nature.comን ስለጎበኙ እናመሰግናለን። የሚጠቀሙበት የአሳሽ ስሪት የተወሰነ የCSS ድጋፍ አለው። ለተሻለ ተሞክሮ፣ የቅርብ ጊዜውን የአሳሽ ስሪት (ወይም በኢንተርኔት ኤክስፕሎረር ውስጥ የተኳሃኝነት ሁነታን እንዲያጠፉ) እንዲጠቀሙ እንመክራለን። በተጨማሪም፣ ቀጣይነት ያለው ድጋፍ ለማረጋገጥ፣ ይህ ጣቢያ ቅጦችን ወይም ጃቫስክሪፕትን አያካትትም።
ሲንቶን 3-(አንትራሰን-9-ኢል)-2-ሳይያኖአክሪሎይል ክሎራይድ 4 ከተለያዩ ናይትሮጅን ኒውክሊዮፊሎች ጋር ባለው ምላሽ አማካኝነት የተለያዩ ከፍተኛ ንቁ ሄትሮሳይክሊክ ውህዶችን ለማዋሃድ ተቀላቅሏል። የእያንዳንዱ የተቀናበረ ሄትሮሳይክሊክ ውህድ አወቃቀር በስፔክትሮስኮፒክ እና ኤለመንታል ትንተና በመጠቀም በደንብ ተለይቷል። ከአስራ ሶስት አዳዲስ ሄትሮሳይክሊክ ውህዶች ውስጥ አሥሩ ባለብዙ መድሃኒት መቋቋም የሚችሉ ባክቴሪያዎችን (MRSA) ላይ አበረታች ውጤታማነት አሳይተዋል። ከእነዚህም መካከል ውህዶች 6፣ 7፣ 10፣ 13b እና 14 ወደ 4 ሴ.ሜ የሚጠጋ የመከልከል ዞኖች ያሉት ከፍተኛውን ፀረ-ባክቴሪያ እንቅስቃሴ አሳይተዋል። ሆኖም፣ የሞለኪውላር ዶኪንግ ጥናቶች እንደሚያሳዩት ውህዶች ከፔኒሲሊን-ማሰር ፕሮቲን 2a (PBP2a) ጋር የተለያዩ የማሰር ትስስር ያላቸው ሲሆን ይህም ለMRSA መቋቋም ቁልፍ ኢላማ ነው። እንደ 7፣ 10 እና 14 ያሉ አንዳንድ ውህዶች ከኮም-ክሪስታላይዝድ ኩዊናዞሊኖን ሊጋንድ ጋር ሲነጻጸር በPBP2a ንቁ ቦታ ላይ ከፍተኛ የማሰር ፍቅር እና የመስተጋብር መረጋጋት አሳይተዋል። በአንፃሩ፣ ውህዶች 6 እና 13b ዝቅተኛ የመትከያ ውጤቶች ቢኖራቸውም አሁንም ከፍተኛ የሆነ የፀረ-ባክቴሪያ እንቅስቃሴ አሳይተዋል፣ ውህድ 6 ዝቅተኛው MIC (9.7 μg/100 μL) እና MBC (78.125 μg/100 μL) እሴቶች አሉት። የመትከያ ትንተና በተለይም እንደ Lys 273፣ Lys 316 እና Arg 298 ካሉ ቅሪቶች ጋር የሃይድሮጂን ትስስር እና π-መቆለልን ጨምሮ ቁልፍ መስተጋብሮችን አሳይቷል፣ እነዚህም በPBP2a ክሪስታል መዋቅር ውስጥ ካለው አብሮ-ክሪስታላይዝድ ሊጋንድ ጋር መስተጋብር እንደፈጠሩ ተለይተዋል። እነዚህ ቅሪቶች ለPBP2a ኢንዛይማቲክ እንቅስቃሴ አስፈላጊ ናቸው። እነዚህ ውጤቶች የተቀናጁ ውህዶች እንደ ተስፋ ሰጪ ፀረ-MRSA መድኃኒቶች ሆነው ሊያገለግሉ እንደሚችሉ ይጠቁማሉ፣ ይህም ውጤታማ የሕክምና እጩዎችን ለመለየት ሞለኪውላዊ መቆለፍን ከባዮአሳይስ ጋር ማዋሃድ ያለውን አስፈላጊነት ያጎላል።
በዚህ ክፍለ ዘመን የመጀመሪያዎቹ ጥቂት ዓመታት ውስጥ የምርምር ጥረቶች በዋናነት ያተኮሩት በቀላሉ የሚገኙ የመነሻ ቁሳቁሶችን በመጠቀም በርካታ አዳዲስ ሄትሮሳይክሊክ ሲስተሞችን ለማዋሃድ አዳዲስ፣ ቀላል ሂደቶችን እና ዘዴዎችን በማዘጋጀት ላይ ነበር።
የአክሪሎኒትሪል ክፍሎች ለብዙ አስደናቂ ሄትሮሳይክሊክ ሲስተሞች ውህደት አስፈላጊ የመነሻ ቁሳቁሶች ተደርገው ይወሰዳሉ ምክንያቱም ከፍተኛ ምላሽ ሰጪ ውህዶች ናቸው። ከዚህም በላይ፣ በቅርብ ዓመታት ውስጥ እንደ የመድኃኒት መካከለኛዎች1,2,3፣ የፀረ-ኤችአይቪ፣ የፀረ-ቫይረስ፣ የፀረ-ካንሰር፣ ፀረ-ባክቴሪያ፣ ፀረ-ጭንቀት እና ፀረ-ኦክሲዳንት ወኪሎች4,5,6,7,8,9,10 ያሉ በፋርማኮሎጂካል አፕሊኬሽኖች መስክ ወሳኝ ጠቀሜታ ያላቸውን ምርቶች ለማዘጋጀት እና ለማዋሃድ በስፋት ጥቅም ላይ ውለዋል። በቅርቡ የአንትራሲን እና ተዋጽኦዎቹ ባዮሎጂያዊ ውጤታማነት፣ አንቲባዮቲክ፣ ፀረ-ካንሰር11,12፣ ፀረ-ባክቴሪያ13,14,15 እና ፀረ-ተባይ ባህሪያት16,17ን ጨምሮ፣ ብዙ ትኩረትን ስቧል18,19,20,21። አክሬሎኒትሪል እና አንትራሲን ክፍሎችን የያዙ ፀረ-ተሕዋስያን ውህዶች በስእል 1 እና 2 ላይ ይታያሉ።
እንደ የዓለም ጤና ድርጅት (WHO) (2021) ገለጻ፣ ፀረ-ተሕዋስያንን የመቋቋም አቅም (AMR) ለጤና እና ለልማት ዓለም አቀፍ ስጋት ነው። ታካሚዎች ሊፈወሱ አይችሉም፣ ይህም ረዘም ላለ ጊዜ የሆስፒታል ቆይታ እና የበለጠ ውድ መድኃኒቶች አስፈላጊነትን እንዲሁም የሞት እና የአካል ጉዳት መጨመርን ያስከትላል። ውጤታማ ፀረ-ተሕዋስያን እጥረት ብዙውን ጊዜ ለተለያዩ ኢንፌክሽኖች በተለይም በኬሞቴራፒ እና በዋና ዋና የቀዶ ጥገና ጊዜያት ሕክምናውን ወደ ውድቀት ይመራል።
እንደ የዓለም የጤና ድርጅት 2024 ሪፖርት ከሆነ፣ ሜቲሲሊን የሚቋቋም ስቴፕሎኮከስ ኦውሬስ (MRSA) እና ኢ. ኮላይ ቅድሚያ ከሚሰጣቸው በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ዝርዝር ውስጥ ተካትተዋል። ሁለቱም ባክቴሪያዎች ለብዙ አንቲባዮቲኮች የመቋቋም አቅም ስላላቸው ለማከም እና ለመቆጣጠር አስቸጋሪ የሆኑ ኢንፌክሽኖችን ይወክላሉ፣ እናም ይህንን ችግር ለመፍታት አዳዲስ እና ውጤታማ የሆኑ ፀረ-ተሕዋስያን ውህዶችን ማዘጋጀት አስቸኳይ ፍላጎት አለ። አንትራሴን እና ተዋጽኦዎቹ በግራም-ፖዘቲቭ እና ግራም-ኔጌቲቭ ባክቴሪያዎች ላይ ሊሠሩ የሚችሉ ታዋቂ ፀረ-ተሕዋስያን ናቸው። የዚህ ጥናት ዓላማ ለጤና አደገኛ የሆኑትን እነዚህን በሽታ አምጪ ተህዋሲያን መዋጋት የሚችል አዲስ ተዋጽኦ መፍጠር ነው።
የዓለም የጤና ድርጅት (WHO) እንደዘገበው ብዙ የባክቴሪያ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ለብዙ አንቲባዮቲኮች የመቋቋም አቅም አላቸው፤ ከእነዚህም ውስጥ ሜቲሲሊን የሚቋቋም ስቴፊሎኮከስ ኦውሬስ (MRSA) ይገኙበታል፤ ይህም በማህበረሰቡ እና በጤና አጠባበቅ አካባቢዎች የተለመደ የኢንፌክሽን መንስኤ ነው። የMRSA ኢንፌክሽኖች ያለባቸው ታካሚዎች ለመድኃኒት ተጋላጭ ከሆኑ ኢንፌክሽኖች ጋር ሲነፃፀሩ በ64% ከፍ ያለ የሞት መጠን እንዳላቸው ተዘግቧል። በተጨማሪም፣ ካርባፔነም የሚቋቋም ኢንቴሮባክቴሪያሴ (ማለትም፣ ኢ. ኮላይ)ን ለመከላከል የመጨረሻው የመከላከያ መስመር ኮሊስቲን ስለሆነ ኢ. ኮላይ ዓለም አቀፍ አደጋን ያስከትላል፣ ነገር ግን ኮሊስቲን የሚቋቋም ባክቴሪያዎች በቅርቡ በበርካታ አገሮች ሪፖርት ተደርገዋል። 22,23,24,25
ስለዚህ፣ የዓለም የጤና ድርጅት ዓለም አቀፍ የፀረ-ተሕዋስያን መቋቋም 26 የድርጊት መርሃ ግብር መሠረት፣ አዳዲስ ፀረ-ተሕዋስያን መድኃኒቶችን ማግኘትና ማዋሃድ አስቸኳይ ፍላጎት አለ። አንትራሲን እና አክሬሎኒትሪል እንደ ፀረ-ባክቴሪያ27፣ ፀረ-ፈንገስ28፣ ፀረ-ካንሰር29 እና ​​ፀረ-ኦክሲዳንት30 ወኪሎች ያሉበት ትልቅ አቅም በብዙ የታተሙ ጽሑፎች ውስጥ ተገልጧል። በዚህ ረገድ፣ እነዚህ ተዋጽኦዎች ሜቲሲሊንን የሚቋቋም ስቴፕሎኮከስ ኦውሬስ (MRSA) ላይ ለመጠቀም ጥሩ እጩዎች ናቸው ሊባል ይችላል።
ቀደም ሲል የተደረጉ የስነ-ጽሑፍ ግምገማዎች በእነዚህ ክፍሎች ውስጥ አዳዲስ ተዋጽኦዎችን እንድናመነጭ አነሳስተውናል። ስለዚህ፣ የአሁኑ ጥናት አንትራሲን እና አክሬሎኒትሪል ክፍሎችን የያዙ አዳዲስ ሄትሮሳይክሊክ ሲስተሞችን ለማዘጋጀት፣ ፀረ-ተሕዋስያን እና ፀረ-ባክቴሪያ ውጤታቸውን ለመገምገም እና ከፔኒሲሊን-ማሰሪያ ፕሮቲን 2a (PBP2a) ጋር ያላቸውን እምቅ ትስስር መስተጋብር በሞለኪውላር ዶክንግ ለመመርመር ያለመ ነው። በቀደሙት ጥናቶች ላይ በመመስረት፣ ይህ ጥናት ኃይለኛ የPBP2a መከላከያ እንቅስቃሴ ያላቸውን ተስፋ ሰጪ ፀረ-ሜቲሲሊን የሚቋቋሙ ስታፊሎኮከስ ኦውሬስ (MRSA) ወኪሎችን ለመለየት የሄትሮሳይክሊክ ሲስተሞችን ውህደት፣ ባዮሎጂካል ግምገማ እና የኮምፒውተር ትንተና ቀጥሏል።
የአሁኑ ጥናታችን አንትራሲን እና አክሬሎኒትሪል ክፍሎችን የያዙ አዳዲስ ሄትሮሳይክሊክ ውህዶችን ውህደት እና ፀረ-ተሕዋስያን ግምገማ ላይ ያተኩራል። 3-(አንትራሲን-9-ይል)-2-ሳይያኖአክሪሎይል ክሎራይድ 4 ተዘጋጅቶ ለአዳዲስ ሄትሮሳይክሊክ ስርዓቶች ግንባታ እንደ የግንባታ ብሎክ ሆኖ አገልግሏል።
የውህድ 4 አወቃቀር የሚወሰነው በስፔክትራል ዳታ ነው። የ1H-NMR ስፔክትረም በ9.26 ppm የCH= መኖርን አሳይቷል፣ የIR ስፔክትረም በ1737 ሴ.ሜ−1 የካርቦኒል ቡድን እና በ2224 ሴ.ሜ−1 የሳይያኖ ቡድን መኖሩን አሳይቷል፣ እና የ13CNMR ስፔክትረም የታቀደውን መዋቅር አረጋግጧል (የሙከራ ክፍልን ይመልከቱ)።
የ3-(አንትራሴን-9-ኢል)-2-ሳይያኖአክሪሎይል ክሎራይድ 4 ውህደት የተከናወነው አሮማቲክ ቡድኖች 250፣ 41፣ 42፣ 53 በኤታኖሊክ ሶዲየም ሃይድሮክሳይድ መፍትሄ (10%) በሃይድሮላይዝስ ሲሆን አሲዶች 354፣ 45፣ 56 እንዲሰጡ ተደርጓል፤ ከዚያም በውሃ መታጠቢያ ላይ በቲዮኒል ክሎራይድ ታክመዋል፤ ይህም አክሬሎይል ክሎራይድ ዴሪቬቲቭ 4 ከፍተኛ ምርት (88.5%) ይሰጣል፣ በስእል 3 ላይ እንደሚታየው።
የሚጠበቀው ፀረ-ባክቴሪያ ውጤታማነት ያላቸው አዳዲስ ሄትሮሳይክሊክ ውህዶችን ለመፍጠር፣ የአሲል ክሎራይድ 4 ከተለያዩ ዲኑክሊዮፊልስ ጋር ያለው ምላሽ ተካሂዷል።
አሲድ ክሎራይድ 4 ለአንድ ሰዓት በ0° በሃይድራዚን ሃይድሬት ታክሟል። እንደ አለመታደል ሆኖ ፒራዞሎን 5 አልተገኘም። ምርቱ አወቃቀሩ በስፔክትራል መረጃ የተረጋገጠ የአክሪላሚድ ተዋጽኦ ነበር። የIR ስፔክትረም በ1720 ሴ.ሜ−1፣ C≡N በ2228 ሴ.ሜ−1 እና NH በ3424 ሴ.ሜ−1 የመምጠጥ ባንዶችን አሳይቷል። የ1H-NMR ስፔክትረም የኦሌፊን ፕሮቶኖችን እና የNH ፕሮቶኖችን የልውውጥ ነጠላ ምልክት በ9.3 ppm አሳይቷል (የሙከራ ክፍልን ይመልከቱ)።
ሁለት የአሲድ ክሎራይድ 4 ሞሎች ከአንድ የፊኒልሃይድራዚን ሞል ጋር ምላሽ ተሰጥቷቸዋል ይህም የN-ፌኒላክሪሎይልሃይድራዚን ተዋጽኦ 7ን በጥሩ ምርት (77%) ለማግኘት ያስችላል (ምስል 5)። የ7 አወቃቀር የተረጋገጠው በኢንፍራሬድ ስፔክትሮስኮፒ መረጃ ሲሆን ይህም በ1691 እና 1671 ሴ.ሜ−1 ሁለት የC=O ቡድኖችን መምጠጥ፣ የCN ቡድን በ2222 ሴ.ሜ−1 መምጠጥ እና የNH ቡድን በ3245 ሴ.ሜ−1 መምጠጥን ያሳያል፣ እና የ1H-NMR ስፔክትረም የCH ቡድን በ9.15 እና 8.81 ppm እና የNH ፕሮቶን በ10.88 ppm አሳይቷል (የሙከራ ክፍልን ይመልከቱ)።
በዚህ ጥናት ውስጥ፣ የአሲል ክሎራይድ 4 ከ1,3-ዳይኑክሊዮፊልስ ጋር ያለው ምላሽ ተመርምሯል። በክፍል ሙቀት ውስጥ እንደ መሰረት በ1,4-ዲዮክሳን ውስጥ አሲል ክሎራይድ 4 ከ2-አሚኖፒሪዲን ጋር በክፍል ሙቀት ውስጥ አሲል ክሎራይድ 4 ከቲኢኤ ጋር የሚደረግ ሕክምና (ምስል 5)፣ አወቃቀሩ በስፔክትራል ዳታ ተለይቷል። የIR ስፔክትራ በ2222 ሴ.ሜ−1፣ NH በ3148 ሴ.ሜ−1 እና ካርቦኒል በ1665 ሴ.ሜ−1 የመምጠጥ ባንዶችን አሳይቷል፤ 1H NMR ስፔክትራ የኦሌፊን ፕሮቶኖች በ9.14 ppm መኖራቸውን አረጋግጧል (የሙከራ ክፍልን ይመልከቱ)።
ውህድ 4 ከቲዮሬያ ጋር ምላሽ በመስጠት ፒሪሚዲንቲዮን 9 ይሰጣል፤ ውህድ 4 ከቲዮሴሚካርባዚድ ጋር ምላሽ በመስጠት ቲዮፒራዞል ተዋጽኦ 10 ይሰጣል (ምስል 5)። የውህድ 9 እና 10 አወቃቀሮች በስፔክትራል እና ኤለመንታል ትንተና ተረጋግጠዋል (የሙከራ ክፍልን ይመልከቱ)።
ቴትራዚን-3-ቲዮል 11 የተዘጋጀው ውህድ 4 ከቲዮካርባዚድ ጋር እንደ 1,4-ዲኑክሊዮፊል (ምስል 5) ምላሽ ሲሆን አወቃቀሩ በስፔክትሮስኮፒ እና በኤለመንታል ትንተና ተረጋግጧል። በኢንፍራሬድ ስፔክትረም ውስጥ የC=N ትስስር በ1619 ሴ.ሜ−1 ታይቷል። በተመሳሳይ ጊዜ፣ የ1H-NMR ስፔክትረም በ7.78–8.66 ppm የአሮማቲክ ፕሮቶኖች ባለብዙ ፕሌት ምልክቶችን እና በ3.31 ppm የSH ፕሮቶኖችን ይይዛል (የሙከራ ክፍልን ይመልከቱ)።
አክሬሎይል ክሎራይድ 4 ከ1,2-ዲያሚኖቤንዜን፣ 2-አሚኖቲዮፌኖል፣ አንትራኒሊክ አሲድ፣ 1,2-ዲያሚኖኤቴን እና ኤታኖላሚን ጋር እንደ 1,4-ዳይኑክሊዮፊሎች በመሆን አዳዲስ ሄትሮሳይክሊክ ስርዓቶችን ይፈጥራል (13–16)።
የእነዚህ አዲስ የተቀናጁ ውህዶች አወቃቀሮች በስፔክትራል እና ኤለመንታል ትንተና ተረጋግጠዋል (የሙከራ ክፍልን ይመልከቱ)። የ2-ሃይድሮክሲፌኒላክራላሚድ ተዋጽኦ 17 የተገኘው ከ2-አሚኖፌኖል ጋር እንደ ዲኑክሊዮፊል (ምስል 6) በመልሶ ማጥቃት ሲሆን አወቃቀሩ በስፔክትራል እና ኤለመንታል ትንተና ተረጋግጧል። የውህድ 17 የኢንፍራሬድ ስፔክትረም የC=O እና C≡N ምልክቶች በቅደም ተከተል በ1681 እና 2226 ሴሜ−1 ላይ እንደታዩ አሳይቷል። ይህ በእንዲህ እንዳለ፣ የ1H-NMR ስፔክትረም የኦሌፊን ፕሮቶን ነጠላ ምልክት በ9.19 ppm ይዞ ቆይቷል፣ እና የOH ፕሮቶን በ9.82 ppm ታይቷል (የሙከራ ክፍልን ይመልከቱ)።
የአሲድ ክሎራይድ 4 ከአንድ ኒውክሊዮፊል (ለምሳሌ ኤቲላሚን፣ 4-ቶሉዊዲን እና 4-ሜቶክሲያኒሊን) ጋር በዲዮክሳን ውስጥ እንደ መሟሟት እና በክፍል ሙቀት ውስጥ እንደ ማነቃቂያ ቲኢኤ ያለው ምላሽ አረንጓዴ ክሪስታሊን አክሪላሚድ ተዋጽኦዎችን 18፣ 19a እና 19b አስገኝቷል። የውህዶች 18፣ 19a እና 19b ኤለመንታዊ እና ስፔክትራል መረጃዎች የእነዚህ ተዋጽኦዎች አወቃቀሮችን አረጋግጠዋል (የሙከራ ክፍልን ይመልከቱ) (ምስል 7)።
የተለያዩ ሰው ሰራሽ ውህዶችን ፀረ-ተሕዋስያን እንቅስቃሴ ከመረመሩ በኋላ፣ በሰንጠረዥ 1 እና በስእል 8 ላይ እንደሚታየው የተለያዩ ውጤቶች ተገኝተዋል (የስእል ፋይልን ይመልከቱ)። ሁሉም የተፈተኑ ውህዶች በግራም-ፖዘቲቭ ባክቴሪያ MRSA ላይ የተለያዩ የመከልከል ደረጃዎችን አሳይተዋል፣ ግራም-ኔጌቲቭ ባክቴሪያ ኤችቼሪቺያ ኮላይ ደግሞ ለሁሉም ውህዶች ሙሉ በሙሉ የመቋቋም አቅም አሳይተዋል። የተፈተኑ ውህዶች በMRSA ላይ ባለው የመከልከል ዞን ዲያሜትር ላይ በመመስረት በሦስት ምድቦች ሊከፈሉ ይችላሉ። የመጀመሪያው ምድብ በጣም ንቁ ሲሆን አምስት ውህዶችን (6፣ 7፣ 10፣ 13ለ እና 14) ያቀፈ ነበር። የእነዚህ ውህዶች የመከልከል ዞን ዲያሜትር ወደ 4 ሴ.ሜ የተጠጋ ነበር፤ በዚህ ምድብ ውስጥ በጣም ንቁ ውህዶች 6 እና 13ለ ነበሩ። ሁለተኛው ምድብ በመጠኑ ንቁ ሲሆን ሌሎች አምስት ውህዶችን (11፣ 13a፣ 15፣ 18 ​​እና 19a) ያቀፈ ነበር። የእነዚህ ውህዶች የመከልከል ዞን ከ3.3 እስከ 3.65 ሴ.ሜ የሚደርስ ሲሆን ውህድ 11 ደግሞ ትልቁን የመከልከል ዞን 3.65 ± 0.1 ሴ.ሜ ያሳያል። በሌላ በኩል፣ የመጨረሻው ቡድን ዝቅተኛው የፀረ-ተህዋሲያን እንቅስቃሴ (ከ3 ሴ.ሜ በታች) ያላቸው ሶስት ውህዶችን (8፣ 17 እና 19ለ) ይዟል። ምስል 9 የተለያዩ የመከላከያ ዞኖችን ስርጭት ያሳያል።
የተፈተኑት ውህዶች ፀረ-ተሕዋስያን እንቅስቃሴ ተጨማሪ ምርመራ ለእያንዳንዱ ውህድ MIC እና MBC መወሰንን ያካትታል። ውጤቶቹ በትንሹ ተለያይተዋል (በሰንጠረዥ 2፣ 3 እና ምስል 10 ላይ እንደሚታየው (የምስል ፋይልን ይመልከቱ))፣ ውህዶች 7፣ 11፣ 13a እና 15 እንደ ምርጥ ውህዶች እንደገና ተመድበዋል። ተመሳሳይ ዝቅተኛው MIC እና MBC እሴቶች ነበሯቸው (39.06 μg/100 μL)። ውህዶች 7 እና 8 ዝቅተኛ MIC እሴቶች (9.7 μg/100 μL) ቢኖራቸውም፣ የMBC እሴቶቻቸው ከፍ ያሉ ነበሩ (78.125 μg/100 μL)። ስለዚህ፣ ቀደም ሲል ከተጠቀሱት ውህዶች ደካማ እንደሆኑ ተደርገው ይቆጠሩ ነበር። ሆኖም፣ እነዚህ ስድስት ውህዶች ከተፈተኑት ውስጥ በጣም ውጤታማ ነበሩ፣ ምክንያቱም የMBC እሴቶቻቸው ከ100 μg/100 μL በታች ነበሩ።
ውህዶች (10፣ 14፣ 18 እና 19ለ) ከሌሎች የተፈተኑ ውህዶች ጋር ሲነፃፀሩ አነስተኛ እንቅስቃሴ አሳይተዋል ምክንያቱም የMBC እሴቶቻቸው ከ156 እስከ 312 μg/100 μL ይደርሳሉ። በሌላ በኩል ደግሞ ውህዶች (8፣ 17 እና 19a) ከፍተኛውን የMBC እሴቶች (625፣ 625 እና 1250 μg/100 μL በቅደም ተከተል) ስለነበራቸው በጣም ተስፋ ሰጪ ነበሩ።
በመጨረሻም፣ በሰንጠረዥ 3 ላይ እንደሚታየው የመቻቻል ደረጃዎች መሠረት፣ የተፈተኑት ውህዶች በድርጊት አሠራራቸው መሠረት በሁለት ምድቦች ሊከፈሉ ይችላሉ፡- የባክቴሪያ ማጥፊያ ውጤት ያላቸው ውህዶች (7፣ 8፣ 10፣ 11፣ 13a፣ 15፣ 18፣ 19b) እና ፀረ-ባክቴሪያ ውጤት ያላቸው ውህዶች (6፣ 13b፣ 14፣ 17፣ 19a)። ከእነዚህም መካከል በጣም ዝቅተኛ ክምችት (39.06 μg/100 μL) ላይ የመግደል እንቅስቃሴን የሚያሳዩ ውህዶች 7፣ 11፣ 13a እና 15 ተመራጭ ናቸው።
ከተመረመሩት አስራ ሶስት ውህዶች ውስጥ አስሩ አንቲባዮቲኮችን የሚቋቋም ሜቲሲሊን የሚቋቋም ስታፊሎኮከስ ኦውሬስ (MRSA) ላይ አቅም እንዳላቸው አሳይተዋል። ስለዚህ፣ ተጨማሪ አንቲባዮቲክን የሚቋቋሙ በሽታ አምጪ ተህዋሲያን (በተለይም በሽታ አምጪ ግራማ-ፖዘቲቭ እና ግራም-ኔጌቲቭ ባክቴሪያዎችን የሚሸፍኑ የአካባቢ ተህዋሲያን) እና በሽታ አምጪ እርሾዎችን እንዲሁም ደህንነቱን ለመገምገም የእያንዳንዱን ውህድ ሳይቶቶክሲክ ምርመራ ማድረግ ይመከራል።
በሜቲሲሊን መቋቋም በሚችል ስቴፕሎኮከስ ኦውሬስ (MRSA) ውስጥ የፔኒሲሊን-ማሰሪያ ፕሮቲን 2a (PBP2a) አጋቾች ሆነው የተቀናጁ ውህዶችን አቅም ለመገምገም የሞለኪውላር ዶክንግ ጥናቶች ተካሂደዋል። PBP2a በባክቴሪያ ሴል ግድግዳ ባዮሲንተሲስ ውስጥ የሚሳተፍ ቁልፍ ኢንዛይም ሲሆን የዚህ ኢንዛይም መከልከል የሴል ግድግዳ ምስረታ ላይ ጣልቃ በመግባት በመጨረሻ ወደ ባክቴሪያ ሊሲስ እና የሴል ሞት1 ይመራል። የመትከያ ውጤቶቹ በሰንጠረዥ 4 ውስጥ ተዘርዝረው ተጨማሪ የውሂብ ፋይል ውስጥ በዝርዝር ተገልጸዋል፣ እና ውጤቶቹ እንደሚያሳዩት በርካታ ውህዶች ለPBP2a ጠንካራ የማሰሪያ ፍቅር አሳይተዋል፣ በተለይም እንደ Lys 273፣ Lys 316 እና Arg 298 ያሉ ቁልፍ ንቁ የጣቢያ ቅሪቶች። የሃይድሮጂን ትስስር እና π-ስታኪንግን ጨምሮ ያሉት መስተጋብሮች ከኮ-ክሪስታላይዝድ ኩዊናዞሊኖን ሊጋንድ (CCL) ጋር በጣም ተመሳሳይ ነበሩ፣ ይህም የእነዚህ ውህዶች እንደ ኃይለኛ አጋቾች ያላቸውን አቅም ያሳያል።
የሞለኪውላር ዶክንግ መረጃ ከሌሎች የኮምፒውተር መለኪያዎች ጋር በመሆን፣ የPBP2a መከልከል የእነዚህ ውህዶች የታየ ፀረ-ባክቴሪያ እንቅስቃሴ ዋና ዘዴ መሆኑን አጥብቀው ጠቁመዋል። የመትከያ ውጤቶች እና የስር አማካኝ ካሬ መዛባት (RMSD) እሴቶች በተጨማሪ የመትከያ ትስስር እና መረጋጋትን አሳይተዋል፣ ይህም ይህንን መላምት ይደግፋል። በሰንጠረዥ 4 ላይ እንደሚታየው፣ በርካታ ውህዶች ጥሩ የመትከያ ትስስር ያሳዩ ቢሆንም፣ አንዳንድ ውህዶች (ለምሳሌ፣ 7፣ 9፣ 10 እና 14) ከኮም-ክሪስታላይዝድ ሊጋንድ የበለጠ የመትከያ ነጥቦች ነበሯቸው፣ ይህም ከPBP2a ንቁ የጣቢያ ቅሪቶች ጋር ጠንካራ መስተጋብር ሊኖራቸው እንደሚችል ያሳያል። ሆኖም፣ በጣም ንቁ የሆኑት ውህዶች 6 እና 13b ከሌሎች ሊጋንድ ጋር ሲነፃፀሩ በትንሹ ዝቅተኛ የመትከያ ነጥቦችን (-5.98 እና -5.63 በቅደም ተከተል) አሳይተዋል። ይህ የሚያመለክተው የመትከያ ውጤቶች የመትከያ ትስስርን ለመተንበይ ጥቅም ላይ ሊውሉ ቢችሉም፣ ሌሎች ምክንያቶች (ለምሳሌ፣ በባዮሎጂካል አካባቢ ውስጥ የሊጋንድ መረጋጋት እና ሞለኪውላዊ ግንኙነቶች) ፀረ-ባክቴሪያ እንቅስቃሴን በመወሰን ረገድ ቁልፍ ሚና ይጫወታሉ። በተለይም፣ የሁሉም የተቀናጁ ውህዶች የ RMSD እሴቶች ከ 2 Å በታች ነበሩ፣ ይህም የመትከያ አቀማመጦቻቸው ከኮ-ክሪስታላይዝድ ሊጋንድ ትስስር አወቃቀር ጋር መዋቅራዊ በሆነ መልኩ የሚጣጣሙ መሆናቸውን ያረጋግጣል፣ ይህም እንደ ኃይለኛ የ PBP2a አጋቾች ያላቸውን አቅም የበለጠ ይደግፋል።
የመትከያ ውጤቶች እና የRMS እሴቶች ጠቃሚ ትንበያዎችን ቢሰጡም፣ በእነዚህ የመትከያ ውጤቶች እና በፀረ-ተህዋሲያን እንቅስቃሴ መካከል ያለው ትስስር በመጀመሪያ ሲታይ ሁልጊዜ ግልጽ አይደለም። ምንም እንኳን የPBP2a መከልከል እንደ ፀረ-ተህዋሲያን እንቅስቃሴ ላይ ተጽዕኖ የሚያሳድር ቁልፍ ነገር ሆኖ በብርቱ የተደገፈ ቢሆንም፣ በርካታ ልዩነቶች ሌሎች ባዮሎጂያዊ ባህሪያትም ጠቃሚ ሚና እንደሚጫወቱ ይጠቁማሉ። ውህዶች 6 እና 13b ከፍተኛውን የፀረ-ተህዋሲያን እንቅስቃሴ አሳይተዋል፣ ሁለቱም የመትከያ ዞን ዲያሜትር 4 ሴ.ሜ እና ዝቅተኛው MIC (9.7 μg/100 μL) እና MBC (78.125 μg/100 μL) እሴቶች፣ ከውህዶች 7፣ 9፣ 10 እና 14 ጋር ሲነፃፀሩ ዝቅተኛ የመትከያ ውጤቶቻቸው ቢኖሩም። ይህ የሚያሳየው የPBP2a መከልከል ለፀረ-ተህዋሲያን እንቅስቃሴ አስተዋጽኦ ቢያደርግም፣ በባክቴሪያ አካባቢ ውስጥ እንደ መሟሟት፣ ባዮአቫሊቲ እና የመስተጋብራዊ ተለዋዋጭነት ያሉ ነገሮች በአጠቃላይ እንቅስቃሴ ላይ ተጽዕኖ ያሳድራሉ። ምስል 11 የመትከያ አቀማመጣቸውን ያሳያል፣ ይህም ሁለቱም ውህዶች በአንጻራዊ ሁኔታ ዝቅተኛ የማሰሪያ ውጤቶች ቢኖራቸውም እንኳ ከPBP2a ቁልፍ ቅሪቶች ጋር መስተጋብር መፍጠር እንደሚችሉ ያሳያል፣ ይህም የመትከያ ውስብስብነቱን ሊያረጋጋ ይችላል። ይህ የሚያሳየው ሞለኪውላዊ መትከያ ስለ PBP2a መከልከል ጠቃሚ ግንዛቤዎችን የሚሰጥ ቢሆንም፣ የእነዚህ ውህዶች የእውነተኛ ዓለም ፀረ-ተሕዋስያን ተፅእኖዎች ሙሉ በሙሉ ለመረዳት ሌሎች ባዮሎጂያዊ ምክንያቶች ግምት ውስጥ መግባት አለባቸው።
የPBP2a ክሪስታል መዋቅርን በመጠቀም (PDB ID: 4CJN)፣ ሜቲሲሊን የሚቋቋም ስታፊሎኮከስ ኦውሬስ (MRSA) በፔኒሲሊን-ማሰር ፕሮቲን 2a (PBP2a) የተተከሉት በጣም ንቁ ውህዶች 6 እና 13b 2D እና 3D መስተጋብር ካርታዎች ተገንብተዋል። እነዚህ ካርታዎች የእነዚህ ውህዶች መስተጋብር ቅጦችን ከዳግም-ተቆልፎ ከተሰራው ኩዊናዞሊኖን ሊጋንድ (CCL) ጋር ያወዳድራሉ፣ እንደ ሃይድሮጂን ትስስር፣ π-ስታኪንግ እና አዮኒክ መስተጋብር ያሉ ቁልፍ ግንኙነቶችን ያጎላሉ።
ለውህድ 7 ተመሳሳይ ንድፍ ታይቷል፣ ይህም በአንጻራዊ ሁኔታ ከፍተኛ የመትከያ ነጥብ (-6.32) እና ከውህድ 10 ጋር ተመሳሳይ የሆነ የመትከያ ዞን ዲያሜትር (3.9 ሴ.ሜ) አሳይቷል። ሆኖም፣ የእሱ MIC (39.08 μg/100 μL) እና MBC (39.06 μg/100 μL) በከፍተኛ ሁኔታ ከፍ ያሉ ነበሩ፣ ይህም ፀረ-ባክቴሪያ ውጤት ለማሳየት ከፍተኛ ክምችት እንደሚያስፈልግ ያሳያል። ይህ የሚያመለክተው ውህድ 7 በመትከያ ጥናቶች ውስጥ ጠንካራ የማሰሪያ ትስስር ቢያሳይም፣ እንደ ባዮአቫሊቲ፣ ሴሉላር መውሰድ ወይም ሌሎች የፊዚኮኬሚካላዊ ባህሪያት ያሉ ምክንያቶች ባዮሎጂያዊ ውጤታማነቱን ሊገድቡ ይችላሉ። ምንም እንኳን ውህድ 7 የባክቴሪያ ማጥፊያ ባህሪያትን ቢያሳይም፣ ከውህድ 6 እና 13b ጋር ሲነጻጸር የባክቴሪያ እድገትን በመግታት ረገድ ብዙም ውጤታማ አልነበረም።
ኮምፖድ 10 ከፍተኛውን የመትከያ ነጥብ (-6.40) በመጠቀም የበለጠ አስገራሚ ልዩነት አሳይቷል፣ ይህም ከPBP2a ጋር ጠንካራ ትስስር እንዳለው ያሳያል። ሆኖም፣ የመትከያ ዲያሜትር (3.9 ሴ.ሜ) ዞኑ ከኮምፖድ 7 ጋር ተመሳሳይ ነበር፣ እና MBC (312 μg/100 μL) ከኮምፖድ 6፣ 7 እና 13b ጋር በእጅጉ ከፍ ያለ ሲሆን ይህም ደካማ የባክቴሪያ ማጥፊያ እንቅስቃሴን ያሳያል። ይህ የሚያመለክተው ጥሩ የመትከያ ትንበያዎች ቢኖሩም፣ ኮምፖድ 10 እንደ መሟሟት፣ መረጋጋት ወይም የባክቴሪያ ሽፋን ደካማ መተላለፊያ ባሉ ሌሎች ገደቦች ምክንያት MRSAን በመግደል ረገድ ብዙም ውጤታማ እንዳልነበረ ነው። እነዚህ ውጤቶች የPBP2a መከልከል በፀረ-ባክቴሪያ እንቅስቃሴ ውስጥ ቁልፍ ሚና የሚጫወት ቢሆንም፣ በተፈተኑት ውህዶች መካከል የሚታዩትን የባዮሎጂካል እንቅስቃሴ ልዩነቶች ሙሉ በሙሉ አያብራራም። እነዚህ ልዩነቶች የተካተቱትን ፀረ-ባክቴሪያ ዘዴዎችን ሙሉ በሙሉ ለማብራራት ተጨማሪ የሙከራ ትንተናዎች እና ጥልቅ ባዮሎጂያዊ ግምገማዎች እንደሚያስፈልጉ ይጠቁማሉ።
የሞለኪውላር መትከያ ውጤት በሰንጠረዥ 4 እና ተጨማሪ የውሂብ ፋይል ውስጥ በመትከያ ውጤቶች እና በፀረ-ተህዋሲያን እንቅስቃሴ መካከል ያለውን ውስብስብ ግንኙነት ያጎላል። ምንም እንኳን ውህዶች 6 እና 13b ከውህዶች 7፣ 9፣ 10 እና 14 ያነሱ የመትከያ ውጤቶች ቢኖራቸውም፣ ከፍተኛውን የፀረ-ተህዋሲያን እንቅስቃሴ ያሳያሉ። የእነሱ የግንኙነት ካርታዎች (በስእል 11 ላይ የሚታዩት) ዝቅተኛ የማሰሪያ ውጤቶቻቸው ቢኖሩም፣ አሁንም ከፍተኛ የሃይድሮጂን ትስስር እና π-የመቆለል ግንኙነቶችን ከPBP2a ቁልፍ ቅሪቶች ጋር ይፈጥራሉ፣ ይህም የኢንዛይም-አጋች ውስብስብን በባዮሎጂያዊ ጠቃሚ መንገድ ሊያረጋጋ ይችላል። በአንጻራዊ ሁኔታ ዝቅተኛ የመትከያ ውጤቶች 6 እና 13b ቢኖሩም፣ የተሻሻለው የፀረ-ተህዋሲያን እንቅስቃሴያቸው እንደ መሟሟት፣ መረጋጋት እና የሴሉላር ቅበላ ያሉ ሌሎች ባህሪያት የመትከያ አቅምን ሲገመግሙ ከመትከያ መረጃ ጋር በማጣመር ግምት ውስጥ መግባት እንዳለባቸው ያሳያል። ይህ የአዳዲስ ውህዶችን የሕክምና አቅም በትክክል ለመገምገም የመትከያ ጥናቶችን ከሙከራ ፀረ-ተህዋሲያን ትንተና ጋር ማዋሃድ አስፈላጊ መሆኑን ያጎላል።
እነዚህ ውጤቶች እንደሚያሳዩት ሞለኪውላዊ መትከያ ትስስርን ለመተንበይ እና ሊሆኑ የሚችሉ የመከልከል ዘዴዎችን ለመለየት ኃይለኛ መሳሪያ ቢሆንም፣ ፀረ-ተሕዋስያን ውጤታማነትን ለመወሰን ብቻውን መተማመን የለበትም። የሞለኪውላዊ መረጃዎች እንደሚያመለክቱት የPBP2a መከልከል ፀረ-ተሕዋስያን እንቅስቃሴን የሚነካ ቁልፍ ነገር ነው፣ ነገር ግን በባዮሎጂካል እንቅስቃሴ ላይ የተደረጉ ለውጦች ሌሎች የፊዚኮኬሚካላዊ እና የፋርማኮኪኔቲክ ባህሪያት የሕክምና ውጤታማነትን ለማሻሻል ማመቻቸት አለባቸው። የወደፊት ጥናቶች ባዮአቫቪላይዜሽን እና የሴሉላር ቅበላን ለማሻሻል የውህዶች 7 እና 10 የኬሚካል መዋቅርን በማመቻቸት ላይ ማተኮር አለባቸው፣ ጠንካራ የመትከያ ግንኙነቶች ወደ ትክክለኛ ፀረ-ተሕዋስያን እንቅስቃሴ እንዲተረጎሙ ማረጋገጥ። ተጨማሪ ባዮአሳይስ እና የመዋቅር-እንቅስቃሴ ግንኙነት (SAR) ትንተናን ጨምሮ ተጨማሪ ጥናቶች እነዚህ ውህዶች እንደ PBP2a አጋቾች እንዴት እንደሚሠሩ እና የበለጠ ውጤታማ ፀረ-ተሕዋስያን ወኪሎችን ለማዘጋጀት ወሳኝ ይሆናሉ።
ከ3-(አንትራሰን-9-ኢል)-2-ሳይያኖአክሪሎይል ክሎራይድ 4 የተዋሃዱ ውህዶች የተለያዩ የፀረ-ተህዋሲያን እንቅስቃሴ ደረጃዎችን አሳይተዋል፣ በርካታ ውህዶች ሜቲሲሊንን የሚቋቋም ስታፊሎኮከስ ኦውሬስ (MRSA) በከፍተኛ ሁኔታ መከልከል አሳይተዋል። የመዋቅር-እንቅስቃሴ ግንኙነት (SAR) ትንተና የእነዚህ ውህዶች ፀረ-ተህዋሲያን ውጤታማነትን የሚነኩ ቁልፍ መዋቅራዊ ባህሪያትን አሳይቷል።
የአክሪሎኒትሪል እና የአንትራሲኔ ቡድኖች መኖራቸው የፀረ-ተህዋሲያን እንቅስቃሴን ለማሻሻል ወሳኝ ሆኖ ተገኝቷል። በአክሪሎኒትሪል ውስጥ ያለው ከፍተኛ ምላሽ ሰጪ የናይትሪል ቡድን ከባክቴሪያ ፕሮቲኖች ጋር ያለውን መስተጋብር ለማመቻቸት አስፈላጊ ነው፣ በዚህም ለውህዱ ፀረ-ተህዋሲያን ባህሪያት አስተዋጽኦ ያደርጋል። ሁለቱንም አክሪሎኒትሪል እና አንትራሲኔን የያዙ ውህዶች በተከታታይ ጠንካራ የፀረ-ተህዋሲያን ተፅእኖ አሳይተዋል። የአንትራሲኔ ቡድን መዓዛ እነዚህን ውህዶች የበለጠ አረጋጋው፣ ምናልባትም ባዮሎጂያዊ እንቅስቃሴያቸውን ሊያሳድጉ ይችላሉ።
የሄትሮሳይክሊክ ቀለበቶች መግቢያ የበርካታ ተዋጽኦዎችን ፀረ-ባክቴሪያ ውጤታማነት በእጅጉ አሻሽሏል። በተለይም የቤንዞቲያዞል ተዋጽኦ 13b እና የአክሪልሃይድራዛይድ ተዋጽኦ 6 ከፍተኛውን የፀረ-ባክቴሪያ እንቅስቃሴ በግምት 4 ሴ.ሜ የሆነ የመከልከል ዞን አሳይተዋል። እነዚህ ሄትሮሳይክሊክ ተዋጽኦዎች የበለጠ ጉልህ የሆኑ ባዮሎጂያዊ ተፅእኖዎችን አሳይተዋል፣ ይህም ሄትሮሳይክሊክ መዋቅር በፀረ-ባክቴሪያ ተፅእኖዎች ውስጥ ቁልፍ ሚና እንደሚጫወት ያሳያል። በተመሳሳይ፣ በኮምፓውንድ 9 ውስጥ ያለው ፒሪሚዲንቲዮን፣ በኮምፓውንድ 10 ውስጥ ያለው ቲዮፒራዞል እና በኮምፓውንድ 11 ውስጥ ያለው ቴትራዚን ቀለበት ለኮምፓውንዶች ፀረ-ባክቴሪያ ባህሪያት አስተዋጽኦ አድርገዋል፣ ይህም የሄትሮሳይክሊክ ማሻሻያ አስፈላጊነትን የበለጠ ያጎላል።
ከተዋሃዱት ውህዶች መካከል 6 እና 13b እጅግ በጣም ጥሩ ፀረ-ባክቴሪያ እንቅስቃሴዎቻቸውን ለይተው አውቀዋል። የውህድ 6 ዝቅተኛው የመከልከል ክምችት (MIC) 9.7 μg/100 μL ሲሆን ዝቅተኛው የባክቴሪያ ማጥፊያ ክምችት (MBC) 78.125 μg/100 μL ሲሆን ይህም ሜቲሲሊንን የሚቋቋም ስቴፕሎኮከስ ኦውሬስን (MRSA) የማጽዳት እጅግ በጣም ጥሩ ችሎታውን ያሳያል። በተመሳሳይ፣ ውህድ 13b 4 ሴ.ሜ እና ዝቅተኛ የ MIC እና MBC እሴቶች የመከልከል ዞን ነበረው፣ ይህም ኃይለኛ የፀረ-ባክቴሪያ እንቅስቃሴውን ያረጋግጣል። እነዚህ ውጤቶች የእነዚህ ውህዶች ባዮኢፊኬሽን ለመወሰን የአክሪሎሃይድራዚድ እና የቤንዞቲያዞል ተግባራዊ ቡድኖች ቁልፍ ሚናዎችን ያጎላሉ።
በአንፃሩ፣ ውህዶች 7፣ 10 እና 14 ከ3.65 እስከ 3.9 ሴ.ሜ የሚደርስ መካከለኛ የፀረ-ባክቴሪያ እንቅስቃሴ አሳይተዋል። እነዚህ ውህዶች ባክቴሪያውን ሙሉ በሙሉ ለመግደል ከፍተኛ ክምችት ያስፈልጋቸዋል፣ ይህም በአንጻራዊነት ከፍተኛ የ MIC እና MBC እሴቶቻቸውን ያሳያል። ምንም እንኳን እነዚህ ውህዶች ከውህዶች 6 እና 13b ያነሰ ንቁ ባይሆኑም፣ አሁንም ከፍተኛ የሆነ የፀረ-ባክቴሪያ አቅም አሳይተዋል፣ ይህም የአክሪሎኒትሪል እና የአንትራሴን ክፍሎች ወደ ሄትሮሳይክሊክ ቀለበት ውስጥ መካተት ለፀረ-ባክቴሪያ ውጤታቸው አስተዋጽኦ እንደሚያደርግ ይጠቁማል።
ውህዶቹ የተለያዩ የአሠራር ዘዴዎች አሏቸው፣ አንዳንዶቹ የባክቴሪያ ማጥፊያ ባህሪያትን የሚያሳዩ ሲሆን ሌሎቹ ደግሞ የባክቴሪያቲክ ተፅእኖዎችን የሚያሳዩ ናቸው። ውህዶቹ 7፣ 11፣ 13a እና 15 ባክቴሪያ ገዳይ ናቸው እና ባክቴሪያዎችን ሙሉ በሙሉ ለመግደል ዝቅተኛ ክምችት ያስፈልጋቸዋል። በተቃራኒው፣ ውህዶቹ 6፣ 13b እና 14 ባክቴሪያቲክ ናቸው እና በዝቅተኛ ክምችት የባክቴሪያ እድገትን ሊገቱ ይችላሉ፣ ነገር ግን ባክቴሪያዎችን ሙሉ በሙሉ ለመግደል ከፍተኛ ክምችት ያስፈልጋቸዋል።
በአጠቃላይ፣ የመዋቅር-እንቅስቃሴ ግንኙነት ትንተና ጉልህ የሆነ የፀረ-ባክቴሪያ እንቅስቃሴን ለማሳካት የአክሪሎኒትሪል እና የአንትራሴን ሞይቲዎችን እና ሄትሮሳይክሊክ መዋቅሮችን ማስተዋወቅ አስፈላጊ መሆኑን ያጎላል። እነዚህ ውጤቶች እንደሚያሳዩት የእነዚህ መዋቅራዊ ክፍሎች ማመቻቸት እና የመሟሟት እና የሽፋን መተላለፊያን ለማሻሻል ተጨማሪ ማሻሻያዎችን ማሰስ የበለጠ ውጤታማ የሆኑ ፀረ-MRSA መድኃኒቶችን ወደመፍጠር ሊያመራ ይችላል።
ሁሉም ሬጀንቶችና መሟሟቶች በመደበኛ ሂደቶች (ኤል ጎምሁሪያ፣ ግብፅ) ተጣርተው ደርቀዋል። የማቅለጫ ነጥቦች በጋለንካምፕ ኤሌክትሮኒክ የማቅለጫ ነጥብ መሳሪያ በመጠቀም ተለይተዋል እና ያለ እርማት ሪፖርት ይደረጋሉ። የኢንፍራሬድ (IR) ስፔክትራ (cm⁻1) በአይን ሻምስ ዩኒቨርሲቲ፣ የሳይንስ ፋኩልቲ፣ የኬሚስትሪ ዲፓርትመንት፣ በቴርሞ ኤሌክትሮን ኒኮሌት iS10 FTIR ስፔክትሮሜተር (ቴርሞ ፊሸር ሳይንቲፊክ፣ ዋልተም፣ ኤምኤ፣ ዩኤስኤ) ላይ የፖታስየም ብሮሚድ (KBr) እንክብሎችን በመጠቀም ተመዝግበዋል።
1H NMR ስፔክትራዎች በ300 ሜኸዝ በGEMINI NMR ስፔክትሮሜትር (GEMINI ማኑፋክቸሪንግ እና ኢንጂነሪንግ፣ አናሃይም፣ ካሊፎርኒያ፣ ዩኤስኤ) እና BRUKER 300 ሜኸዝ NMR ስፔክትሮሜትር (BRUKER ማኑፋክቸሪንግ እና ኢንጂነሪንግ፣ ኢንክ.) በመጠቀም ተገኝተዋል። ቴትራሜቲልሲላን (TMS) ከዲዩተሬትድ ዲሜቲል ሰልፎክሳይድ (DMSO-d₆) ጋር እንደ ውስጣዊ መስፈርት ጥቅም ላይ ውሏል። የNMR መለኪያዎች የተከናወኑት በካይሮ ዩኒቨርሲቲ፣ ጊዛ፣ ግብፅ በሚገኘው የሳይንስ ፋኩልቲ ነው። የኤሌሜንታል ትንተና (CHN) የተከናወነው በፐርኪን-ኤልመር 2400 ኤሌሜንታል አናሊዘር በመጠቀም ሲሆን የተገኙት ውጤቶች ከተሰላው እሴት ጋር በጥሩ ሁኔታ የሚስማሙ ናቸው።
የአሲድ 3 (5 mmol) እና የቲዮኒል ክሎራይድ (5 ml) ድብልቅ ለ4 ሰዓታት በውሃ መታጠቢያ ውስጥ በ65 °ሴ ውስጥ ሞቋል። ከመጠን በላይ የሆነ የቲዮኒል ክሎራይድ በተቀነሰ ግፊት በዲስቴሽን ተወግዷል። የተገኘው ቀይ ጠጣር ተሰብስቦ ያለ ተጨማሪ ማጣሪያ ጥቅም ላይ ውሏል። የመቅለጥ ነጥብ፡ 200-202 °C፣ ምርት፡ 88.5% IR (KBr፣ ν፣ cm−1): 2224 (C≡N), 1737 (C=O). 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 9.26 (s, 1H, CH=), 7.27-8.57 (m, 9H, heteroaromatization). 13C NMR (75 MHz፣ DMSO-d6) δ (ppm): 115.11 (C≡N)፣ 124.82–130.53 (CH አንትራሲን)፣ 155.34፣ 114.93 (CH=C–C=O)፣ 162.22 (C=O)፤ HRMS (ESI) m/z [M + H]+: 291.73111። ተንታኝ። ለC18H10ClNO (291.73) የተሰላ፡ C፣ 74.11፤ H፣ 3.46፤ N፣ 4.80። ተገኝቷል፡ C፣ 74.41፤ H፣ 3.34፤ N፣ 4.66%።
በ0°ሴ፣ 4 (2 ሚሜል፣ 0.7 ግራም) በአንሃይድሮስ ዲዮክሳን (20 ሚሊ ሊትር) ውስጥ ሟሟት እና ሃይድራዚን ሃይድሬት (2 ሚሜል፣ 0.16 ሚሊ ሊትር፣ 80%) ወደታች ተጨምሮ ለ1 ሰዓት ተቀላቅሏል። የተጣለው ጠጣር በማጣራት ተሰብስቦ ከኤታኖል እንደገና ተቀላቅሎ ውህድ 6 እንዲሰጥ ተደርጓል።
አረንጓዴ ክሪስታሎች፣ የማቅለጫ ነጥብ 190-192℃፣ ምርት 69.36%፤ IR (KBr) ν=3424 (NH)፣ 2228 (C≡N)፣ 1720 (C=O)፣ 1621 (C=N) cm−1። 1H-NMR (400 MHz፣ DMSO-d6) δ (ppm): 9.3 (br s፣ H፣ NH፣ ሊለዋወጥ የሚችል)፣ 7.69-8.51 (m፣ 18H፣ ሄትሮአሮማቲክ)፣ 9.16 (s፣ 1H፣ CH=)፣ 8.54 (s፣ 1H፣ CH=)፤ የተሰላ የC33H21N3O (475.53) እሴት፡ C፣ 83.35፤ H፣ 4.45፤ N፣ 8.84። ተገኝቷል፡ C፣ 84.01፤ H፣ 4.38፤ N፣ 8.05%.
4 (2 mmol፣ 0.7 ግራም) በ20 ሚሊ ሊትር አንሃይድሮስ ዲዮክሳን መፍትሄ (ጥቂት ትሪኤቲላሚን ጠብታዎችን የያዘ) ውስጥ ይቀልጡት፣ ፌኒልሃይድራዚን/2-አሚኖፒሪዲን (2 mmol) ይጨምሩ እና በክፍል ሙቀት ውስጥ ለ1 እና ለ2 ሰዓታት በቅደም ተከተል ያዋህዱ። የምላሽ ድብልቁን ወደ በረዶ ወይም ውሃ አፍስሱ እና በተሟሟ ሃይድሮክሎሪክ አሲድ አሲድ ያድርጉ። የተለየውን ጠጣር ያጣሩ እና ከኤታኖል እንደገና ያዋህዱት 7 ለማግኘት እና ከቤንዚን እንደገና ያዋህዱት 8 ለማግኘት።
አረንጓዴ ክሪስታሎች፣ የማቅለጫ ነጥብ 160-162℃፣ ምርት 77%፤ IR (KBr፣ ν፣ cm−1): 3245 (NH)፣ 2222 (C≡N)፣ 1691 (C=O)፣ 1671 (C=O) cm−1። 1H-NMR (400 MHz፣ DMSO-d6): δ (ppm): 10.88 (s፣ 1H፣ NH፣ ሊለዋወጥ የሚችል)፣ 9.15 (s፣ 1H፣ CH=)፣ 8.81 (s፣ 1H፣ CH=)፣ 6.78-8.58 (m፣ 23H፣ ሄትሮሮአሮማቲክ)፤ የተሰላ የC42H26N4O2 እሴት (618.68)፦ C፣ 81.54፤ H፣ 4.24፤ N፣ 9.06። ተገኝቷል፡ C፣ 81.96፤ H፣ 3.91፤ N፣ 8.91%.
4 (2 ሚሜል፣ 0.7 ግራም) በ20 ሚሊ ሊትር አንሃይድሮስ ዲዮክሳን መፍትሄ (ጥቂት ትሪኤቲላሚን ጠብታዎችን የያዘ) ውስጥ ሟሟል፣ 2-አሚኖፒሪዲን (2 ሚሜል፣ 0.25 ግራም) ተጨምሮ ድብልቁ በክፍል ሙቀት ለ2 ሰዓታት ተቀላቅሏል። የምላሽ ድብልቁ ወደ በረዶ ውሃ ውስጥ ፈሰሰ እና በተሟሟ ሃይድሮክሎሪክ አሲድ አሲድ ተጨምሯል። የተፈጠረው ዝናብ ተጣርቶ ከቤንዚን እንደገና ተቀላቅሎ፣ 146-148 °C የመቅለጥ ነጥብ እና 82.5% ምርት ያለው 8 አረንጓዴ ክሪስታሎች ሰጥቷቸዋል፤ የኢንፍራሬድ ስፔክትረም (KBr) ν: 3148 (NH)፣ 2222 (C≡N)፣ 1665 (C=O) cm−1። 1H NMR (400 MHz፣ DMSO-d6): δ (ppm): 8.78 (s፣ H፣ NH፣ ሊለዋወጥ የሚችል)፣ 9.14 (s፣ 1H፣ CH=)፣ 7.36-8.55 (m፣ 13H፣ ሄትሮአሮማቲዜሽን)፤ ለC23H15N3O (348.38) የተሰላ: C፣ 79.07፤ H፣ 4.33፤ N፣ 12.03። የተገኘው: C፣ 78.93፤ H፣ 3.97፤ N፣ 12.36%።
ውህድ 4 (2 ሚሜል፣ 0.7 ግራም) በ20 ሚሊ ሊትር ደረቅ ዲዮክሳን (ጥቂት ትሪኤቲላሚን እና 2 ሚሜል ቲዩሬአ/ሴሚካርባዚድ ጠብታዎችን የያዘ) ውስጥ ፈሰሰ እና ለ2 ሰዓታት በሪፍሉክስ ስር ሞቋል። መሟሟቱ በቫክዩ ውስጥ ተተኗል። ቅሪቱ ድብልቅ ለመስጠት ከዲዮክሳን እንደገና ተቀላቅሏል።