንቅስቃሴ በ276.08%፣ 276.69% እና 33 .05% ጨምሯል። በ0.2 mol l-1 oxalic አሲድ የታከመ የስር (803.52 µmol g-1) የCAT እንቅስቃሴ ከፍተኛው ነበር። የCAT እንቅስቃሴ (172.88 µmol g-1) በ3750 ኪ.ግ hm-2 ሎሚ እና 0.2 mol l-1 oxalic አሲድ በማከም ረገድ ዝቅተኛው ነበር (ምስል 2)።
የሁለትዮሽ ትንተና እንደሚያሳየው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የCAT እንቅስቃሴ እና የMDA እንቅስቃሴ ከኦክሳሊክ አሲድ ወይም ከኖራ መርጫ መጠን እና ከሁለቱም ህክምናዎች ጋር በእጅጉ የተቆራኙ ናቸው (ሠንጠረዥ 3)። በስሮች ውስጥ ያለው የSOD እንቅስቃሴ ከኖራ እና ከኦክሳሊክ አሲድ ህክምና ወይም ከኦክሳሊክ አሲድ መርጫ ክምችት ጋር በእጅጉ የተቆራኘ ነበር። የሮድ POD እንቅስቃሴ ከተተገበረው የሎሚ መጠን ወይም ከኖራ እና ከኦክሳሊክ አሲድ ጋር በአንድ ጊዜ ከተተገበረው ጋር በእጅጉ የተቆራኘ ነው።
በስሩ ሰብሎች ውስጥ የሚሟሟ ስኳር ይዘት የኖራ አጠቃቀም መጠን እና በኦክሳሊክ አሲድ መርጨት ክምችት በመጨመሩ ቀንሷል። በኖራ ሳይቀባ እና 750 ኪ.ግ.ሰ.ሰ.ሰ.በሎሚ አጠቃቀም በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ የሚሟሟ ስኳር ይዘት ላይ ምንም አይነት ጉልህ ልዩነት አልነበረውም። 2250 ኪ.ግ.ሰ.ሰ.በሎሚ አጠቃቀም፣ በ0.2 ሞል.ሰ.በሎሚ አጠቃቀም፣ በ0.2 ሞል.ሰ.በሎሚ አጠቃቀም፣ በ0.2 ሞል.ሰ.በሎሚ አጠቃቀም፣ በ0.2 ሞል.ሰ.በሎሚ አጠቃቀም፣ በ22.81% ጨምሯል። በ3750 ኪ.ሰ.ሰ.በሎሚ አጠቃቀም፣ የሚሟሟ ስኳር ይዘት በኦክሳሊክ አሲድ መርጨት ክምችት መጨመር ጋር በእጅጉ ቀንሷል። የ0.2 ሞል.ሰ.በሎሚ አጠቃቀም፣ የ0.2 ሞል.ሰ.በሎሚ አጠቃቀም፣ ከኦክሳሊክ አሲድ መርጨት ህክምና ጋር ሲነጻጸር በ38.77% ያነሰ ነበር። በተጨማሪም፣ በ0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ሕክምና ዝቅተኛው የሚሟሟ የስኳር ይዘት 205.80 ሚ.ግ g-1 ነበር (ምስል 3)።
በካድሚየም ውጥረት ስር በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ባለው ሙሉ በሙሉ የሚሟሟ ስኳር እና የሚሟሟ ፕሮቲን ይዘት ላይ በኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ቅጠል ተጽእኖ [J]።
በስሩ ውስጥ የሚሟሟ ፕሮቲን ይዘት የኖራ እና የኦክሳሊክ አሲድ የአጠቃቀም ፍጥነት በመጨመር ቀንሷል። ሎሚ በሌለበት ጊዜ፣ በ0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ በሚረጭበት ሕክምና ውስጥ የሚሟሟ ፕሮቲን ይዘት ከቁጥጥር ውስጥ ካለው ጋር ሲነጻጸር በ16.20% በእጅጉ ያነሰ ነበር። 750 ኪ.ግ hm-2 ሎሚ ሲተገበር፣ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ በሚሟሟ ፕሮቲን ይዘት ላይ ምንም ጉልህ ልዩነት አልታየም። በ2250 ኪ.ግ በሰዓት m-2 የሎሚ አተገባበር መጠን፣ በ0.2 ሞል l-1 የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ሕክምና ውስጥ የሚሟሟ ፕሮቲን ይዘት ከኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ሕክምና (35.11%) በእጅጉ ከፍ ያለ ነበር። ሎሚ በ3750 ኪ.ግ በሰዓት m-2 ሲተገበር፣ የሚሟሟ ፕሮቲን ይዘት የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ክምችት በመጨመር በእጅጉ ቀንሷል፣ እና የሚሟሟ ፕሮቲን ይዘት (269.84 µg g-1) በ0.2 ሞል l-1 ሲታከም ዝቅተኛው ነበር። 1 በኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ (ምስል 3)።
በኖራ በሌለበት የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ባሉ ነፃ አሚኖ አሲዶች ይዘት ላይ ምንም ጉልህ ልዩነት አልተገኘም። በኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት እና በ750 ኪ.ግ hm-2 የሎሚ አተገባበር መጠን መጨመር፣ የነጻ አሚኖ አሲዶች ይዘት መጀመሪያ ቀንሷል እና ከዚያም ጨምሯል። በ2250 ኪ.ግ hm-2 ሎሚ እና በ0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ የሚደረግ ሕክምና ከኦክሳሊክ አሲድ ጋር ሲነጻጸር የነጻ አሚኖ አሲዶች ይዘት በ33.58% በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል። በኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት መጨመር እና 3750 ኪ.ግ hm-2 የሎሚ አተገባበር፣ የነጻ አሚኖ አሲድ ይዘት በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። በ0.2 ሞል L-1 ኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ሕክምና ውስጥ የነጻ አሚኖ አሲዶች ይዘት ያለኦክሳሊክ አሲድ ሕክምና ከተደረገው ሕክምና በ49.76% ያነሰ ነበር። የነጻ አሚኖ አሲድ ይዘት ያለኦክሳሊክ አሲድ ሕክምና ሲታከም ከፍተኛ ነበር እና 2.09 ሚ.ግ/ግ ነበር። የነጻ አሚኖ አሲዶች (1.05 ሚ.ግ. ግ-1) ይዘት በ0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ ዝቅተኛው ነበር (ምስል 4)።
በካድሚየም ውጥረት ሁኔታዎች ውስጥ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ በሚገኙ ነፃ አሚኖ አሲዶች እና ፕሮሊን ይዘት ላይ ከኦክሳሊክ አሲድ ጋር የሚረጭ ቅጠል ውጤት [J]።
የኖራ እና የኦክሳሊክ አሲድ የአጠቃቀም መጠን በመጨመር በስሮቹ ውስጥ ያለው የፕሮሊን ይዘት ቀንሷል። የኖራ በሌለበት የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የፕሮሊን ይዘት ላይ ጉልህ የሆነ ልዩነት አልነበረም። የኦክሳሊክ አሲድ እና የኖራ የመተግበር መጠን 750፣ 2250 ኪ.ግ hm-2 ሲጨምር የፕሮሊን ይዘት መጀመሪያ ቀንሷል ከዚያም ጨምሯል። በ0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ የመርጨት ህክምና ውስጥ ያለው የፕሮሊን ይዘት በ0.1 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ የመርጨት ህክምና ውስጥ ካለው የፕሮሊን ይዘት በእጅጉ ከፍ ያለ ሲሆን ይህም በቅደም ተከተል በ19.52% እና 44.33% ጨምሯል። 3750 ኪ.ግ·hm-2 ሎሚ ሲተገበር፣ የፕሮሊን ይዘት በኦክሳሊክ አሲድ የመርጨት ክምችት ሲጨምር በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። በ0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ከተረጨ በኋላ የፕሮሊን ይዘት ከኦክሳሊክ አሲድ ከሌለው በ54.68% ያነሰ ነበር። የፕሮሊን ይዘት ዝቅተኛው ሲሆን በ0.2 ሞል/ሊትር ኦክሳሊክ አሲድ ሲታከም 11.37 μg/g ነበር (ምስል 4)።
በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ውስጥ ያሉት አጠቃላይ ሳፖኒኖች ይዘት Rg1>Rb1>R1 ነበር። በሶስቱ ሳፖኒኖች ይዘት ላይ ምንም አይነት ጉልህ ልዩነት አልታየም ምክንያቱም የኦክሳሊክ አሲድ ስፕሬይ ክምችት እየጨመረ እና ምንም አይነት ሎሚ አልነበረውም (ሠንጠረዥ 4)።
0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ የR1 ይዘት ኦክሳሊክ አሲድ በሌለበት እና 750 ወይም 3750 ኪ.ግ.ሰ.ሜ-2 ሲረጭ በእጅጉ ያነሰ ነበር። 0 ወይም 0.1 ሞል l-1 የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ክምችት ሲኖር፣ በR1 ይዘት ላይ ምንም አይነት ጉልህ ልዩነት አልታየም የኖራ አተገባበር መጠን ጨምሯል። 0.2 ሞል l-1 የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ክምችት ሲኖር፣ የR1 ይዘት 3750 ኪ.ግ hm-2 ሎሚ ያለ ኖራ ከነበረው 43.84% በእጅጉ ያነሰ ነበር (ሠንጠረዥ 4)።
የRg1 ይዘት በመጀመሪያ ጨምሯል እና ከዚያም ቀንሷል፤ በኦክሳሊክ አሲድ እና በኖራ የመተግበር መጠን 750 ኪ.ግ·h·m−2 እየጨመረ በመጣው የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ክምችት። በ2250 ወይም 3750 ኪ.ግ በሰዓት m-2 የሎሚ አተገባበር መጠን፣ የRg1 ይዘት እየጨመረ በመጣው የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ክምችት ቀንሷል። በተመሳሳይ የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ክምችት፣ የRg1 ይዘት በመጀመሪያ ጨምሯል እና ከዚያም በኖራ የመተግበር መጠን ጨምሯል። ከቁጥጥሩ ጋር ሲነጻጸር፣ ሶስት የኦክሳሊክ አሲድ ርጭት ክምችት እና 750 ኪ.ግ በሰዓት m-2 ካልሆነ በስተቀር፣ የRg1 ይዘት ከቁጥጥሩ በላይ ነበር፣ በሌሎች ህክምናዎች ሥሮች ውስጥ ያለው የRg1 ይዘት ከቁጥጥሩ ያነሰ ነበር። የRg1 ይዘት በ750 ኪ.ግ ግራም-2 ሎሚ እና 0.1 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ ከፍተኛ ነበር፣ ይህም ከቁጥጥሩ በ11.54% ከፍ ያለ ነበር (ሠንጠረዥ 4)።
የRb1 ይዘት በመጀመሪያ ጨምሯል እና ከዚያም ቀንሷል፤ በኦክሳሊክ አሲድ እና በሎሚ አጠቃቀም መጠን 2250 ኪ.ግ hm-2 እየጨመረ በመምጣቱ። 0.1 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ከተረጨ በኋላ የRb1 ይዘት ቢበዛ 3.46% ደርሷል፤ ይህም ኦክሳሊክ አሲድ ካልረጨ በ74.75% ይበልጣል። በሌሎች የሎሚ ሕክምናዎች፣ በተለያዩ የኦክሳሊክ አሲድ የሚረጭ ክምችት መካከል ምንም ጉልህ ልዩነት አልነበረም። በ0.1 እና 0.2 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ፣ የRb1 ይዘት መጀመሪያ ቀንሷል፣ ከዚያም እየጨመረ የሚሄድ የሎሚ መጠን ሲጨመር ይቀንሳል (ሠንጠረዥ 4)።
በተመሳሳይ የተረጨ ኦክሳሊክ አሲድ ክምችት፣ የፍላቮኖይድ ይዘት መጀመሪያ ጨምሯል እና ከዚያም ቀንሷል። የተለያዩ የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት ያላቸው 3750 ኪ.ግ hm-2 ሎሚዎች በፍላቮኖይድ ይዘት ላይ ከፍተኛ ልዩነት ነበራቸው። ሎሚ በ750 እና 2250 ኪ.ግ በሰዓት ሜ-2 መጠን ሲተገበር፣ የፍላቮኖይድ ይዘት በመጀመሪያ ጨምሯል እና ከዚያም በኦክሳሊክ አሲድ የሚረጨው ክምችት እየጨመረ ይሄዳል። በ750 ኪ.ግ hm-2 የአጠቃቀም መጠን ሲታከም እና በ0.1 ሞል l-1 ኦክሳሊክ አሲድ ሲረጭ፣ የፍላቮኖይድ ይዘት ከፍተኛው እና 4.38 ሚ.ግ g-1 ነበር፣ ይህም ከሎሚ ጋር በተመሳሳይ የአተገባበር መጠን 18.38% ከፍ ያለ ነው። ኦክሳሊክ አሲድ ሳይረጭ። በኦክሳሊክ አሲድ 0.1 ሞል l-1 በሚረጭበት ጊዜ የፍላቮኖይድ ይዘት ከኦክሳሊክ አሲድ እና ከሎሚ ጋር 2250 ኪ.ግ hm-2 ሳይረጭ ከተደረገው ሕክምና ጋር ሲነጻጸር በ21.74% ጨምሯል (ምስል 5)።
የኦክሳሌት ቅጠል መርጨት በካድሚየም ውጥረት ስር በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ላይ ባለው የፍላቮኖይድ ይዘት ላይ የሚያሳድረው ተጽዕኖ [J]።
የሁለትዮሽ ትንተና እንደሚያሳየው የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ የሚሟሟ የስኳር ይዘት ከተተገበረው የሎሚ መጠን እና ከተረጨው የኦክሳሊክ አሲድ ክምችት ጋር በእጅጉ የተቆራኘ ነው። በስሩ ሰብሎች ውስጥ የሚሟሟ ፕሮቲን ይዘት ከኖራ፣ ከኖራ እና ከኦክሳሊክ አሲድ የመተግበር ፍጥነት ጋር በእጅጉ የተቆራኘ ነው። በስሩ ውስጥ ያሉት ነፃ አሚኖ አሲዶች እና ፕሮሊን ይዘት ከኖራ የመተግበር ፍጥነት፣ ከኦክሳሊክ አሲድ፣ ከኖራ እና ከኦክሳሊክ አሲድ የመርጨት ክምችት ጋር በእጅጉ የተቆራኘ ነው (ሠንጠረዥ 5)።
በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ያለው የR1 ይዘት ከኦክሳሊክ አሲድ፣ ከተተገበረው ሎሚ፣ ሎሚ እና ኦክሳሊክ አሲድ መጠን ጋር በእጅጉ የተቆራኘ ነው። የፍላቮኖይድ ይዘት ከተረጨው ኦክሳሊክ አሲድ ክምችት እና ከተተገበረው የሎሚ መጠን ጋር በእጅጉ የተቆራኘ ነው።
እንደ ሎሚ እና ኦክሳሊክ አሲድ30 ያሉ በአፈር ውስጥ ያለውን ሲዲ በማገድ የእፅዋት ሲዲ (Cd) ለመቀነስ ብዙ ማሻሻያዎች ጥቅም ላይ ውለዋል። ሎሚ በሰብል ውስጥ ያለውን የካድሚየም ይዘት ለመቀነስ እንደ የአፈር ተጨማሪ ነገር በስፋት ጥቅም ላይ ይውላል31። ሊያንግ እና ሌሎች 32 እንደዘገቡት ኦክሳሊክ አሲድ በከባድ ብረቶች የተበከሉ አፈርዎችን ወደነበረበት ለመመለስ ሊያገለግል ይችላል። በተበከለ አፈር ላይ የተለያዩ የኦክሳሊክ አሲድ ክምችቶችን ከተተገበረ በኋላ የአፈር ኦርጋኒክ ቁስ ጨምሯል፣ የካሽን ልውውጥ አቅሙ ቀንሷል፣ እና የፒኤች ዋጋ በ33 ጨምሯል። ኦክሳሊክ አሲድ በአፈር ውስጥ ካሉ የብረት አየኖች ጋርም ምላሽ ሊሰጥ ይችላል። በሲዲ ውጥረት ስር፣ በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ውስጥ ያለው የሲዲ ይዘት ከቁጥጥር ጋር ሲነጻጸር በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል። ሆኖም፣ ሎሚ ጥቅም ላይ ሲውል፣ በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል። በዚህ ጥናት፣ 750 ኪ.ግ hm-2 ሎሚ ሲተገበር፣ በስሩ ውስጥ ያለው የሲዲ ይዘት ብሔራዊ ደረጃ ላይ ደርሷል (የሲዲ ገደብ፡ Cd≤0.5 mg/kg፣ AQSIQ፣ GB/T 19086-200834)፣ እና 2250 ኪ.ግ hm−2 ሎሚ ሲተገበር ከኖራ ጋር በተሻለ ሁኔታ ይሰራል። የሎሚ አተገባበር በአፈር ውስጥ በCa2+ እና Cd2+ መካከል በርካታ የፉክክር ቦታዎችን ፈጥሯል፣ እና የኦክሳሊክ አሲድ መጨመር በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ያለውን የሲዲ ይዘት ሊቀንስ ይችላል። ሆኖም፣ የፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች የሲዲ ይዘት በኖራ እና በኦክሳሊክ አሲድ ጥምረት በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል፣ ይህም ወደ ብሔራዊ ደረጃ ደርሷል። በአፈር ውስጥ ያለው Ca2+ በጅምላ ፍሰት ወቅት በሥሩ ወለል ላይ ይዋጣል እና በካልሲየም ቻናሎች (Ca2+-ቻናሎች)፣ በካልሲየም ፓምፖች (Ca2+-AT-Pase) እና በCa2+/H+ ፀረ-ፖርተሮች በኩል በስር ሴሎች ሊወሰድ ይችላል፣ ከዚያም በአግድም ወደ ሥር xylem 23 ሊጓጓዝ ይችላል። ይዘቱ Root Ca ከCd ይዘት (P<0.05) ጋር በእጅጉ አሉታዊ ግንኙነት ነበረው። የCd ይዘት በCa ይዘት መጨመር ቀንሷል፣ ይህም ስለ Ca እና Cd ተቃራኒነት ካለው አስተያየት ጋር የሚስማማ ነው። የልዩነት ትንተና እንደሚያሳየው የኖራ መጠን በፓናክስ ኖቶጊንሴንግ ሥሮች ውስጥ ባለው የCa ይዘት ላይ ከፍተኛ ተጽዕኖ አሳድሯል። Pongrac et al. 35 Cd በካልሲየም ኦክሳሌት ክሪስታሎች ውስጥ ከኦክሳሌት ጋር እንደሚጣበቅ እና ከCa ጋር እንደሚወዳደር ዘግበዋል። ሆኖም፣ በOxalate የCa ቁጥጥር ጉልህ አልነበረም። ይህ በኦክሳሊክ አሲድ እና Ca2+ የተፈጠረው የካልሲየም ኦክሳሌት ዝናብ ቀላል ዝናብ እንዳልሆነ እና የጋራ ዝናብ ሂደቱ በተለያዩ የሜታቦሊክ መንገዶች ሊቆጣጠር እንደሚችል አሳይቷል።