ጃቫስክሪፕት በአሁኑ ጊዜ በአሳሽዎ ውስጥ ተሰናክሏል። ጃቫስክሪፕት ሲሰናከል የዚህ ድህረ ገጽ አንዳንድ ባህሪያት አይሰሩም።
የተወሰኑ ዝርዝሮችዎን እና የፍላጎትዎን ልዩ መድሃኒት በመጠቀም ይመዝገቡ እና የሚያቀርቡትን መረጃ በሰፊው የውሂብ ጎታችን ውስጥ ካሉ መጣጥፎች ጋር እናዛምዳለን እና ወዲያውኑ የፒዲኤፍ ቅጂ በኢሜል እንልክልዎታለን።
ባን-ላን-ጂን ቅንጣቶች በአይጦች ውስጥ የአንጀት ማይክሮባዮታን በማስተካከል እና የአንጀት SCFA Derived-GLP-1 ምርትን ወደነበረበት በመመለስ የዴክስትራን ሶዲየም ሰልፌት ያስከተለውን ሥር የሰደደ የተደጋጋሚ የአንጀት ቁስለት ያዳክማሉ።
ጂያኦ ፔንግ፣1-3፣*ሊ ዢ፣4፣*ዠንግ ሊን፣3፣5 ዱዋን ሊፋንግ፣1 ጋኦ ዠንግዚያን፣2፣5 ዲሁ፣1 ሊ ጂ፣6 ሊ ዢያፎንግ፣6 ሼን ዢያንጎን፣5 ዢያኦ ሀይታኦ21የፔኪንግ ዩኒቨርሲቲ ሼንዘን ሆስፒታል የፋርማሲ ክፍል፣ ሼንዘን፣ የቻይና ሕዝባዊ ሪፐብሊክ፤ 2የሼንዘን ዩኒቨርሲቲ የጤና ሳይንስ ማዕከል የፋርማሲ ትምህርት ቤት፣ ሼንዘን፣ የቻይና ሕዝባዊ ሪፐብሊክ፤ 3የጉይዞ የሕክምና ዩኒቨርሲቲ የምህንድስና ቴክኖሎጂ የምርምር ማዕከል የብሔር ሕክምና እና ባህላዊ የቻይና መድኃኒት ልማት እና አተገባበር የትምህርት ሚኒስቴር፣ የጉይዞ የክልል ቁልፍ ላቦራቶሪ የፋርማሲ፣ የጉይዞ የሕክምና ዩኒቨርሲቲ፣ ጉያንግ፣ የቻይና ሕዝባዊ ሪፐብሊክ፤ 4የጨጓራና የአንጀት ሕክምና ክፍል፣ የፔኪንግ ዩኒቨርሲቲ ሼንዘን ሆስፒታል፣ ሼንዘን፣ የቻይና ሕዝባዊ ሪፐብሊክ፤ 5የፋርማሲ ትምህርት ቤት፣ የጉይዞ የሕክምና ዩኒቨርሲቲ፣ የስቴት ቁልፍ ላቦራቶሪ የሕክምና ተክል ተግባር እና አተገባበር፣ ጉያንግ፤ 6 የላቦራቶሪ ሕክምና ክፍል፣ የፔኪንግ ዩኒቨርሲቲ ሼንዘን ሆስፒታል፣ ሼንዘን፣ ቻይና [email protected] ሼን ዢያንግቹን፣ የፋርማሲ ትምህርት ቤት፣ የጉዙዙ የሕክምና ዩኒቨርሲቲ፣ ዡዙ፣ የቻይና ሕዝቦች ሪፐብሊክ፣ 550004፣ ኢሜይል [email protected] ዓላማ፡ በGLP-1 ላይ የተመሠረተ ሕክምና ለኢንፍላማቶሪ የአንጀት በሽታ አዲስ የሕክምና አማራጭ ነው። ባን-ላን-ጂን (BLG) ቅንጣቶች በተለያዩ የኢንፍላማቶሪ ሁኔታዎች ሕክምና ውስጥ እምቅ ፀረ-ኢንፍላማቶሪ እንቅስቃሴን የሚያሳዩ የታወቀ የፀረ-ቫይረስ TCM ፎርሙላ ናቸው። ሆኖም፣ በኮላይትስ ላይ ያለው ፀረ-ኢንፍላማቶሪ ተጽእኖ እና የተግባር ዘዴው አሁንም ግልጽ አይደለም። ዘዴዎች፡ በአይጦች ውስጥ ዴክስትራን ሶዲየም ሰልፌት (DSS) የሚያስከትል ሥር የሰደደ የድጋሚ ኮላይትስን ለመመስረት። የBLG መከላከያ ውጤትን ለመገምገም የበሽታ እንቅስቃሴ አመላካቾች፣ የጉዳት ሂስቶሎጂካል ምልክቶች እና ፕሮኢንፍላማቶሪ ሳይቶኪን ደረጃዎች ተከናውነዋል። የBLG በአንጀት ማይክሮባዮታ እና አንጀት ላይ የBLG ተጽእኖዎች በሴረም GLP-1 ደረጃዎች እና በአንጀት Gcg፣ GPR41 እና GRP43 አገላለጽ፣ የአንጀት ማይክሮባዮታ ቅንብር፣ የሰገራ SCFAs ደረጃዎች እና የGLP-1 መለቀቅ ከዋና አይጥ ኮሎኒክ ኤፒተልየል ሴሎች SCFA-የተገኘ GLP-1 ምርት። ውጤቶች፡ የBLG ሕክምና የሰውነት ክብደት መቀነስን፣ DAI፣ የአንጀት ማሳጠርን፣ የአንጀት ሕብረ ሕዋስ ጉዳትን እና በኮሎን ቲሹ ውስጥ የTNF-α፣ IL-1β እና IL-6 ፕሮብሌም ሳይቶኪን መጠንን በእጅጉ ቀንሷል። በተጨማሪም፣ የBLG ሕክምና በኮሎቲክ አይጦች ውስጥ የኮሎኒክ Gcg፣ GPR41 እና GRP43 አገላለጽ እና የሴረም GLP-1 መጠንን በከፍተኛ ሁኔታ ወደነበረበት መመለስ እንዲሁም እንደ Akkermansia እና Prevotellaceae_UCG-001 ያሉ SCFA የሚያመነጩ ባክቴሪያዎችን በመጨመር እና እንደ Eubacterium_xylanophilum_group፣ Ruminokoccaceae_UCG-014፣ Intestinimonas እና Oscillibacter ያሉ ባክቴሪያዎችን ብዛት በመቀነስ ይችላል። በተጨማሪም፣ የBLG ሕክምና በኮሎቲክ አይጦች ሰገራ ውስጥ የSCFAዎችን መጠን በከፍተኛ ሁኔታ ሊጨምር ይችላል። በተመሳሳይ ጊዜ፣ በብልቃጥ ውስጥ የተደረጉ ሙከራዎች እንደሚያሳዩት በBLG የታከሙ አይጦች ሰገራ ማውጣት ዋና ዋናዎቹን ትናንሽ የMurine ኮሎኒክ ኤፒተልየል ሴሎች GLP-1ን ያመነጫሉ። መደምደሚያዎች፡- እነዚህ ግኝቶች BLG የፀረ-ኮላይትስ ተጽእኖ እንዳለው ይጠቁማሉ። BLG ቢያንስ በከፊል የአንጀት ማይክሮባዮታን በማስተካከል እና የአንጀት SCFA የተገኘ የGLP-1 ምርትን ወደነበረበት በመመለስ እንደ ሕክምና ሊዳብር የሚችል አቅም አለው። ሥር የሰደደ ተደጋጋሚ የአንጀት ቁስለት ተስፋ ሰጪ መድኃኒቶች። ቁልፍ ቃላት፡ ኮላይትስ፣ ባን-ላን-ጂን ቅንጣቶች፣ የአንጀት ማይክሮባዮታ፣ አጭር ሰንሰለት ፋቲ አሲዶች፣ GLP-1
አልሰርሬቲቭ ኮላይትስ (UC) በተደጋጋሚ ተቅማጥ፣ የሆድ ህመም፣ ክብደት መቀነስ እና በደም ውስጥ በሚከሰት ሰገራ ተለይቶ የሚታወቅ የአንጀት እና የፊንጢጣ የረጅም ጊዜ እብጠት በሽታ ነው።1 በቅርብ ጊዜ፣ የቻይናን ጨምሮ ቀደም ሲል ዝቅተኛ ተጋላጭነት ባላቸው አገሮች ውስጥ የUC ስርጭት እየጨመረ መጥቷል፣ የምዕራባውያን የአኗኗር ዘይቤዎች ተወዳጅነት እየጨመረ መጥቷል።2 ይህ ጭማሪ ለሕዝብ ጤና ከፍተኛ ችግሮች ያስከትላል እና በታካሚዎች የመሥራት ችሎታ እና የህይወት ጥራት ላይ ከባድ ተጽዕኖ ያሳድራል። በተለይም የUC በሽታ አምጪ ተህዋሲያን በአብዛኛው ግልጽ አይደለም፣ ነገር ግን በአጠቃላይ የጄኔቲክስ፣ የአካባቢ ሁኔታዎች፣ የአንጀት ማይክሮባዮታ እና የበሽታ መከላከያ ስርዓት ሁሉም ለUC እድገት አስተዋጽኦ እንደሚያደርጉ ተቀባይነት አለው።3 አሁንም ቢሆን ለUC ምንም አይነት መድኃኒት የለም፣ እና የሕክምናው ዓላማ ክሊኒካዊ ምልክቶችን መቆጣጠር፣ ስርየትን ማስነሳት እና ማቆየት፣ የ mucosal ፈውስን ማሳደግ እና ተደጋጋሚነትን መቀነስ ነው። ክላሲካል ሕክምናዎች አሚኖሳሊሲሌትስ፣ ኮርቲኮስትሮይድስ፣ የበሽታ መከላከያ መድሃኒቶች እና ባዮሎጂካል ያካትታሉ። ሆኖም፣ እነዚህ መድኃኒቶች በተለያዩ የጎንዮሽ ጉዳቶች ምክንያት የተፈለገውን ውጤት ማሳካት አይችሉም።4 በቅርቡ፣ ብዙ የጉዳይ ጥናቶች እንደሚያሳዩት ባህላዊ የቻይና ሕክምና (TCM) ዝቅተኛ መርዛማነት ባለው UC ለማስታገስ ከፍተኛ አቅም አሳይቷል፣ ይህም የሚያመለክተው አዳዲስ የTCM ሕክምናዎች ልማት ለ UC.5-7 ተስፋ ሰጪ የሕክምና ስትራቴጂ ነው​​​​​​​
የባንላንገን ግራኑልስ (BLG) ከባንላንገን ሥር የውሃ ማውጣት የተሰራ ባህላዊ የቻይና መድኃኒት ዝግጅት ነው።8 ከፀረ-ቫይረስ ውጤታማነቱ በተጨማሪ፣ BLG የተለያዩ የእብጠት ሁኔታዎችን ለማከም እምቅ ፀረ-ብግነት እንቅስቃሴ ያሳያል።9,10 በተጨማሪም፣ ግሉኮሲኖሌትስ (R፣S-goitrin፣ progoitrin፣ epiprorubin እና glucoside) ከሬዲክስ ኢሳቲዲስ የውሃ ተዋጽኦዎች ተለይተዋል እና ከኒውክሊዮሳይዶች (ሃይፖክሳንቲን፣ አዴኖሲን፣ ዩሪዲን እና ጓኖሲን) እና እንደ ኢንዲጎ እና ኢንዲሩቢን ካሉ ኢንዲጎ አልካሎይድዎች ተለይተዋል።11,12 ቀደም ሲል የተደረጉ ጥናቶች አዴኖሲን፣ ዩሪዲን እና ኢንዲሩቢን ውህዶች በተለያዩ የእንስሳት የኮላይትስ ሞዴሎች ላይ ኃይለኛ የፀረ-ኮላይትስ ተፅእኖ እንዳላቸው በሚገባ ዘግበዋል።13-17 ሆኖም፣ የBLGን ውጤታማነት በኮላይትስ ውስጥ ለመገምገም በማስረጃ ላይ የተመሰረቱ ጥናቶች አልተካሄዱም። በዚህ ጥናት፣ የBLGን የመከላከያ ውጤት በዴክስትራን ሶዲየም ሰልፌት (DSS) ምክንያት በC57BL/6 አይጦች ላይ መርምረናል እና ተገኝቷል የBLG በአፍ የሚሰጥ አስተዳደር በአይጦች ላይ በዲኤስኤስ ምክንያት የሚመጣውን ሥር የሰደደ የማገገም የአንጀት እብጠት በከፍተኛ ሁኔታ እንዳዳከመው፣ የቁጥጥር ዘዴዎቹ የአንጀት ማይክሮባዮታን ከማስተካከል እና ከአንጀት የሚመነጭ የግሉካጎን-መሰል ፔፕታይድ-1 (GLP-1) ምርትን ወደነበረበት ከመመለስ ጋር የተቆራኙ ናቸው።
የBLG ቅንጣቶች (ከስኳር ነፃ፣ NMPA-የተፈቀደ Z11020357፤ የቤጂንግ ቶንግሬንታንግ ቴክኖሎጂ ልማት ኩባንያ፣ ሊሚትድ፣ ቤጂንግ፣ ቻይና፤ የባች ቁጥር፡ 20110966) ከፋርማሲዎች ተገዝተዋል።DSS (ሞለኪውላር ክብደት፡ 36,000–50,000 ዳልተን) የተገዛው ከMP ባዮሎጂካልስ (ሳንታ አና፣ አሜሪካ) ነው። ሰልፋሳላዚን (SASP) (≥ 98% ንፅህና)፣ ሄማቶክሲሊን እና ኢኦሲን የተገዙት ከሲግማ-አልድሪች (ሴንት ሉዊስ፣ ኤምኦ፣ አሜሪካ) ነው። የማውስ TNF-α፣ IL-1β እና IL-6 luminex የኤሊሳ የሙከራ ኪቶች የተገዙት ከR&D ስርዓቶች (ሚኒኒያፖሊስ፣ ኤምኤን፣ አሜሪካ) ነው። አሴቲክ አሲድ፣ ፕሮፒዮኒክ አሲድ እና ቡቲሪክ አሲድ የተገዙት ከአላዲን ኢንዱስትሪዎች (ሻንጋይ፣ ቻይና) ነው።2-ኤቲልቡቲሪክ አሲድ የተገዛው ከመርክ ኬጋኤ (ዳርምስታድት፣ ጀርመን) ነው።
ከ6-8 ሳምንት እድሜ ያላቸው ወንድ C57BL/6 አይጦች (የሰውነት ክብደት 18-22 ግራም) ከቤጂንግ ዌታሄ ላቦራቶሪ አኒማል ቴክኖሎጂ ኩባንያ (ቤጂንግ፣ ቻይና) የተገዙ ሲሆን በ22 ± 2 °C የሙቀት መጠን ለ12 ሰዓታት ብርሃን/ጨለማ ዑደት ባለው አካባቢ ውስጥ ተከማችተዋል። አይጦቹ ከአዲሱ አካባቢ ጋር እንዲላመዱ ለአንድ ሳምንት የመጠጥ ውሃ የማግኘት ነፃ መዳረሻ ያለው መደበኛ የአይጥ አመጋገብ ተሰጥቷቸዋል። ከዚያም አይጦቹ በዘፈቀደ በአራት ቡድኖች ተከፍለዋል፡ የቁጥጥር ቡድን፣ የDSS ሞዴል ቡድን፣ የSASP የታከመ ቡድን (200 ሚ.ግ/ኪ.ግ፣ በአፍ) እና የBLG የታከመ ቡድን (1 ግ/ኪ.ግ፣ በአፍ)። በምስል 1A ላይ እንደሚታየው፣ በቀደመው ጥናታችን መሠረት፣ በአይጦች ላይ የሙከራ ሥር የሰደደ ተደጋጋሚ የአንጀት ቁስለት ለ5 ቀናት በሦስት ዑደቶች 1.8% DSS፣ ከዚያም ለ7 ቀናት የተቀዳ ውሃ ተጨምሮበታል፣ በቀደመው ጥናታችን መሠረት።18 በSASP እና በBLG የታከሙ ቡድኖች ውስጥ ያሉ አይጦች ከቀን 0 ጀምሮ በየቀኑ በቅደም ተከተል በSASP እና BLG ታክመዋል። በቅድመ ሙከራዎች መሠረት፣ የ BLG በ1 ግ/ኪ.ግ ተቀምጧል። ይህ በእንዲህ እንዳለ፣ የSASP መጠን በሥነ-ጽሑፍ መሠረት በ200 ሚ.ግ/ኪ.ግ ተቀምጧል።4 የቁጥጥር እና የDSS ሞዴል ቡድኖች በሙከራው ጊዜ ሁሉ ተመሳሳይ የውሃ መጠን አግኝተዋል።
ምስል 1 BLG በአይጦች ላይ በ DSS ምክንያት የሚመጣውን ሥር የሰደደ የተደጋጋሚ የአንጀት ቁስለት ያስታግሳል።(ሀ) ሥር የሰደደ የተደጋጋሚ የአንጀት ቁስለት እና ህክምና የሙከራ ዲዛይን፣ (ለ) የሰውነት ክብደት ለውጥ፣ (ሐ) የበሽታ እንቅስቃሴ መረጃ ጠቋሚ (DAI) ውጤት፣ (መ) የአንጀት ርዝመት፣ (ሠ) የአንጀት ተወካይ ምስል፣ (ረ) የኤች እና ኢ ቀለም ኮሎን (ማጉላት፣ ×100) እና (ጂ) ሂስቶሎጂካል ውጤት። መረጃው እንደ አማካይ ± SEM (n = 6) ቀርቧል።##p < 0.01 ወይም ###p < 0.001 ከቁጥጥር (Con) ቡድን ጋር፤ *p < 0.05 ወይም **p < 0.01 ወይም ***p < 0.001 ከ DSS ቡድን ጋር።
የሰውነት ክብደት፣ የሰገራ ወጥነት እና የፊንጢጣ ደም መፍሰስ በየቀኑ ተመዝግቧል። የበሽታ እንቅስቃሴ መረጃ ጠቋሚ (DAI) ቀደም ሲል እንደተገለጸው የሰውነት ክብደት፣ የሰገራ ወጥነት እና የፊንጢጣ ደም መፍሰስ ነጥቦችን በማጣመር ተወስኗል።19 በሙከራው መጨረሻ ላይ ሁሉም አይጦች ተገድለዋል እና ደም፣ ሰገራ እና የአንጀት ክፍል ለተጨማሪ ሙከራዎች ተሰብስበዋል።
የአንጀት ህብረ ህዋስ ፎርማሊን-ተስተካክሎ በፓራፊን ውስጥ ተካትቷል። 5-ማይክሮን ክፍሎች ተሠርተው በሄማቶክሲሊን-ኢኦሲን (ኤች ኤንድ ኢ) ተቀባ፣ ከዚያም ቀደም ሲል እንደተገለጸው ታይተው ነጥብ አስመዝግበዋል።19
የኮሎን ቲሹ አጠቃላይ አር ኤን ኤ በትሪዞል ሪጀንተር (ኢንቪትሮጅን፣ ካርልስባድ፣ ካሊፎርኒያ) ተለይቷል፣ ከዚያም በተገላቢጦሽ ትራንስክሪፕቴዝ (TaKaRa፣ Kusatsu፣ Shiga፣ ጃፓን) cDNA ማውጣት ተወግዷል። መጠናዊ PCR የተከናወነው በSYBR Green Master (Roche፣ Basel፣ Switzerland) በእውነተኛ ጊዜ PCR ስርዓት በመጠቀም ነው። የታርጌት ጂን ግልባጮች ወደ β-actin መደበኛ ተደርገዋል እና መረጃው በ2-ΔΔCT ዘዴ ተተነተነ። የጂን ፕሪመር ቅደም ተከተሎች በሰንጠረዥ 1 ውስጥ ይታያሉ።
የአይጥ ኮሎን ኮሎን ኤፒተልየል ሴል ማግለል እና ባህል ቀደም ሲል እንደተገለጸው ተከናውኗል።20 ባጭሩ፣ ከ6-8 ሳምንት እድሜ ያላቸው አይጦች ኮሎን ለመጀመሪያ ጊዜ በማህፀን መቆራረጥ ከተሰዋ በኋላ ተወግዶ ነበር፣ ከዚያም በረጅም ጊዜ ተከፍተው በሃንስ ሚዛናዊ የጨው መፍትሄ (HBSS፣ ያለ ካልሲየም እና ማግኒዚየም) ታክመው ወደ 0.5-1 ሚሜ ትናንሽ ቁርጥራጮች ተቆርጠዋል። በመቀጠልም፣ ሕብረ ሕዋሳት በ0.4 mg/mL ኮላጅኔዝ XI (ሲግማ፣ ፑል፣ ዩኬ) በነፃ DMEM መካከለኛ ውስጥ ተፈጭተው በ300 xg በክፍል ሙቀት ለ5 ደቂቃዎች ሴንትሪፉጅ ተደርገዋል። እንክብሉን በDMEM መካከለኛ (በ10% የፅንስ የከብት ሴረም፣ 100 ዩኒት/mL ፔኒሲሊን እና 100 µg/mL ስትሬፕቶማይሲን የተጨመረ) በ37 °C እንደገና ያቆዩት እና በናይለን መረብ ውስጥ ያልፉ (የቀዳዳ መጠን ~250 µm)። የኮሎን ኤፒተልየል ሴሎች አሃዞች በመስታወት-ታች ባሉ ምግቦች ውስጥ ተቀምጠው በአሴቲክ አሲድ፣ ፕሮፒዮኒክ አሲድ፣ ቡቲሪክ አሲድ እና የመዳፊት ሰገራ ማውጣት በ37°ሴ፣ 5% CO2 ለ2 ሰዓታት።
የኮሎን ቲሹ ከPBS ጋር ተመሳሳይነት ያለው ሲሆን በአንጀት ቲሹ ውስጥ የሳይቶኪን IL-6፣ TNF-α እና IL-1β ደረጃዎች በሉሚኔክስ ELISA assay kits (R&D systems፣ Minneapolis፣ MN፣ USA) በመጠቀም ተገኝተዋል። በተመሳሳይ፣ በዋናው የሙሪን ኮሎኒክ ኤፒተልየል ሴሎች ሴረም እና ባህል ውስጥ የGLP-1 ደረጃዎች በአምራቹ መመሪያ መሠረት በELISA ኪት (ባዮስዋምፕ፣ ዉሃን፣ ቻይና) ተለይተዋል።
ከሰገራ የተገኘው አጠቃላይ ዲኤንኤ የተወሰደው የዲኤንኤ ማውጣት ኪት (ቲያንገን፣ ቻይና) በመጠቀም ነው። የዲኤንኤ ጥራት እና ብዛት በቅደም ተከተል በ260 nm/280 nm እና 260 nm/230 nm ጥምርታ ተለክቷል። በመቀጠልም፣ እያንዳንዱን የተወጣውን ዲኤንኤ እንደ አብነት በመጠቀም፣ በተለያዩ ክልሎች የ16S rRNA ጂን V3-V4 ክልሎችን ለማጉላት የተወሰኑ ፕሪመሮች 338F (ACTCCTACGGGAGGCAG) እና 806R (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) ጥቅም ላይ ውለዋል። የPCR ምርቶች በQIAquick Gel Extraction Kit (QIAGEN፣ ጀርመን) በመጠቀም ተጠርገዋል፣ በእውነተኛ ጊዜ PCR ተለክተዋል፣ እና በኢሉሚናሚሴክ PE300 ቅደም ተከተል መድረክ (ኢሉሚና ኢንክ.፣ ካሊፎርኒያ፣ አሜሪካ) በመጠቀም ቅደም ተከተል ተደርገዋል። ለባዮኢንፎርማቲክስ ትንተና፣ የውሂብ ሂደት ቀደም ሲል የተዘገቡ ፕሮቶኮሎችን ተከትሎ ተከናውኗል።21,22 በአጭሩ፣ ጥሬ ኤክስፕረስ ፋይሎችን ለማጣራት Cutadapt (V1.9.1) ይጠቀሙ።OTUዎች በሚከተሉት መንገዶች ተሰብስበው ነበር UPARSE (ስሪት 7.0.1001) ተመሳሳይነት ያለው 97% ቁራጭ ያለው ሲሆን UCHIME ደግሞ የቺሜሪክ ቅደም ተከተሎችን ለማስወገድ ጥቅም ላይ ውሏል። የማህበረሰብ ቅንብር ትንተና እና ምደባ የተከናወነው በSILVA ራይቦሶማል አር ኤን ኤ ጂን ዳታቤዝ ላይ በመመስረት የRDP ክላሲፋየር (http://rdp.cme.msu.edu/) በመጠቀም ነው።
የአጭር ሰንሰለት ፋቲ አሲድ (አሴቲክ አሲድ፣ ፕሮፒዮኒክ አሲድ እና ቡቲሪክ አሲድ) ደረጃዎች ቀደም ሲል በታኦ እና ሌሎች እንደገለጹት ተለክተዋል፣ እና አንዳንድ ማሻሻያዎች ተደርገዋል።23 ባጭሩ፣ 100 ሚ.ግ ሰገራ በመጀመሪያ በ0.4 ሚሊ ሊትር ዲአዮናዊ ውሃ ውስጥ ታግዷል፣ ከዚያም 0.1 ሚሊ ሊትር 50% ሰልፈሪክ አሲድ እና 0.5 ሚሊ ሊትር 2-ኤቲልቡቲሪክ አሲድ (ውስጣዊ ደረጃ) ተጨምሮበት በ4°ሴ ሙቀት ውስጥ ተሞቋል። ሴንትሪፉጅ በ12,000 rpm ለ15 ደቂቃዎች በC. የሱፐርናታንቱ በ0.5 ሚሊ ሊትር ኤተር ተወግዶ ለትንታኔ ወደ GC ተወጋ። ለጋዝ ክሮማቶግራፊ (GC) ትንተና፣ ናሙናዎች የነበልባል ionization detector (FID) የተገጠመለት የGC-2010 Plus ጋዝ ክሮማቶግራፍ (ሺማዱ ኢንክ.) በመጠቀም ተተነተኑ። መለያየት የተገኘው በZKAT-624 አምድ፣ 30 ሜ × 0.53 ሚሜ × 0.3 μm (ላንዙ ዞንግኬ አንታይ አናሊቲካል ቴክኖሎጂ ኩባንያ፣ ሊሚትድ፣ ቻይና) በመጠቀም ነው። መረጃው የተገኘው የGC መፍትሄ ሶፍትዌር (ሺማዱ ኢንክ.) በመጠቀም ነው። የተከፈለው ጥምርታ 10፡1 ነበር፣ ተሸካሚው ጋዝ ናይትሮጅን ነበር፣ እና የፍሰት መጠኑ 6 ሚሊ ሊትር/ደቂቃ ነበር። የመርፌው መጠን 1 μL ነበር። የመርፌው እና የመርፌው ሙቀት 300°ሴ ነበር። የምድጃው ሙቀት በ140°ሴ ለ13.5 ደቂቃዎች ተይዞ ከዚያ ወደ 250°ሴ በሆነ ፍጥነት ጨምሯል። የሙቀት መጠኑ 120°ሴ/ደቂቃ ሲሆን የሙቀት መጠኑ ለ5 ደቂቃዎች ተይዟል።
መረጃው እንደ አማካይ ± መደበኛ ስህተት (SEM) ቀርቧል። የውሂብ ጠቀሜታ በአንድ አቅጣጫ ANOVA ተገምግሞ የዱንካን ባለብዙ ክልል ሙከራ ተከትሏል። የግራፍፓድ ፕሪዝም 5.0 ሶፍትዌር (ግራፍፓድ ሶፍትዌር ኢንክ.፣ ሳንዲያጎ፣ ካሊፎርኒያ፣ ዩኤስኤ) ለሁሉም ስሌቶች ጥቅም ላይ ውሏል እና p < 0.05 በስታቲስቲክስ ጉልህ እንደሆነ ተቆጥሯል።
UC ሥር የሰደደ ተደጋጋሚ የአንጀት ቁስለት በሽታ ሲሆን ከባድ የሆድ ህመም፣ ተቅማጥ እና ደም መፍሰስ ያለበት ነው። ስለዚህ፣ በአይጦች ላይ በዲኤስኤስ የሚመጣ ሥር የሰደደ ተደጋጋሚ የአንጀት ቁስለት የBLG ፀረ-ኮላይትስ ውጤታማነትን ለመገምገም ተቋቁሟል (ምስል 1A)። ከቁጥጥር ቡድኑ ጋር ሲነጻጸር፣ በዲኤስኤስ ሞዴል ቡድን ውስጥ ያሉ አይጦች የሰውነት ክብደትን በእጅጉ ቀንሰዋል እና ከፍተኛ DAI ነበራቸው፣ እና እነዚህ ለውጦች ከ24 ቀናት የBLG ህክምና በኋላ በከፍተኛ ሁኔታ ተለውጠዋል (ምስል 1B እና C)። የኮሎን ማሳጠር የUC አስፈላጊ መለያ ነው። በምስል 1D እና E ላይ እንደሚታየው፣ DSS የተቀበሉ አይጦች የኮሎን ርዝመት በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል፣ ነገር ግን በBLG ህክምና ተረጋግጧል። በመቀጠልም፣ የአንጀት እብጠትን ለመገምገም ሂስቶፓቶሎጂካል ትንተና ተካሂዷል። የኤች እና ኢ የተነከሩ ምስሎች እና የፓቶሎጂ ውጤቶች እንደሚያሳዩት የDSS አስተዳደር የኮሎን አርክቴክቸርን በእጅጉ እንዳስተጓጎለ እና የክሪፕት ውድመትን እንዳስከተለ፣ የBLG ህክምና ደግሞ የክሪፕት ውድመትን እና የፓቶሎጂ ውጤቶችን በእጅጉ እንደቀነሰ (ምስል 1F እና G)። በተለይም፣ በ1 ግ/ኪ.ግ መጠን የBLG የመከላከያ ውጤት ከ200 መጠን ጋር ተመሳሳይ ነበር። mg/Kg. እነዚህ ግኝቶች በአጠቃላይ BLG በአይጦች ላይ በዲኤስኤስ ምክንያት የሚመጣውን ሥር የሰደደ ተደጋጋሚ የአንጀት ቁስለት ክብደት ለመቀነስ ውጤታማ መሆኑን ይጠቁማሉ።
TNF-α፣ IL-1β እና IL-6 የኮሎን እብጠት አስፈላጊ የእብጠት ምልክቶች ናቸው። በምስል 2A ላይ እንደሚታየው፣ DSS በኮሎን ውስጥ የTNF-α፣ IL-1β እና IL-6 የጂን አገላለጽ ከቁጥጥር ቡድን ጋር ሲነጻጸር በከፍተኛ ሁኔታ እንዲጨምር አድርጓል። የBLG አስተዳደር እነዚህን በDSS-መካከለኛ የተደረጉ ለውጦችን በእጅጉ ሊቀለብስ ይችላል። በመቀጠል፣ በኮሎን ቲሹ ውስጥ ያሉትን የእብጠት ሳይቶኪኖችን TNF-α፣ IL-1β እና IL-6 ደረጃዎችን ለመወሰን ELISAን ተጠቅመናል። ውጤቶቹም በDSS በሚታከሙ አይጦች ላይ የTNF-α፣ IL-1β እና IL-6 የኮሎን መጠን በከፍተኛ ሁኔታ እንደጨመረ አሳይተዋል፣ የBLG ህክምና ደግሞ እነዚህን ጭማሪዎች እንዳቃለለ ያሳያል (ምስል 2B)።
ምስል 2 BLG በDSS የታከሙ አይጦች ኮሎን ውስጥ TNF-α፣ IL-1β እና IL-6 ፕሮኢንፍላማቶሪ ሳይቶኪኖችን የጂን አገላለጽ እና ማምረትን ይከለክላል።(A) የTNF-α፣ IL-1β እና IL-6 ኮሎን ጂን አገላለጽ፤ (B) የTNF-α፣ IL-1β እና IL-6 ኮሎን ፕሮቲን መጠን። መረጃው እንደ አማካኝ ± SEM (n = 4–6) ቀርቧል።#p < 0.05 ወይም ##p < 0.01 ወይም ###p < 0.001 vs የቁጥጥር (Con) ቡድን፤ *p < 0.05 ወይም **p < 0.01 vs DSS ቡድን።
የአንጀት ዲስቢዮሲስ በ UC.24 በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ውስጥ ወሳኝ ነው። BLG በ DSS የታከሙ አይጦችን የአንጀት ማይክሮባዮታን ይለውጣል ወይ የሚለውን ለመመርመር፣ የአንጀት ይዘት ያለውን የባክቴሪያ ማህበረሰብ ለመተንተን የ16S rRNA ቅደም ተከተል ተከናውኗል። የቬን ዲያግራም ሦስቱ ቡድኖች 385 OTUዎችን እንደሚጋሩ ያሳያል። በተመሳሳይ ጊዜ፣ እያንዳንዱ ቡድን ልዩ OTUዎች ነበሩት (ምስል 3A)። በተጨማሪም፣ በስእል 3B እና C ላይ የሚታየው የChao1 ኢንዴክስ እና የሻነን ኢንዴክስ በBLG የታከሙ አይጦች ውስጥ የሻነን ኢንዴክስ በBLG የታከሙ ቡድኖች ውስጥ በከፍተኛ ሁኔታ ስለቀነሰ የአንጀት ማይክሮባዮታ የማህበረሰብ ልዩነት በBLG የታከሙ አይጦች ውስጥ እንደቀነሰ አሳይተዋል። በሦስቱ ቡድኖች መካከል የክላስተር ቅጦችን ለመወሰን ዋና የክፍል ትንተና (PCA) እና ዋና የኮንትሮባንድ ትንተና (PCoA) ጥቅም ላይ ውለዋል እና በDS የታከሙ አይጦች የማህበረሰብ መዋቅር ከBLG ህክምና በኋላ በግልጽ እንደተለየ አሳይተዋል (ምስል 3D እና E)። እነዚህ መረጃዎች የBLG ህክምና በDSS ምክንያት በሚመጣ ኮላይትስ የተያዙ አይጦች የማህበረሰብ መዋቅር ላይ ከፍተኛ ተጽዕኖ እንዳሳደረ ይጠቁማሉ።
ምስል 3 BLG በዲኤስኤስ ምክንያት በሚመጣ የአንጀት ቁስለት ባለባቸው አይጦች ውስጥ የአንጀት ማይክሮባዮታን ልዩነት ይለውጣል።(A) የቬን ዲያግራም የOTU፣ (B) የChao1 ኢንዴክስ፣ (C) የሻነን የሀብት መረጃ ጠቋሚ፣ (D) የOTU ዋና አካል ትንተና (PCA) ውጤት፣ (E) የOTU ዋና ተባባሪ ትንተና (PCoA) ውጤት ምስል። መረጃው እንደ አማካኝ ± SEM (n = 6) ቀርቧል።**p < 0.01 ከ DSS ቡድን ጋር።
በፌካል ማይክሮባዮታ ውስጥ የተወሰኑ ለውጦችን ለመገምገም፣ የአንጀት ማይክሮባዮታ በሁሉም የታክሶኖሚክ ደረጃዎች ላይ ያለውን ስብጥር ተንትነናል። በምስል 4A ላይ እንደሚታየው፣ በሁሉም ቡድኖች ውስጥ ያሉት ዋና ዋና ፊላዎች Firmicutes እና Bacteroidetes ሲሆኑ፣ ቬሩኮሚክሮቢያ ደግሞ ነበሩ። በDSS የታከሙ አይጦች በሰገራ ማይክሮባይት ማህበረሰቦች ውስጥ ከቁጥጥር አይጦች ጋር ሲነጻጸር የ Firmicutes እና Firmicutes/Bacteroides ጥምርታዎች በከፍተኛ ሁኔታ ጨምረዋል፣ እና እነዚህ ለውጦች ከBLG ሕክምና በኋላ በከፍተኛ ሁኔታ ተለውጠዋል። በተለይም፣ የBLG ሕክምና በDSS ምክንያት በሚመጣው ኮላይትስ በተያዙ አይጦች ሰገራ ውስጥ የቨርሩኮባክቲሪየም አንጻራዊ ብዛት በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል። በቤተሰብ ደረጃ፣ የሰገራ ማይክሮባይት ማህበረሰቦች በላችኖስፒሪሴያ፣ ሙሪባኩላሴያ፣ አክከርማንሲዬሳ፣ ሩሚኖኮክሴያ እና ፕሬቮቴሌሴያ ተይዘዋል (ምስል 4ለ)። ከDSS ቡድን ጋር ሲነጻጸር፣ የBLG መሟጠጥ የአክከርማንሲዬሳ ብዛት እንዲጨምር አድርጓል፣ ነገር ግን የላክኖስፒሬሴያ እና የሩሚኖኮክሴያ ብዛት ቀንሷል። በተለይም፣ በጄነስ ደረጃ፣ ሰገራ ማይክሮባዮታ በላችኖስፒራ_NK4A136_ግሩፕ፣ አክከርማንሲያ እና ፕሬቮቴልሴያ_UCG-001 ተይዟል (ምስል 4C)። ይህ ግኝት የBLG ሕክምና በዲኤስኤስ ፈተና ላይ በሚታየው የማይክሮባዮታ አለመመጣጠን ውጤታማ በሆነ መንገድ እንደቀለለ አሳይቷል፣ ይህም በEubacterium_xylanophilum_group፣ Ruminokoccaceae_UCG-014፣ Intestinimonas እና Oscillibacter መቀነስ እና በአክከርማንሲያ እና ፕሬቮቴልሴያ_UCG-001 መጨመር ተለይቶ ይታወቃል።
ምስል 4 BLG በ DSS ምክንያት በሚመጣው የኮላይትስ አይጦች ውስጥ የአንጀት ማይክሮባዮታ ብዛትን ይለውጣል (ሀ) በፋይለም ደረጃ የአንጀት ማይክሮባዮታ ብዛት፤ (ለ) በቤተሰብ ደረጃ የአንጀት ማይክሮባዮታ ብዛት፤ (ሐ) በጂነስ ደረጃ የአንጀት ማይክሮባዮታ ብዛት። መረጃው እንደ አማካይ ± SEM (n = 6) ቀርቧል።#p < 0.05 ወይም ###p < 0.001 ከቁጥጥር (Con) ቡድን ጋር፤ *p < 0.05 ወይም **p < 0.01 ወይም ***p < 0.001 ከ DSS ቡድን ጋር።
አጭር ሰንሰለት ያላቸው ፋቲ አሲዶች (SCFAs) የአክከርማንሲያ እና የፕሬቮቴልሴሴ_UCG-001 ዋና ዋና ሜታቦላይቶች መሆናቸውን ከግምት ውስጥ በማስገባት፣ አሲቴት፣ ፕሮፒዮኔት እና ቡቲሬት በአንጀት ውስጥ በብዛት የሚገኙ SCFAዎች ሲሆኑ፣ 25-27 አሁንም በጥናታችን ውስጥ ነን። በስእል 5 ላይ እንደሚታየው፣ የፌካል አሲቴት፣ ፕሮፒዮኔት እና ቡቲሬት ክምችት በDSS በሚታከም ቡድን ውስጥ በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል፣ የBLG ሕክምና ግን ይህንን ቅነሳ በአብዛኛው ሊያደናቅፍ ይችላል።
ምስል 5. BLG በ DSS ምክንያት በሚመጣ ኮላይትስ በተያዙ አይጦች ሰገራ ውስጥ የ SCFAs መጠን ይጨምራል።(ሀ) በሰገራ ውስጥ የአሲቲክ አሲድ ይዘት፤ (ለ) በሰገራ ውስጥ የፕሮፒዮኒክ አሲድ ይዘት፤ (ሐ) በሰገራ ውስጥ የቡቲሪክ አሲድ ይዘት። መረጃው እንደ አማካይ ± SEM (n = 6) ቀርቧል።#p < 0.05 ወይም ##p < 0.01 ከቁጥጥር (Con) ቡድን ጋር፤ *p < 0.05 ወይም **p < 0.01 ከ DSS ቡድን ጋር።
በተጨማሪም በጂን ደረጃ ልዩነት SCFA እና በሰገራ ማይክሮባዮታ መካከል ያለውን የፒርሰን ትስስር ኮፊሸንት አስልተናል። በስእል 6 ላይ እንደሚታየው፣ አክከርማንሲያ ከፕሮፒዮኒክ አሲድ (ፒርሰን = 0.4866) እና ከቡቲሪክ አሲድ (ፒርሰን = 0.6192) ምርት ጋር አዎንታዊ ግንኙነት ነበረው። በተቃራኒው፣ ሁለቱም ኢንቴሮሞናስ እና ኦሲሎባክተር ከአሲቴት ምርት ጋር አሉታዊ ግንኙነት ነበራቸው፣ የፒርሰን ኮፊሸንት በቅደም ተከተል 0.4709 እና 0.5104 ናቸው። በተመሳሳይ፣ ሩሚኖኮክሴሴ_UCG-014 ከፕሮፒዮኒክ አሲድ (ፒርሰን = 0.4508) እና ከቡቲሪክ አሲድ (ፒርሰን = 0.5842) ምርት ጋር አሉታዊ ግንኙነት ነበራቸው።
ምስል 6 የፔርሰን የዲሲፓረንሻል SCFAs እና የኮሎኒክ ማይክሮቦች መካከል ያለው የፔርሰን ትስስር ትንተና።(ሀ) ኤቴሮሞናስ ከአሴቲክ አሲድ ጋር፤ (ለ) ከአሴቲክ አሲድ ጋር የመኮሳሰር ባሲለስ፤ (ሐ) አክከርማንሲያ ከፕሮፒዮኒክ አሲድ ጋር፤ (መ) ሩሚኖኮከስ_UCG-014 ከፕሮፒዮኒክ አሲድ ጋር፤ (ሠ) አክከርማንሲያ ከቡቲሪክ አሲድ ጋር፤ (ረ) ) ሩሚኖኮከስ _UCG-014 ከቡቲሪክ አሲድ ጋር።
ግሉካጎን የሚመስል ፔፕታይድ-1 (GLP-1) የፀረ-ኢንፍላማቶሪ ባህሪያት ያለው የፕሮግሉካጎን (Gcg) የሴል አይነት-ተኮር ድህረ-ትርጉም ምርት ነው።28 በስእል 7 ላይ እንደሚታየው፣ DSS በGcg mRNA አገላለጽ ላይ ጉልህ የሆነ ቅነሳ አስከትሏል። የኮሎን እና የBLG ሕክምና ከቁጥጥር ቡድን ጋር ሲነጻጸር በDSS ምክንያት የተፈጠረውን የGcg ቅነሳ በእጅጉ ሊቀለበስ ይችላል (ምስል 7A)። በተመሳሳይ ጊዜ፣ በDSS በሚታከም ቡድን ውስጥ በሴረም ውስጥ የGLP-1 መጠን በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል፣ እና የBLG ሕክምና ይህንን ቅነሳ በአብዛኛው ሊከላከል ይችላል (ምስል 7B)። አጭር ሰንሰለት ያላቸው ፋቲ አሲዶች በG-ፕሮቲን-ተጣማሪ ተቀባይ 43 (GRP43) እና በG-ፕሮቲን-ተጣማሪ ተቀባይ 41 (GRP41) ማግበር በኩል የGLP-1 ፈሳሽን ሊያነቃቁ ስለሚችሉ፣ በኮላይትስ አይጦች ኮሎን ውስጥ GPR41 እና GRP43ን መርምረናል እና የGRP43 እና GPR41 ኮሎኒክ mRNA አገላለጽ ከDSS ፈተና በኋላ በከፍተኛ ሁኔታ ቀንሷል፣ እና የBLG ሕክምና እነዚህን ቅነሳዎች በብቃት ሊያድን ይችላል (ምስል 7C እና D)።
ምስል 7 BLG በ DSS በሚታከሙ አይጦች ውስጥ የሴረም GLP-1 ደረጃዎችን እና የኮሎን Gcg፣ GPR41 እና GRP43 mRNA አገላለጽን ይጨምራል።(A) በአንጀት ቲሹ ውስጥ የGcg mRNA አገላለጽ፤ (B) በሴረም ውስጥ የGLP-1 መጠን፤ (C) በአንጀት ቲሹ ውስጥ የGPR41 mRNA አገላለጽ፤ (D) በአንጀት ቲሹ ውስጥ የGPR43 mRNA አገላለጽ። መረጃው እንደ አማካኝ ± SEM (n = 5–6) ቀርቧል።#p < 0.05 ወይም ##p < 0.01 ከቁጥጥር (Con) ቡድን ጋር፤ *p < 0.05 ከ DSS ቡድን ጋር።
የBLG ሕክምና በDSS በሚታከሙ አይጦች ውስጥ የሴረም GLP-1 መጠንን፣ የኮሎን Gcg mRNA አገላለጽን እና የሰገራ SCFA መጠንን ሊጨምር ስለሚችል፣ ከዋና ዋና የኮሎን ኤፒተልየል ሴሎች GLP-1 ሲለቀቅ አሲቴት፣ ፕሮፒዮኔት እና ቡቲሬት እንዲሁም ከቁጥጥር (F-Con)፣ DSS colitis (F-Con) -DSS) እና BLG-የሚታከም ኮላይትስ (F-BLG) አይጦች በተጨማሪ መርምረናል። በስእል 8A ላይ እንደሚታየው፣ በ2 mM አሲቲክ አሲድ፣ ፕሮፒዮኒክ አሲድ እና ቡቲሪክ አሲድ የታከሙ ዋና የመዳፊት ኮሎን ኤፒተልየል ሴሎች በቅደም ተከተል የGLP-1 ልቀት በከፍተኛ ሁኔታ አነቃቅተዋል፣ ይህም ከቀደምት ጥናቶች ጋር በሚስማማ መልኩ ነው።29,30 በተመሳሳይ፣ ሁሉም F-Con፣ F-DSS እና F-BLG (ከ0.25 ግራም ሰገራ ጋር እኩል የሆነ) የGLP-1ን ከዋና ዋና የኮሎን ኤፒተልየል ሴሎች እንዲለቀቅ በእጅጉ አነሳስተዋል። በተለይም፣ በF-DSS የታከሙ ዋና የመዳፊት ኮሎን ኤፒተልየል ሴሎች የሚለቀቀው የGLP-1 መጠን ከF-Con እና F-BLG የታከሙ ዋና ሴሎች በጣም ያነሰ ነበር። የመዳፊት ኮሎን ኤፒተልየል ሴሎች። (ምስል 8ለ)። እነዚህ መረጃዎች የBLG ሕክምና የአንጀት SCFA-የተገኘ የGLP-1 ምርትን በእጅጉ እንደመለሰ ይጠቁማሉ።
ምስል 8 ከBLG የተገኘ SCFA GLP-1 ከዋናው የሙሪን ኮሎኒክ ኤፒተልየል ሴሎች እንዲለቀቅ ያነቃቃል።(ሀ) አሲቲክ አሲድ፣ ፕሮፒዮኒክ አሲድ እና ቡቲሪክ አሲድ የGLP-1ን ከዋና የሙሪን ኮሎኒክ ኤፒተልየል ሴሎች እንዲለቀቅ አነሳስተዋል፤ (ለ) የሰገራ ማውጣት F-Con፣ F-DSS እና F-BLG የነቃቁ የመጀመሪያ የሙሪን ኮሎኒክ ኤፒተልየል ሴሎች የGLP-1 መጠን ተለቋል። የኮሎኒክ ኤፒተልየል ሴሎች አሊኮቶች በመስታወት-ታችኛው የፔትሪ ምግቦች ውስጥ ተቀምጠው በ2 mM አሲቲክ አሲድ፣ ፕሮፒዮኒክ አሲድ፣ ቡቲሪክ አሲድ እና ሰገራ ማውጣት F-Con፣ F-DSS እና F-BLG (ከ0.25 ግራም ሰገራ ጋር እኩል) ታክመዋል። ለ2 ሰዓታት በ37°ሴ፣ በቅደም ተከተል 5% CO2። ከዋና ዋና የሙሪን ኮሎን ኤፒተልየል ሴሎች የተለቀቀው የGLP-1 መጠን በELISA ተገኝቷል። መረጃው እንደ አማካይ ± SEM (n = 3) ቀርቧል።#p < 0.05 ወይም ##p < 0.01 ከባዶ ወይም F-Con ጋር ሲነጻጸር፤ *p < 0.05 ከ F-DSS ጋር ሲነጻጸር።
ምህፃረ ቃላት፡- ኤሴ፣ አሴቲክ አሲድ፤ ፕሮ፣ ፕሮፒዮኒክ አሲድ፤ ሆኖም ግን፣ ቡቲሪክ አሲድ፤ ኤፍ-ኮን፣ ከቁጥጥር አይጦች የሚገኝ ሰገራ ማውጣት፤ ኤፍ-ዲኤስኤስ፣ ከኮላይትስ አይጦች የሚገኝ ሰገራ ማውጣት፤ ኤፍ-BLG፣ ከBLG-ታክሞ ኮሎን የሚገኝ የእብጠት አይጦች ሰገራ ማውጣት።
በዓለም የጤና ድርጅት እንደ ተከላካይ በሽታ የተዘረዘረው ዩሲ ዓለም አቀፍ አደጋ እየሆነ መጥቷል፤ ሆኖም ግን፣ በሽታውን ለመተንበይ፣ ለመከላከል እና ለማከም ውጤታማ ዘዴዎች አሁንም ውስን ናቸው። ስለዚህ፣ ለ UC አዳዲስ ደህንነቱ የተጠበቀ እና ውጤታማ የሕክምና ስልቶችን ማሰስ እና ማዘጋጀት አስቸኳይ ፍላጎት አለ። ባህላዊ የቻይና መድኃኒት ዝግጅቶች ተስፋ ሰጪ አማራጭ ናቸው ምክንያቱም ብዙ ባህላዊ የቻይና መድኃኒት ዝግጅቶች ባለፉት መቶ ዘመናት በቻይና ህዝብ ውስጥ በ UC ሕክምና ውስጥ ውጤታማ እንደሆኑ ተረጋግጠዋል፣ እና ሁሉም ለሰው እና ለእንስሳት በአብዛኛው ምንም ጉዳት የሌላቸው ባዮሎጂካል ኦርጋኒክ እና ተፈጥሯዊ ቁሳቁሶች ናቸው።31,32 ይህ ጥናት ለ UC ሕክምና ደህንነቱ የተጠበቀ እና ውጤታማ ባህላዊ የቻይና መድኃኒት ዝግጅት ለመፈለግ እና የድርጊት ዘዴውን ለመዳሰስ ያለመ ነው። BLG ጉንፋንን ለማከም የሚያገለግል የታወቀ የቻይና የእፅዋት ቀመር ነው።8,33 በላብራቶሪዎቻችን እና በሌሎችም ውስጥ በተደረገ ጥናት ኢንዲጎ፣ ከ BLG ጋር ተመሳሳይ ጥሬ እቃ የተሰራ ባህላዊ የቻይና መድኃኒት ምርት፣ በሰዎች እና በእንስሳት ላይ በ UC ሕክምና ላይ ከፍተኛ ውጤታማነት እንዳለው አሳይቷል።4,34 ሆኖም፣ የ BLG ፀረ-ኮላይትስ ተፅእኖዎች እና ውጤቶቹ ዘዴው ግልጽ አይደለም። በአሁኑ ጥናት፣ ውጤቶቻችን BLG በ DSS ምክንያት የሚመጣውን የአንጀት እብጠት ውጤታማ በሆነ መንገድ እንደሚያዳክም ያሳያሉ፣ ይህም ከሆድ ማይክሮባዮታ ሞጁል እና ከሆድ-የተገኘ መልሶ ማቋቋም ጋር የተያያዘ ነው። የGLP-1 ምርት።
UC እንደ ክብደት መቀነስ፣ ተቅማጥ፣ የፊንጢጣ ደም መፍሰስ እና ሰፊ የአንጀት ሙሲል ጉዳት ባሉ የተለመዱ ክሊኒካዊ ባህሪያት እንደገና በሚከሰቱ ወቅቶች እንደሚታወቅ ይታወቃል።35 ስለዚህ ሥር የሰደደ እንደገና የሚመጣ የአንጀት ቁስለት ለአምስት ቀናት ሶስት ዑደቶችን በ1.8% DSS በመስጠት እና ከዚያም ለሰባት ቀናት የመጠጥ ውሃ በመስጠት ተወስዷል። በምስል 1ለ ላይ እንደሚታየው፣ ተለዋዋጭ የክብደት መቀነስ እና የDAI ውጤቶች ሥር የሰደደ እንደገና የሚመጣ የአንጀት ቁስለት በተሳካ ሁኔታ እንዲከሰት አመልክተዋል። በBLG ሕክምና በተደረገላቸው ቡድን ውስጥ ያሉ አይጦች ከቀን 8 ጀምሮ ወደ ላይ የሚያድግ ማገገም አሳይተዋል፣ ይህም ከቀን 24 በእጅጉ የተለየ ነበር። ተመሳሳይ ለውጦች በDAI ውጤት ላይም ታይተዋል፣ ይህም የአንጀት ቁስለት ክሊኒካዊ መሻሻል ላይ መሻሻልን ይጠቁማል። በአንጀት ጉዳት እና በእብጠት ሁኔታ፣ የአንጀት ርዝመት፣ የአንጀት ሕብረ ሕዋስ ጉዳት፣ እና የጂን አገላለጽ እና ፕሮኢንፍላማቶሪ ሳይቶኪኖች TNF-α፣ IL-1β እና IL-6 በአንጀት ሕብረ ሕዋስ ውስጥ ማምረት ከBLG ሕክምና በኋላ በእጅጉ ተሻሽለዋል። በአጠቃላይ፣ እነዚህ ውጤቶች BLG በአይጦች ውስጥ ሥር የሰደደ እንደገና የሚመጣ የአንጀት ቁስለት ሕክምና ላይ ውጤታማ መሆኑን በግልጽ ያሳያሉ።
BLG ፋርማኮሎጂካል ውጤቶቹን እንዴት ያከናውናል? በርካታ ቀደም ሲል የተደረጉ ጥናቶች እንደሚያሳዩት የአንጀት ማይክሮባዮታ በUC በሽታ አምጪ ተህዋሲያን ውስጥ ቁልፍ ሚና ይጫወታል፣ እና ማይክሮባዮም ላይ የተመሰረቱ እና ማይክሮባዮም-ተኮር ሕክምናዎች ለUC ሕክምና በጣም ማራኪ ስትራቴጂ ሆነው ብቅ ብለዋል። በዚህ ጥናት፣ የBLG ሕክምና በአንጀት ማይክሮባዮታ ስብጥር ላይ ከፍተኛ ለውጦችን እንዳስከተለ አሳይተናል፣ ይህም የBLG መከላከያ በ DSS ምክንያት በሚመጣው የአንጀት ማይክሮባዮታ ላይ ያለው ተጽእኖ ከጉበት ማይክሮባዮታ ሞጁል ጋር የተያያዘ መሆኑን ይጠቁማል። ይህ ምልከታ የአንጀት ማይክሮባዮታ ሆሞስታሲስን እንደገና ማረም የቲሲኤም ዝግጅቶችን ውጤታማነት ለመረዳት አስፈላጊ አቀራረብ ነው ከሚለው አስተሳሰብ ጋር የሚስማማ ነው።36,37 በተለይም አክከርማንሲያ በአንጀት ሙክ ሽፋን ውስጥ የሚኖር ግራም-ኔጌቲቭ እና በጥብቅ አናሮቢክ ባክቴሪያ ሲሆን ሙሲንን የሚያፈርስ፣ ፕሮፒዮኒክ አሲድ የሚያመነጭ፣ የጎብልት ሴል ልዩነትን የሚያነቃቃ እና ሙኮሳውን የሚጠብቅ ነው። የድንበር ታማኝነት ተግባር።26 በርካታ ክሊኒካዊ እና የእንስሳት መረጃዎች እንደሚያመለክቱት አክከርማንሲያ ከጤናማ ሙኮሳ ጋር በጣም የተቆራኘች ናት፣38 እና የአክከርማንሲያ ስፕ በአፍ የሚወሰድ። የ mucosal እብጠትን በእጅጉ ሊያሻሽል ይችላል።39 የአሁኑ መረጃችን እንደሚያመለክተው የአክከርማንሲያ አንጻራዊ ብዛት ከBLG ሕክምና በኋላ በከፍተኛ ሁኔታ ይጨምራል። በተጨማሪም፣ ፕሬቮቴልሴሴ_UCG-001 SCFA የሚያመነጭ ባክቴሪያ ነው።27 በርካታ ጥናቶች እንደሚያሳዩት ፕሬቮቴልሴሴ_UCG-001 በአንፃራዊነት ዝቅተኛ በሆነ መጠን በኮላይትስ በተያዙ እንስሳት ሰገራ ውስጥ ተገኝቷል።40,41 የአሁኑ መረጃችን በተጨማሪም የBLG ሕክምና በDSS የታከሙ አይጦች አንፃራዊነት ያለው የPrevotellaceae_UCG-001 አንፃራዊ ብዛት በከፍተኛ ሁኔታ ሊጨምር እንደሚችል ያሳያል። በተቃራኒው፣ Oscillibacter ሜሶፊሊክ፣ በጥብቅ አናሮቢክ ባክቴሪያ ነው።42 የኦscillibacter አንጻራዊ ብዛት በUC አይጦች ውስጥ በከፍተኛ ሁኔታ እንደጨመረ እና ከIL-6 እና IL-1β ደረጃዎች እና ከፓቶሎጂካል ውጤቶች ጋር በእጅጉ አዎንታዊ ግንኙነት እንዳለው ሪፖርት አድርጓል።43,44 በተለይም የBLG ሕክምና በDSS የታከሙ አይጦች ሰገራ ውስጥ ያለውን የኦscillibacter አንጻራዊ ብዛት በእጅጉ ቀንሷል። በተለይም እነዚህ የBLG-የተለወጡ ባክቴሪያዎች በጣም SCFA የሚያመነጩ ባክቴሪያዎች ነበሩ። በርካታ ቀደም ሲል የተደረጉ ጥናቶች የSCFAs ጠቃሚ ውጤቶችን አሳይተዋል በአንጀት እብጠት እና የአንጀት ኤፒተልየል ትክክለኛነትን ስለመጠበቅ።45,46 የአሁኑ መረጃችን በዲኤስኤስ በሚታከሙ ሰገራዎች ውስጥ የSCFA አሲቴት፣ ፕሮፒዮኔት እና ቡቲሬት ክምችት በBLG በሚታከሙ አይጦች ላይ በእጅጉ እንደጨመረም ተመልክቷል። እነዚህ ግኝቶች አንድ ላይ ሲወሰዱ፣ የBLG ሕክምና ሥር የሰደደ ተደጋጋሚ የአንጀት ቁስለት ባለባቸው አይጦች ውስጥ በDSS የሚመጣ SCFA የሚያመነጩ ባክቴሪያዎችን ውጤታማ በሆነ መንገድ ሊያሻሽል እንደሚችል በግልጽ ያሳያሉ።
GLP-1 በዋናነት በኢሊየም እና በኮሎን ውስጥ የሚመረተው ኢንክሬቲን ሲሆን የጨጓራ ​​​​ባዶነትን በማዘግየት እና የድህረ-ፕራንዲል የደም ግሉኮስን በመቀነስ ረገድ ትልቅ ሚና ይጫወታል።47 ማስረጃዎች እንደሚያሳዩት ዲፔፕቲዲል ፔፕቲዳሴ (DPP)-4፣ የGLP-1 ተቀባይ አግኖስቲክ እና የGLP-1 ናኖሜዲስን በአይጦች ላይ የአንጀት እብጠትን ውጤታማ በሆነ መንገድ ሊያቃልሉ ይችላሉ።48-51 ቀደም ባሉት ጥናቶች እንደተዘገበው፣ ከፍተኛ የSCFA ክምችት በሰዎች እና በአይጦች ውስጥ ከፕላዝማ GLP-1 መጠን ጋር የተቆራኘ ነበር። 52 የአሁኑ መረጃችን እንደሚያሳየው የBLG ሕክምና ከተደረገ በኋላ የሴረም GLP-1 ደረጃዎች እና የGcg mRNA አገላለጽ በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል። በተመሳሳይ፣ በBLG የታከሙ የኮላይትስ አይጦች ሰገራ ከተወጣጡ በኋላ በኮሎን ባህሎች ውስጥ የGLP-1 ፈሳሽ በከፍተኛ ሁኔታ ጨምሯል ከDS-ታከመ የኮላይትስ አይጦች ሰገራ ከተወጣጡ ማነቃቂያዎች ጋር ሲነጻጸር። SCFAዎች የGLP-1 ልቀትን እንዴት ይነካሉ? ግዌን ቶልኸርስት እና ሌሎችም። SCFA በGRP43 እና GPR41.29 አማካኝነት የGLP-1 ፈሳሽን ሊያነቃቃ እንደሚችል ሪፖርት አድርጓል። የአሁኑ መረጃችን እንደሚያሳየው የBLG ህክምና በDSS የታከሙ አይጦች ኮሎን ውስጥ የGRP43 እና GPR41 mRNA አገላለጽን በእጅጉ ይጨምራል። እነዚህ መረጃዎች የBLG ህክምና GRP43 እና GPR41ን በማግበር SCFA-የተደገፈውን GLP-1 ምርት ወደነበረበት መመለስ እንደሚችል ይጠቁማሉ።
BLG በቻይና ለረጅም ጊዜ ያለ ማዘዣ የሚውል (OTC) መድሃኒት ነው። በኩንሚንግ አይጦች ውስጥ የሚፈቀደው ከፍተኛ የBLG መጠን 80 ግራም/ኪ.ግ ሲሆን ምንም አይነት አጣዳፊ መርዛማነት አልታየም።53 በአሁኑ ጊዜ በሰዎች ላይ የሚመከረው የBLG መጠን (ያለ ስኳር) በቀን ከ9-15 ግራም/ኪ.ግ (በቀን 3 ጊዜ) ነው። ጥናታችን እንደሚያሳየው BLG በ1 ግራም/ኪ.ግ. በዲኤስኤስ ምክንያት የሚከሰት ሥር የሰደደ የዳግም ማስታገሻ የአንጀት ቁስለትን በአይጦች ላይ ያሻሽላል። ይህ መጠን በክሊኒካዊ መንገድ ከሚወሰደው የBLG መጠን ጋር ቅርብ ነው። ጥናታችንም የተግባር አሠራሩ ቢያንስ በከፊል በአንጀት ማይክሮባዮታ ላይ በሚደረጉ ለውጦች የሚመጣ ሲሆን በተለይም እንደ Akkermansia እና Prevotellaceae_UCG-001 ባሉ SCFA የሚያመነጩ ባክቴሪያዎች የአንጀትን የGLP-1 ምርት ወደነበረበት ለመመለስ ይረዳሉ። እነዚህ ግኝቶች BLG ለክሊኒካዊ የአንጀት ቁስለት ሕክምና እንደ እምቅ የሕክምና ወኪል ተጨማሪ ግምት ውስጥ መግባት እንዳለበት ይጠቁማሉ። ሆኖም ግን፣ የአንጀት ማይክሮባዮታን የሚቀይርበት ትክክለኛ ዘዴ በማይክሮባዮታ እጥረት ባላቸው አይጦች እና በሰገራ ባክቴሪያ ንቅለ ተከላ መረጋገጥ አለበት።
ኤሴ፣ አሴቲክ አሲድ፤ ግን፣ ቡቲሪክ አሲድ፤ BLG፣ ፓንዳን፤ DSS፣ ዴክስትራን ሶዲየም ሰልፌት፤ DAI፣ የበሽታ እንቅስቃሴ መረጃ ጠቋሚ፤ DPP፣ ዲፔፕቲዲል ፔፕቲዳሴ፤ FID፣ የነበልባል አዮኔዜሽን ማወቂያ፤ F-Con፣ የአይጦችን የፌካል ጭማቂዎች ይቆጣጠራል፤ F-DSS፣ የDSS ኮላይትስ አይጦች የፌካል ጭማቂዎች፤ F-BLG፣ የBLG የታከሙ ኮላይትስ አይጦች የፌካል ጭማቂዎች፤ GLP-1፣ ግሉካጎን-መሰል ፔፕታይድ-1፤ Gcg፣ ግሉካጎን፤ የጋዝ ክሮማቶግራፊ፣ የጋዝ ክሮማቶግራፊ፤ GRP43፣ G ፕሮቲን-ተጣመረ ተቀባይ 43፤ GRP41፣ G ፕሮቲን-ተጣመረ ተቀባይ 41፤ H&E፣ ሄማቶክሲሊን-ኢኦሲን፤ HBSS፣ የሃንክስ ሚዛናዊ የጨው መፍትሄ፤ OTC፣ OTC፤ PCA፣ ዋና የክፍል ትንተና፤ PCoA፣ ዋና የኮታላይዜሽን ትንተና፤ Pro፣ ፕሮፒዮኒክ አሲድ፤ SASP፣ ሰልፋሳላዚን፤ SCFA፣ አጭር ሰንሰለት ፋቲ አሲዶች፤ የቻይና መድኃኒት፣ ባህላዊ የቻይና መድኃኒት፤ UC፣ አልሰረቲቭ ኮላይት።
ሁሉም የሙከራ ፕሮቶኮሎች በተቋማዊ መመሪያዎች እና የእንስሳት ደንቦች (የሥነ ምግባር ቁጥር A2020157) መሠረት በሼንዘን-ሆንግ ኮንግ የሳይንስ እና ቴክኖሎጂ ዩኒቨርሲቲ የሕክምና ማዕከል (ሼንዘን፣ ቻይና) የእንስሳት ሥነ ምግባር ኮሚቴ ጸድቀዋል።
ሁሉም ደራሲዎች በፅንሰ-ሀሳብ እና ዲዛይን፣ የውሂብ ማግኛ ወይም የውሂብ ትንተና እና ትርጓሜ ላይ ከፍተኛ አስተዋጽኦ አድርገዋል፤ ጽሑፉን በማዘጋጀት ወይም አስፈላጊ የሆኑ ምሁራዊ ይዘቶችን በጥልቀት በማሻሻል ተሳትፈዋል፤ የእጅ ጽሑፉን ለአሁኑ መጽሔት ለማስገባት ተስማምተዋል፤ በመጨረሻም እትሙን ለህትመት አጽድቀዋል፤ ለሁሉም የሥራ ገጽታዎች ኃላፊነት አለባቸው።
ይህ ሥራ የተደገፈው በቻይና ብሔራዊ የተፈጥሮ ሳይንስ ፋውንዴሽን (81560676 እና 81660479)፣ በሼንዘን ዩኒቨርሲቲ የመጀመሪያ ደረጃ ፕሮጀክት (86000000210)፣ በሼንዘን የሳይንስ እና ቴክኖሎጂ ፈጠራ ኮሚቴ ፈንድ (JCYJ20210324093810026) እና በጓንግዶንግ ክልላዊ የሕክምና ሳይንስ እና ቴክኖሎጂ ምርምር ፈንድ (A2020157 እና A2020272)፣ በጊዙ የሕክምና ዩኒቨርሲቲ ፋርማሲ ጊዙ ግዛት በኪይ ላቦራቶሪ (YWZJ2020-01) እና በፔኪንግ ዩኒቨርሲቲ ሼንዘን ሆስፒታል (JCYJ2018009) የገንዘብ ድጋፍ ነው።
1. ታንግ ቢ፣ ዙ ጄ፣ ዣንግ ቢ፣ እና ሌሎችም። በዴክስትራን ሶዲየም ሰልፌት ምክንያት በሚመጣው የሙከራ ኮላይትስ ውስጥ ትሪፕቶላይድ እንደ ፀረ-ብግነት ወኪል የሕክምና አቅም። ፕሪ-ኢሚዩን.2020፤11:592084.doi: 10.3389/fimmu.2020.592084
2. ካፕላን ጂጂ. የአይቢዲ ዓለም አቀፍ ሸክም፡ ከ2015 እስከ 2025። ናት ሬቭ ጋስትሮኢንተሮል ሄፓቶል.2015፤12:720–727.doi: 10.1038/nrgastro.2015.150
3. ፔንግ ጄ፣ ዜንግ ቲቲ፣ ሊ ሹ፣ እና ሌሎችም። ከዕፅዋት የተገኙ አልካሎይድ፡- በእብጠት የአንጀት በሽታ ውስጥ ተስፋ ሰጪ የበሽታ ማሻሻያዎች። ፕሪፋርማኮሎጂ.2019፤10:351.doi:10.3389/fphar.2019.00351
4. ዢያኦ ሃይቴንግ፣ ፔንግ ጂ፣ ዌን ቢ፣ እና ሌሎችም። ኢንዲጎ ናቹራሊስ በአይጦች ውስጥ በዲኤስኤስ ምክንያት በሚመጣ የአንጀት ቁስለት ውስጥ የአንጀት ኦክሲዴቲቭ ውጥረትን እና የTh1/Th17 ምላሾችን ይከላከላል። ኦክሳይድ ሜድ ሴል ሎንግቭ.2019፤2019:9480945.doi: 10.1155/2019/9480945
5. ቼን ኤም፣ ዲንግ ዋይ፣ ቶንግ ዜድ። የሶፎራ ፍላቭሴንስ (ሶፎራ ፍላቭሴንስ) ውጤታማነት እና ደህንነት በቆላ ቁስለት ሕክምና ውስጥ የቻይና የእፅዋት መድኃኒት፡ ክሊኒካዊ ማስረጃዎች እና ሊሆኑ የሚችሉ ዘዴዎች። Prepharmacology.2020;11:603476.doi:10.3389/fphar.2020.603476
6. ካኦ ፋንግ፣ ሊዩ ጂ፣ ሻ ቤንክሲንግ፣ ፓን ኤችኤፍ። ተፈጥሯዊ ምርቶች፡- ለኢንፍላማቶሪ የአንጀት በሽታ ሕክምና የሚሆኑ በሙከራ ደረጃ ውጤታማ መድኃኒቶች። Curr Pharmaceuticals.2019፤25:4893–4913.doi: 10.2174/1381612825666191216154224
7. ዣንግ ሲ፣ ጂያንግ ኤም፣ ሉ ኤ። በባህላዊ የቻይና ሕክምና የአልትራሳውንድ ኮላይትስ ሕክምና ላይ የሚሰጡ አስተያየቶች። ክሊኒካል ሬቭ አለርጂ ክትባት።2013፤44:274–283.doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. ሊ ዞንግቴንግ፣ ሊ ሊ፣ ቼን ቲቲ፣ ወዘተ. የባንላንገን ቅንጣቶች ውጤታማነት እና ደህንነት በወቅታዊ የኢንፍሉዌንዛ ሕክምና ውስጥ፡ በዘፈቀደ ቁጥጥር የሚደረግበት የጥናት ፕሮቶኮል ሙከራ።trial.2015;16:126.doi: 10.1186/s13063-015-0645-x